초록 ▼

본 과제에서는 E. coli O157:H7 항원을 분리하고, 이를 이용하여 E. coli O157:H7 특이 단클론항체 및 다클론항체를 개발하며, E. coli O157:H7 특이 항체의 대량생산공정을 확립하여 진단시약에 이용할 항체를 생산한다.
개발된 항체를 이용하여 면역크로마토그래피의 원리를 이용한 rapid test와 ELISA 진단시약을 개발하고, 항체코팅 plate, 효소표지접합체, 항체고정화 스트립, 금입자 접합체 등 각 구성시약의 최적화 및 제조공정의 scale-up으로 100,000 test/batch 규모의

본 과제에서는 E. coli O157:H7 항원을 분리하고, 이를 이용하여 E. coli O157:H7 특이 단클론항체 및 다클론항체를 개발하며, E. coli O157:H7 특이 항체의 대량생산공정을 확립하여 진단시약에 이용할 항체를 생산한다.
개발된 항체를 이용하여 면역크로마토그래피의 원리를 이용한 rapid test와 ELISA 진단시약을 개발하고, 항체코팅 plate, 효소표지접합체, 항체고정화 스트립, 금입자 접합체 등 각 구성시약의 최적화 및 제조공정의 scale-up으로 100,000 test/batch 규모의 경제적인 대량생산공정 확립하며, 확립된 생산 공정으로 시제품을 제조한다.
개발된 E. coli O157:H7 진단시약의 특이도, 민감도, 외국의 발매 제품과의 비교 평가, 시중 유통 식품 검체를 이용한 검사 등으로 식품검사용 진단시약으로서의 적합성을 평가한다.
그리고 최종적으로 본 과제에서 개발한 진단시약의 상업화를 추진하여 제품을 발매한다.

Abstract ▼

The following summarizes the sub-projects according to which the development of the E. coli O157:H7 test will be carried out.
(1) Development of E. coli O157:H7 specific antibodies
Whole-cell, LPS and flagellar antigens of E. coli O157:H7 are isolated and used for development of monoclona

The following summarizes the sub-projects according to which the development of the E. coli O157:H7 test will be carried out.
(1) Development of E. coli O157:H7 specific antibodies
Whole-cell, LPS and flagellar antigens of E. coli O157:H7 are isolated and used for development of monoclonal and polyclonal antibodies. Processes for the large-scale production of the monoclonal and polyclonal antibodies are developed. The produced antibodies will be used for the development of the E. coli O157:H7 tests.
(2) Development of immunoassays for the detection of E. coli O157:H7
Utilizing the antibodies developed in this study, a rapid immunochromato graphic assay and a ELISA are developed. Manufacturing processes of the rapid test and ELISA are scaled up for the production of 100,000 test per batch respectively. Test kits produced by the large-scale manufacturing processes will be used for the final evaluation of the tests.
(3) Evaluation of E. coli O157:H7 tests
Examination using pure cultures and field tests using various retail food products are carried out to evaluate the developed E. coli O157:H7 tests for their sensitivity, specificity and ultimate suitability as a screening test. On the basis of these results, commercialization of the developed E. coli O157:H7 tests will be carried out.

목차 Contents

• 제 1 장 서 론...16
• 제 1 절 연구개발의 필요성...18
• 1. E. coli O157:H7이란?...18
• 1. 국내외 발생 현황...18
• 3. E. coli O157:H7 진단시약 개발의 필요성...19
• 제 2 절 연구개발의 목적 및 범위...21
• 1. 연구개발의 목표...21
• 2. 연구개발의 범위...21
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...24
• 제 1 절 E. coli O157:H7의 진단기술 연구 현황...26
• 1. 외국의 연구 현황...26
• 2. 국내 연구 현황...28
• 제 2 절 외국의 제품개발 현황...29
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과...32
• 제 1 절 E. coli O157:H7 특이 항체의 개발...34
• 1. 연구방법...34
• 2. 연구결과...41
• 제 2 절 Rapid test kit 개발...49
• 1. 진단시스템 설계...49
• 2. Rapid test kit 구성시약 제조공정 개발...50
• 3. Rapid test kit 대량생산 기술 개발...52
• 4. 결론...56
• 제 3 절 ELISA kit 개발...57
• 1. 진단시스템 설계...57
• 2. ELISA kit 구성시약 제조공정 개발...57
• 3. ELISA kit의 대량생산공정 개발...60
• 4. 결론...61
• 제 4 절 진단 키트 유효성 평가...62
• 1. 연구방법...62
• 2. 연구 결과...67
• 3. 결론...77
• 제 5 절 제품화...79
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도...80
• 제 1 절 연구개발목표 달성도...82
• 1. 연구개발 목표 및 평가의 착안점...82
• 2. 달성도...83
• 제 2 절 대외 기여도...84
• 1. 경제·산업적 측면...84
• 2. 기술적 측면...85
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...86
• 제 1 절 추가연구의 필요성...88
• 제 2 절 타연구에의 응용...88
• 제 3 절 기업화 추진방안...88
• 1. Rapid test kit...88
• 2. ELISA kit...89
• 제 6 장 참고문헌...90