초록 ▼

1. GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL-4, IL-6 유전자를 (주)팬젠 고유 발현벡터에 클로닝 하였음.
2. 유전자가 삽입된 발현벡터를 CHO 동물 세포주에 형질도입하여 단백질 고발현 세포주 개발을 완료하였음.
3. 세포주의 배양액으로부터 ion exchange, hydrophobic interaction 및 reverse phased chromatography 방법을 수행하여 단백질을 정제한 결과 순도 95% 이상, 엔도톡신 오염도 1 $EU/{\mu}g$ 이하의 단백질을 얻었음.
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1. GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL-4, IL-6 유전자를 (주)팬젠 고유 발현벡터에 클로닝 하였음.
2. 유전자가 삽입된 발현벡터를 CHO 동물 세포주에 형질도입하여 단백질 고발현 세포주 개발을 완료하였음.
3. 세포주의 배양액으로부터 ion exchange, hydrophobic interaction 및 reverse phased chromatography 방법을 수행하여 단백질을 정제한 결과 순도 95% 이상, 엔도톡신 오염도 1 $EU/{\mu}g$ 이하의 단백질을 얻었음.
3. 정제 단백질의 활성분석결과 판매중인 제품의 활성과 동등하거나 더 우수한 단백질을 생산하였음.
4. 활성이 분석된 정제 단백질은 멸균상태로 분주하여 시제품을 제작하였음.

Abstract ▼

I. Purpose and background of the project
$\bullet$ Large amount of growth and differentiation factors are being used for the basic biological research, however despite of active domestic research on stem cell, most of these factors are not produced domestically but imported.
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I. Purpose and background of the project
$\bullet$ Large amount of growth and differentiation factors are being used for the basic biological research, however despite of active domestic research on stem cell, most of these factors are not produced domestically but imported.
$\bullet$ Many of growth and differentiation factors in the market are produced from E. coli, and thus could have different nature in biological activity and stability from the native human proteins.
$\bullet$ The purpose of this project is to produce growth and differentiation factors using the mammalian expression system, and thus they may have similar activities to native human proteins and can be used on the various research including stem cell and development of cell therapy.
II. Contents and results of the project
$\bullet$ Cloning of the gene encoding GM-CSF, G-CSF, IL-B, IL-4, and IL-6 Into expression vector.
$\bullet$ Development of stablely transformed CHO cell lines expressing those proteins at high level.
$\bullet$ Protein purification from serum-free media using chromatography.
$\bullet$ Obtaining the pure proteins (more than 95% in purity)
$\bullet$ The purified proteins in this project have similar or higher activities compared to the proteins in the present market.
$\bullet$The purified proteins are prepared for sale.
III. Application plan of the project outcome
$\bullet$ Supply the developed growth and differentiation factors with about half price of the imported ones to domestic scientists, and thus can reduce the import and launch those factors in foreign market.
$\bullet$ Application of the platform technology obtained in this project to the development of similar biological product.
$\bullet$ Development of protein medicine using the cell lines expressing those factors.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 보고서 요약서...3
• 요약문...4
• SUMMARY...5
• 목차...13
• 그림 차례...14
• 제1장 연구개발과제의 개요...15
• 1. 연구 배경 및 필요성...15
• 2. 연구개발 목적...17
• 3. 연구 개발 범위...17
• 4. 연구개발 추진체계...19
• 5. 연구개발 추진계획...20
• 제2장 국내외 기술개발 현황...21
• 1. 국내.외 관련분야에 대한 기술개발현황...21
• 2. 연구결과가 국내.외 기술개발현황에서 차지하는 위치...22
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...23
• 1. 연구개발과제의 최종 연구개발 및 결과...23
• 2. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...64
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...65
• 1. 총괄연구개발과제의 목표달성도...65
• 2. 연구개발결과의 파급효과...65
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...67
• 1. 연구개발결과의 활용계획 및 추가연구의 필요성...67
• 2. 사업화(기업화) 목표 달성도 및 계획...67
• 제6장 참고문헌...74
• 제7장 자체평가의견서...77