초록 ▼

도열병균 분생 포자의 부착 정도를 측정할 수 있는 방법을 확립하고, 이 부착에 관련된 물질의 생화학적 특성을 파악하며, extracellularmatrix protein과 integrin이 포자 부착에 어떠한 영향을 미치는지를 조사하였다.
부착기 형성에 관여하는 새로운 신호전달물질로서의 vitamin B1의 역할을 규명하고, 이 vitamin B1이 기존에 알려진 cAMP 또는 calcium 관련신호전달체계와 어떠한 상호작용을 하는지를 조사하였다. 또한, calcium 관련 신호전달체계의 중요한 매개체인 protein kin

도열병균 분생 포자의 부착 정도를 측정할 수 있는 방법을 확립하고, 이 부착에 관련된 물질의 생화학적 특성을 파악하며, extracellularmatrix protein과 integrin이 포자 부착에 어떠한 영향을 미치는지를 조사하였다.
부착기 형성에 관여하는 새로운 신호전달물질로서의 vitamin B1의 역할을 규명하고, 이 vitamin B1이 기존에 알려진 cAMP 또는 calcium 관련신호전달체계와 어떠한 상호작용을 하는지를 조사하였다. 또한, calcium 관련 신호전달체계의 중요한 매개체인 protein kinase C의 역할을 확인하여 calcium관련 신호전달체계가 부착기 형성에 어떠한 영향을 미치는지 분자 생물학적으로 규명하고자 하였다.
도열병균의 침입시 특이적으로 발현되는 벼 유전자를 이용한 새로운 방제법 개발을 위해서는 먼저 친화적, 비친화적 반응 조합을 확립함으로써저항성 기작 연구를 할 수 있는 system을 개발하고, 친화적인 조합에서의 EST 분석을 실시, 방어 관련 유전자를 확보하고 그 발현특성을 분석하고자 하였다.

Abstract ▼

Conidial adhesion of Magnaporthe grisea to rice is an important early event in the infection process. A spore tip mucilage(STM) is expelled from the hydrated conidial apex before the germ tube emergence. However, the chemical properties of STM are not characterized. Treatments of heat and protease K

Conidial adhesion of Magnaporthe grisea to rice is an important early event in the infection process. A spore tip mucilage(STM) is expelled from the hydrated conidial apex before the germ tube emergence. However, the chemical properties of STM are not characterized. Treatments of heat and protease K inhibited conidial adhesion and appressorium formation of this fungus. Treatment of galactose specifically inhibited conidial adhesion and appressorium formation, but other carbon sources did not affect. Treatments of human fibronectin or vitronectin antibodies inhibited conidial adhesion and appressoriumformation. Furthermore, vitronectin antibody was immunolocalized to conidial apex of M. grisea.
Recognition andmediation of extracellular signals are via transmembrane glycoproteins known as integirns. They exhibit specific affinities totripeptide sequence Arg-Gly-Asp (RGD) found in several extracellular matrix components. Treatments of RGD, RGDS, or RGES inhibited conidial adhesion and appressorium formation, but GGGG, GRGD, GRGDS, and GRGDSPK did not inhibit both cell differentiation in M. grisea. Elucidation of the mechanism involved in conidial adhesion is not only of biological interest but mayalso provide the basis for new disease control strategies.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 요약문...3
• SUMMARY...9
• CONTENTS...15
• 목차...19
• 제 1 장 서론...23
• 제1절 연구개발의 필요성...23
• 제 2절 연구개발의 목표...29
• 제 2 장 연구개발 수행 내용 및 결과...31
• 제1절 연구개발 내용...31
• 제 2절 도열병균 분생포장 부착 억제를 통한 새로운 방제법 개발...32
• 1. 서론...32
• 2. 재료 및 방법...33
• 가. 공시균주 및 배양법...33
• 나. 포자 부착 검정...33
• 다. 부착기 형성 검정...33
• 3. 결과 및 고찰...34
• 가. 도열병균 분생포자의 표면 부착에 관련된 물질 규명...34
• 1) 부착정도 측정법 개발...34
• 2) Spore tip muscilage의 특성 규명...37
• 나. 부착물질의 생화학적 특성 규명 및 Integrin의 역할규명...43
• 1) Human fibronectin 및 fibronectin 항체를 이용한 부착억제현상 규명...43
• 2) Integrin의 역할 규명...47
• 제 3절. 도열병균의 부착기 형성 억제를 통한 새로운 방제법 개발...53
• 1. 서론...53
• 2. 재료 및 방법...54
• 가. 공시 균주 및 배양법...54
• 나. 부착기 형성 검정...55
• 다. DNA isolation and manipulation...55
• 라. Fungal transformation...55
• 3. 결과 및 고찰...56
• 가. 도열병균 부착기 형성에 관여하는 물질...56
• 1) Vitamin이 부착기 형성에 미치는 역할 규명...56
• 2) Vitamin이 calcium 및 cAMP 대사에 미치는 영향...60
• 나. 세포내 calcium 대사에 관련된 효소의 역할 및 특성 규명...65
• 1) Calcium/calmodulin-dependent protein kinase C 활성 연구...65
• 2) MPKC의 기능 분석...82
• 제 4절. 도열병균의 침입시 특이적으로 발현되는 벼 유전자를 이용한 새로운 방제법 개발...87
• 1. 서론...87
• 2. 재료 및 방법...89
• 가. 식물 재배 및 병원균 접종...89
• 나. mRNA 분리 및 cDNA libray 제조...89
• 다. Plasmid 분리 및 염기서열 분석...90
• 라. 염기서열 분석...90
• 마. BTH 처리...91
• 바. Abiotic stress 처리...91
• 사. RNA isolation and Northern blot analysis...91
• 아. DNA 분리 및 Southern blot analysis...92
• 3. 결과 및 고찰...93
• 가. 친화적 및 비친화적 조합의 확립...93
• 나. 친화적 조합으로부터 cDNA library 작성 및 expressed sequence tags의 염기서열 분석...97
• 1) cDNA library 작성...97
• 2) Expressed Sequence Yag 염기서열 분석...97
• 3) Functional categorization...108
• 4) Transcript abundance...110
• 5) Expression analysis of 10 ESTs...113
• 다. 방어 관련 유전자의 클로닝 및 발현 특성 분석...116
• 1) PR-la protein을 encoding 하는 벼 cDNA 분리 및 염기서열 분석...116
• 2) Genomic organization of rice PR-1 genes...120
• 3) PR-1 유전자들의 조직 특이적 발현양상...122
• 4) 병원균의 침입에 의한 PR-1 유전자들의 발현...124
• 5) BTH에 의한 PR 유전자들의 발현...126
• 6) Abiotic stress에 의한 PR-1 유전자들의 발현...128
• 3 장 연구개발 목표 달성도 및 대외기여도...130
• 제 4장 연구개발 결과의 활용계획...133
• 제 5장 참고문헌...135