초록 ▼

·연구목적본 연구과제의 최종목표는 만성질환의 치료를 위해 한국에서 널리 이용되는 한방처방이 무기질 중 특히 한국인에 있어서 결핍이 우려되는 칼슘과 철분의 체내 이용율에 미치는 영향을 소장 및 신장 상피세포주모델을 이용한 in vitro system과 실험동물모델에서 체계적으로 평가하므로서 한방처방의 식품안전성 및 국민영양증진에 미치는 영향을 평가하고자 하였다.·연구방법1차년도:소장상피세포주모델(Caco-2세포)을 대상으로 한약처방의 전처리 시간과 농도를 달리하여 칼슘과 철분의 uptake 및 net transport 활성을 측정하였

·연구목적본 연구과제의 최종목표는 만성질환의 치료를 위해 한국에서 널리 이용되는 한방처방이 무기질 중 특히 한국인에 있어서 결핍이 우려되는 칼슘과 철분의 체내 이용율에 미치는 영향을 소장 및 신장 상피세포주모델을 이용한 in vitro system과 실험동물모델에서 체계적으로 평가하므로서 한방처방의 식품안전성 및 국민영양증진에 미치는 영향을 평가하고자 하였다.·연구방법1차년도:소장상피세포주모델(Caco-2세포)을 대상으로 한약처방의 전처리 시간과 농도를 달리하여 칼슘과 철분의 uptake 및 net transport 활성을 측정하였고, 한약처방이 칼슘의 신세뇨관 재흡수율에 미치는 영향을 평가하기 위하여 신장상피세포주모델(LLC-PK1)을 대상으로 칼슘의 transport 활성을 측정하였다.2차년도:빈혈을 유도한 흰쥐를 한약처방이 함유된 실험식이로 4, 12, 및 25일간 사육시킨 후 혈액을 채취하여 헤모글로빈농도, 혈중철분농도, 평균적혈구용적율(MCV)을 측정하였고, hemoglobin repletion assay를 이용하여 relative bioligical value(RBV)를 평가하였다. 희생 전 3일간 채취한 소변 및 대변내 칼슘 및 철분 배설량을 측정하고 Chemical balance 방법에 준해 칼슘 및 철분의 겉보기흡수율과 체내보유율을 평가하였다.

Abstract ▼

OBJECTIVESThe final objective of this study was to evaluate the effect of long term consumption ofcommonly used herbal medicine prescriptions on calcium and iron bioavailability using an in vitroandinvivoexperimentalsystem.1st year:Objectives of the 1st year study were to evaluate effects of herbal

OBJECTIVESThe final objective of this study was to evaluate the effect of long term consumption ofcommonly used herbal medicine prescriptions on calcium and iron bioavailability using an in vitroandinvivoexperimentalsystem.1st year:Objectives of the 1st year study were to evaluate effects of herbal medicine prescriptions on Ca and Fe uptake and net transport by Caco-2, human colon carcinoma cell line, and on Ca reabsorption by kidney using the LLC-PK1 cell line derived from porcine kidney proximal tubule epithelial cell line.2nd year:Objectives of the 2nd year study were to evaluate the effect of long term consumption of herbal medicine prescriptions on Ca and Fe absorption rates and bioavailability in an iron-deficient rat model.METHODS1st yearWe used Caco-3 cell line to study the effects of five commonly used herbal medicine prescriptions on calcium uptake and transport in intestinal brush border membrane and basolateral membrane, respectively. Effects of five commonly used herbal medicine prescriptions on renal Ca resorption were evaluated in cultured kidney epithelial cell line LLC-PK₁ using $^{45}$Ca in the uptake medium.2nd yearEffects of five herbal medicine prescriptions on bioavailabilities of Ca and Fe in rats was evaluated using hemoglobin-repletion bioassay. Young SD male rats (3weeks old, 57.5±0.5g) were depleted of iron by feeding an iron-deficient diet for 4 weeks prior to starting the experimental diets contained herbal medicine prescriptions. Anemic rats were randomly divided into 18 groups (n=8), and fed one of the experimental diets for 4, 12 and 25 days, respectively. Serum levels of iron: UIBC, TIBC and transferrin saturation, and blood levels of HgB, hematecrit and MCV were measured. Chemical balance study was conducted to measure apparent absorption and retention rates of these minerals.

목차 Contents

• I. 연구개발사업 최종보고서 요약문...6
• II. 총괄연구개발과제 연구결과...10
• 1. 최종 연구개발 목표...11
• 1-1. 연구의 배경...11
• (1) 연구개발 현황, 문제점 및 전망...11
• (2) 국내 연구개발의 필요성...12
• (3) 국내외 기술정보 동향...13
• (4) 기존 연구와의 차이점...14
• (5) 예비연구(Preliminary study) 결과...15
• 1-2. 연구개발의 목표 및 범위...18
• (1) 최종목표...18
• (2) 연차별 목표 및 연구개발 범위...18
• 1-3. 연차별 연구개발 추진계획...21
• 2. 연구개발 내용 및 결과...22
• 2-1. 연구개발의 내용 및 방법...22
• 1차년도...22
• (1) 한약처방제의 추출 및 시료의 제조...22
• (2) 한방처방의 무기질함량 분석...22
• (3) 세포배양...23
• (4) 세포생존율 분석...24
• (5) Brush border membrane 지표효소의 측정...24
• (6) 칼슘 및 철분의 uptake 활성 측정...25
• (7) 칼슘의 Net transport 측정...26
• (8) 신장상피세포주모델에서 칼슘의 transport 측정...27
• (9) 통계분석...27
• 2차년도...28
• (1) 실험식이 및 실험동물의 사육...28
• (2) Hemoglobin repletion bioassay를 이용한 철분 영양상태의 평가...33
• (3) Chemical balance 방법을 이용한 칼슘 및 철분의 장내 흡수율 평가...34
• (4) 혈청, 대변 및 소변시료의 미량원소 농도 분석...35
• (5) 통계처리...35
• 2-2. 연구결과...36
• 1차년도...36
• (1) 한약처방제의 무기질함량...36
• (2) 한약처방이 소장상피세포를 통한 칼슘 흡수에 미치는 영향...36
• (3) 한약처방제가 소장상피세포를 통한 철분흡수에 미치는 영향...45
• (4) 한약처방제가 신세뇨관을 통한 칼슘 재흡수에 미치는 영향...47
• 2차년도...51
• (1) 식이효율(food efficiency), 체중 증가랑 및 장기무게...51
• (2) 한약처방제의 섭취가 혈중 철분 영양상태에 미치는 영향...55
• (3) 한약처방제의 섭취가 철분 및 칼슘의 체내 흡수율에 미치는 영향...70
• (4) 한약처방제의 섭취가 혈중 항산화무기질 농도 및 배설량에 미치는 영향...77
• 3. 연구결과 고찰 및 결론...87
• 1차년도...87
• (1) 1차년도 연구결과에 대한 고찰...87
• (2) 1차년도 연구의 결론 및 요약...89
• 2차년도...92
• (1) 2차년도 연구결과에 대한 고찰...92
• (2) 2차년도 연구결과의 결론 및 요약...95
• [참고문헌]...97
• 4. 총괄연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도...102
• (1) 학술지 게재...102
• (2) 학회발표...102
• (3) 학위논문...102
• (4) 산업재산권...103
• (5) 기타 연구성과...103
• (6) 총괄연구개발과제의 목표달성도...103
• 5. 총괄연구개발과제의 활용계획...104
• (1) 연구종료 2년후 예상 연구성과...104
• (2) 연구성과의 활용계획...104
• 6. 첨부서류...105
• 1) 임현정, 황귀서, 박태선. 자혈양근탕 및 양혈장근건보환이 인체 소장상피세포주 모델(Caco-2)에서 칼슘 흡수에 미치는 영향. 한국영양학회지 35(4) : 446-453, 2002...106
• 2) Park JY, Park TS. Effects of herbal medicine prescription on calcium net transport by the porcine proximal tubular cell line LLC-PK1. Federations of American society for Experimental Biology, New Oreleans, LA, U.S.A., Apr 20-24, 2002...114
• 3) 임현정, 황귀서, 박태선. 한방처방이 인체소장암세포주(Caco-2) 모델에서 칼슘 uptake에 미치는 영향. 한국영양학회 춘계연합학술대회, 서울, 고려대학교, 2001. 5. 26...116
• 4) 임형정, 황귀서, 박태선. 한방처방이 인체소장암세포주(Caco-2) 모델에서 칼슘 net transport에 미치는 영향. 한국영양학회 추계학술대회, 서울, 한국과학기술회관, 2001. 11. 2...118