초록 ▼

식물배양세포 고발현 SWPA2 프로모터를 이용하여 인체락토페린을 식물세포내 혹은 식물세포 소기관(엽록체, 액포, ER 등)에서 발현하는 형질전환용 벡터 8종류 벡터를 kanamycin이 선발표지인 pCGN1578 벡터 및 hygromycin 저항성 유전자를 선발표지로 한 pCAMBIA 벡터를 이용하여 각각 제작하여 형질전환에 이용하였다.
형질전환 담배 BY2 현탁배양세포주에서 인체락토페린의 함량은 최고 2. 2 μg/g freshwt , 0. 4 μg/mg protein이었으며 배지로 분비된 단백질의 1. 3%를 차지하였다.

식물배양세포 고발현 SWPA2 프로모터를 이용하여 인체락토페린을 식물세포내 혹은 식물세포 소기관(엽록체, 액포, ER 등)에서 발현하는 형질전환용 벡터 8종류 벡터를 kanamycin이 선발표지인 pCGN1578 벡터 및 hygromycin 저항성 유전자를 선발표지로 한 pCAMBIA 벡터를 이용하여 각각 제작하여 형질전환에 이용하였다.
형질전환 담배 BY2 현탁배양세포주에서 인체락토페린의 함량은 최고 2. 2 μg/g freshwt , 0. 4 μg/mg protein이었으며 배지로 분비된 단백질의 1. 3%를 차지하였다. 인체락토페린 고생산 현탁배양 담배 배양세포주는 정지기 배양 단계에서 30. 1-43. 5 μg/g frwt을 생산하였으며 총 생산된 인체락토페린은 11. 5-16. 3 mg/L로 전체 수용성 단백질의 3. 6%-4. 7%를 차지하였으며, 추출한 단백질은 항박테리아 활성을 나타내었다.
인체락토페린을 생산하는 두릅나무과 약용식물인 가시오갈피 및 인삼 배양세포주를 개발하였으며, 가시오갈피의 경우 평균 71. 5 μg/g frwt(전체 수용성 단백질의 1. 1%)및 고생산 세포주의 경우 140 μg/g frwt(전체 수용성 단백질의 1. 7%)의 인체락토페린을 생산하였다. 형질전환 가시오갈피 현탁배양세포의 경우 세포배양 정지기에 이르러 생산되는 인체락토페린의 함량은 전체 수용성 단백질의 약 5%를 차지하였다. 인삼 배양세포주의 경우 인체락토페린의 함량은 평균 100. 7 μg/g frwt(전체 수용성 단백질의 2. 4%) 및 고생산 세포주의 경우 155 μg/g frwt(전체 수용성 단백질의 3. 0%)이었다. 인체락토페린을 고생산하는 가시오갈피 배양세포주의 경우 500 L 탱크배양을 통한 대량배양에 성공하였다.
가시오갈피 배양세포로부터 추출한 다당류층은 total spleencell 을 증식시켰으며 그 중 B cel l 의 증식을 선택적으로 증가시켰으며 B cel l 의 항체형성을 강하게 증가시켰으나 Tcell 의 cytokine 형성을 증가시키지 않았다. 또한 macrophage nitricoxide 형성 증가 및 macrophage 유래 cytokine 유전자 발현을 강하게 증가시켰다. 형질전환 가시오갈피 배양세포는 패혈증 억제 및 항염증 작용을 나타내었다.

Abstract ▼

- Lact of erri n i s an i ron-bi ndi ng gl ycoprot ei n of approxi mat el y 80kDa, whi ch was ori gi nal l y f ound i n mi l k.
- Human l act of erri n (hLf ) pl ays si gni f i cant prot ect i ve rol es i n human mi l k, such as ant i bact eri al , ant i f ungal , ant i -endot oxi n, and ant i vi

- Lact of erri n i s an i ron-bi ndi ng gl ycoprot ei n of approxi mat el y 80kDa, whi ch was ori gi nal l y f ound i n mi l k.
- Human l act of erri n (hLf ) pl ays si gni f i cant prot ect i ve rol es i n human mi l k, such as ant i bact eri al , ant i f ungal , ant i -endot oxi n, and ant i vi ral act i vi t i es.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 초록...3
• 요약문...4
• SUMMARY...11
• CONTENTS...20
• 목차...21
• 제1장 연구개발과제의 개요...22
• 제2장 국내외 기술개발 현황...23
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...25
• 제1절 인체락토페린 식물발현벡터 제작 및 형질전환...25
• 제2절 인체락토페린을 생산하는 담배 배양세포주 개발 및 특성분석...28
• 제3절 인체락토페린 고생산 인삽 배양세포주 개발 및 특성분석...42
• 제4절 인체락토페린 생산 가시오갈피 배양세포주 개발 및 특성분석...52
• 제5절 가시오갈피 배양세포의 생리활성 분석...63
• 제6절 가시오갈피 배양세포의 대량배양...83
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...91
• 1. 연구개발 목표 및 달성도...91
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...94
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...95
• 제7장 참고문헌...96