초록 ▼

1. 연구 목적
본 연구자의 연구결과 항 혈전 효능이 우수한 것으로 밝혀진 녹차 카테킨 혼합물로부터 분리${\cdot}$정제한 8종의 단일 녹차카테킨 화합물에 대해서 항 혈소판 및 항 혈전 효능을 평가하고, 효능이 우수하여 선택된 카테킨 화합물에 대해서 항 혈전작용 기전을 규명하여 천연소재 혈전질환의 예방${\cdot}$치료 약물을 개발하는데 기초자료로 활용하고자 한다.
2. 연구 내용 및 방법
(1) 항 혈소판 및 혈전 효능 평가
① 혈소판 응집억제 효과 측정 (in v

1. 연구 목적
본 연구자의 연구결과 항 혈전 효능이 우수한 것으로 밝혀진 녹차 카테킨 혼합물로부터 분리${\cdot}$정제한 8종의 단일 녹차카테킨 화합물에 대해서 항 혈소판 및 항 혈전 효능을 평가하고, 효능이 우수하여 선택된 카테킨 화합물에 대해서 항 혈전작용 기전을 규명하여 천연소재 혈전질환의 예방${\cdot}$치료 약물을 개발하는데 기초자료로 활용하고자 한다.
2. 연구 내용 및 방법
(1) 항 혈소판 및 혈전 효능 평가
① 혈소판 응집억제 효과 측정 (in vitro, ex vivo)
② 혈소판 활성억제 효과 측정
③ 혈핵응고인자에 미치는 효과 측정
④ 항혈전능 시험 (in vivo)
(2) 항혈전 및 항혈소판 작용기전 규명
① Platelet arachidonic acid pathway에 미치는 영향
② Platelet signal pathway에 미치는 영향
③ Platelet granule secretion 측정
3. 연구 결과 및 고찰
녹차 카테킨 추출물은 혈소판 응집억제에 의해 항혈전 효능을 나타내는 것으로 보고 되었다. 그러나 녹차 카테킨의 단일 성분에 대한 항혈소판 활성 및 작용 기전에 대한 비교 연구는 아직 이루어지지 않았다. 따라서 이번 연구에서는 녹차 카테킨의 주요 성분인 EGCG와 EGC, 그리고 GCG와 GC의 토끼에서의 항혈소판 활성 및 작용기전을 연구하였다. EGCG는 collagen, arachidonic acid, U46619 그리고 thrombin에 의해 유도된 혈소판 응집을 억제하였고, $IC_{50}$는 각각 $79.8{\pm}3.2,\;98.9{\pm}5.6,\;64.3{\pm}6.5$ 그리고 $80.1{\pm}3.4 {\mu}M$으로 나타났다. GCG는 EGCG와 달리 collagen과 U46619에 의한 응집만 $IC_{50}\;63.0{\pm}3.8$과 $48.3{\pm}5.6 {\mu}M$으로 억제하였다. 반면 C-3에 gallate기 대신 OH기를 가진 EGC와 GC의 경우 collagen에 의한 응집만을 억제하였다. 또한 EGCG와 GCG는 collagen으로 인한 serotonin 분비 및 $thromboxane\; A_2$의 생성을 효과적으로 억제하였다. 따라서 C-3에 gallate기를 가진 카테킨 성분이 혈소판 응집억제 활성이 우수함을 알 수 있었다.

Abstract ▼

Green tea catechins (GTC) was reported to display the antithrombotic activity mediated through antiplatelet aggregation. In the present study, it was investigated the antiplatelet activity and mechanism of GTC component; epigallocatechin gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC), gallocatechin gallate

Green tea catechins (GTC) was reported to display the antithrombotic activity mediated through antiplatelet aggregation. In the present study, it was investigated the antiplatelet activity and mechanism of GTC component; epigallocatechin gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC), gallocatechin gallate (GCG) and gallocatechin (GC). EGCG inhibited the collagen-, arachidonic acid (AA)-, U46619- and thrombin-induced aggregation of rabbit platelets. GCG also inhibited the collagen- and U46619-induced platelet aggregation, whereas EGC and GC only showed a inhibition on collagen-induced aggregation. EGCG and GCG potently inhibited the granule secretion.
To investigate the antiplatelet mechanism of GTC component, it was tested the arachidonate liberation, prosatanoids conversion and enzyme activity. Pretreatment of rabbit platelets with EGCG and GCG, significantly inhibited the collagen-induced $TXB_2$ formation and AA liberation from membrane phospholipids. EGC and GC showed weaker inhibition than EGCG and GCG.GTC component did not affect the $TXB_2$ conversion as well as $PGD_2$ from AA, AA-induced $TXB_2$ formation and thromboxane synthase component significantly inhibited the $[Ca^{2+}]_{i}$ mobilization.
Taken together, these observations suggest that antiplatelet effects of GTC component may be mediated mainly by inhibition of arachidonic acid liberation through suppressing $[Ca^{2+}]_{i}$ mobilization and the antiplatelet activity may be enhanced by the presence of a gallate moiety at C-3 position.

목차 Contents

• Ⅱ. 총괄연구개발과제 연구결과...7
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표...7
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과...10
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...24
• 4. 사업화 목표 달성도 및 계획(개발과제만 해당)...24
• 5. 총괄연구개발과제의 연구성과...25
• 6. 연구개발결과의 파급효과...39
• 7. 첨부서류...39