초록 ▼

- 핵치환에 의해 생산된 소 배반포에서 ICM, TE 및 전체세포수를 조사한 결과, TE세포수가 체내나 체외수정에 의해 생산된 배반포에 비해 현저히 낮게 나타났음. 따라서 핵치환 배반포의 경우 ICM의 비율이 비정상적으로 높게 나타난다는 것을 알 수 있었음.
- 소 복제수정란에서 single-copy gene인 소의 epidermal cytokeratin gene과 beta-lactoglobulin gene의 promoter sequences에 대한 methylation 양상을 조사한 결과, 반복염기서열을 대상으로 한 결과와는

- 핵치환에 의해 생산된 소 배반포에서 ICM, TE 및 전체세포수를 조사한 결과, TE세포수가 체내나 체외수정에 의해 생산된 배반포에 비해 현저히 낮게 나타났음. 따라서 핵치환 배반포의 경우 ICM의 비율이 비정상적으로 높게 나타난다는 것을 알 수 있었음.
- 소 복제수정란에서 single-copy gene인 소의 epidermal cytokeratin gene과 beta-lactoglobulin gene의 promoter sequences에 대한 methylation 양상을 조사한 결과, 반복염기서열을 대상으로 한 결과와는 다르게 탈메틸화가 상실배기부터 일어나고 있음을 확인함.
- 복제수정란의 비정상적 세포구성과 methylation 양상이 복제동물 발생의 저하를 초래하는 원인이라는 사실을 제시함. 복제수정란의 경우 태반형성에 주로 관여하는 TE세포에서 demethylation이 제대로 일어나고 있지 않음을 알게 되었음.
- 돼지 복제수정란에서 satellite DNA의 methylation 양상을 조사하였던 바, 소의 경우와는 다르게 체내 및 체외수정란과 유사하게 배반포기 단계에서 demethylation이 일어나고 있음을 발견하였음.
- 체외 및 복제수정란에서 18S rRNA의 발현은 8 세포기부터 zygotic gene activation에 의해 개시되는 것으로 정량분석에 의해 확인할 수 있었음 또한 Oct-4 유전자의 발현이 체외 및 복제수정란에서 유사한 양상으로 나타남을 확인함.
- DNA 메틸화 관련 단백질인 DMAP1 단백질의 항체를 생산하였으며, 이를 이용하여 세포주와 조직에서 DMAP1의 발현을 확인하였음.
- 세포주기에 따라 DMAP1의 발현양이 차이가 있음을 확인하였음.
-생쥐 초기배 발생에 있어서 GV 및 초기 1 세포기 단계에서는 DMAP1이 세포질 쪽에 위치하고 후기 1 세포기부터 배반포 단계까지는 핵 내에 존재함을 확인함.
- 소 베타 카제인 유전자를 TPO 유전자로 대체하기 위하여 적중벡터를 제작하였으며, 이를 체세포에 도입한 후 선별을 통해 유전자 적중 체세포를 확보함.

목차 Contents

• 제 1 장 연구개발과제의 개요...14
• 제 1 절 연구개발의 목적...14
• 제 2 절 연구개발의 범위 및 필요성...14
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...17
• 제 1 절 국내의 기술개발 현황...17
• 제 2 절 국외의 기술개발 현황...18
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...20
• 제 1 절 이론적, 실험적 접근방법...20
• 제 2 절 연구내용 및 결과...22
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...38
• 제 1 절 체세포 복제수정란의 체외 생산 시스템 구축...38
• 제 2 절 포유동물 세포주 및 초기배 발생의 분자ㆍ세포생물학적 분석...38
• 제 3 절 고효율 발현벡터의 제작...40
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...42
• 제 1 절 기술적 효과...42
• 제 2 절 경제적 효과...42
• 제 6 장 참고문헌...44
• 특정연구개발사업 연구결과 활용계획서...47