초록 ▼

본 과제는 B형 간염 바이러스 (hepatitis B virus, HBV)에서 유래한 유전자 치료용 재조합 벡터개발을 연구목표로 한다. HBV는 간세포에만 특이적으로 감염하므로 간 적중형 유전자치료벡터로 사용될 수 있을 것이다. HBV는 DNA를 게놈으로 가지는 바이러스이지만, 레트로 바이러스와 유사하게, RNA를 주형으로 하여 역전사(reverse transcription)를 통해 바이러스의 DNA 게놈을 복제한다. HBV의 역전사 복제의 기본전략을 규명되었으나, cis-acting element는 아직 규명되지 않았다. HBV를

본 과제는 B형 간염 바이러스 (hepatitis B virus, HBV)에서 유래한 유전자 치료용 재조합 벡터개발을 연구목표로 한다. HBV는 간세포에만 특이적으로 감염하므로 간 적중형 유전자치료벡터로 사용될 수 있을 것이다. HBV는 DNA를 게놈으로 가지는 바이러스이지만, 레트로 바이러스와 유사하게, RNA를 주형으로 하여 역전사(reverse transcription)를 통해 바이러스의 DNA 게놈을 복제한다. HBV의 역전사 복제의 기본전략을 규명되었으나, cis-acting element는 아직 규명되지 않았다. HBV를 유전자치료벡터로 개발하는 기본전략은 복제에 필수적인 cis-acting element를 완전히 규명한 후, 이들을 제외한 dispensable region에 치료용 transgene을 삽입하여 발현하고자하는 전략이다. 본 과제에서는 HBV의 복제에 필수적인 B형 간염 바이러스 유전자의 네 가지의 cis-element (${\alpha}, {\beta}, {\gamma}$, and ${\delta}$ element)를 규명하였다. 이러한 결과를 바탕으로 원형 (prototype)의 HBV 벡터를 설계할 수 있었다 (Ryu, et at., “Hepatitis B Virus Vectors for Gene Therapy”, US Patent 09／837,293, filed on April 19, 2001). 위에서 설계된 HBV 벡터의 결손가능부위에 transgene을 삽입하여 그 복제를 조사하기 위해 GFP 유전자를 삽입시킨 플라스미드 (PCMV-HBV／GFP)를 제조하고 이벡터의 replication-competence을 확인함으로써 유전자 치료 벡터로서의 유용성을 확인하였다. 결론적으로, 원형의 HBV벡터는 transgene을 삽입하여도 복제능 (replication competent)에 손상이 없으므로 유용한 유전자 치료벡터로의 가능성이 확인(proof of principle)되었다.

Abstract ▼

The objective of this project to develop a liver-targeting gene t herapy vector that is derived from hepatitis B virus(HBV). since HBV is a hepatotropic virus, a gene therapy vector derived from HBV, if it exists, will be liver-specific. Such HBVvectors w ill be used to treat numersous liver disease

The objective of this project to develop a liver-targeting gene t herapy vector that is derived from hepatitis B virus(HBV). since HBV is a hepatotropic virus, a gene therapy vector derived from HBV, if it exists, will be liver-specific. Such HBVvectors w ill be used to treat numersous liver diseases as well as genetic diseases. Although it is a DNA virus, HBV replicates its DNA genome via reverse transcription. Its replication strategy is revealed by genetic analysis, cis-acting elements essential for the viral genome replication is not fully determined. To develop a HBV gene therapy vector, we determined all cis-acting elements essential for the viral genome replication, which consist of for novel elements (${\alpha},{\beta},{\gamma}$, and ${\delta}$ element) located on the 3.2 kb genome. Based on these findings, we designed a prototype HBV vector that can support the viral genome replication. In conclusion, our work provided a proof of principle that HBV-derived gen e therapy vector can be feasible and it can be used to treat numerous liver-speciic diseases.

목차 Contents

• 제 1 장 연구개발과제의 개요...8
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...8
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...8
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...17
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...18
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...18
• 제 7 장 참고문헌...18
• 첨부 1> 특정연구개발사업 연구결과 활용계획서...22
• 첨부 2> 기술요약서...26