초록 ▼

(1) SWI/SNF의 $\gamma-H2AX$ 발현 및 DNA 손상반응에 대한 역할 분석
$\bigcirc$ SWI/SNF가 $\gamma-H2AX$의 형성을 촉진함으로써 DNA 복구에 기여함을 증명
$\bigcirc$ SWI/SNF는 DNA 손상부위에 직접 결합하여 $\gamma-H2AX$의 형성을 촉진함
$\bigcirc$ 방사선조사 후 세포의 생존에 SWI/SNF가 필요함
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(1) SWI/SNF의 $\gamma-H2AX$ 발현 및 DNA 손상반응에 대한 역할 분석
$\bigcirc$ SWI/SNF가 $\gamma-H2AX$의 형성을 촉진함으로써 DNA 복구에 기여함을 증명
$\bigcirc$ SWI/SNF는 DNA 손상부위에 직접 결합하여 $\gamma-H2AX$의 형성을 촉진함
$\bigcirc$ 방사선조사 후 세포의 생존에 SWI/SNF가 필요함
$\bigcirc$ SWI/SNF는 S checkpoint에는 필요하지 않으나 G2/M checkpoint에는 미약하게 기여함
(2) $\gamma-H2AX$ 결합단백질 탐색 및 후보단백질의 기능분석
$\bigcirc$ Yeast two hybrid 스크리닝을 통하여 hINO80를 $\gamma-H2AX$ 결합 후보단백질로 발굴
$\bigcirc$ 면역침강법을 이용하여 hINO80가 $\gamma-H2AX$와 결합함을 알았음
$\bigcirc$ siRNA 기법을 이용하여 hINO80의 기능 분석을 위한 실험 수행
$\bigcirc$ hINO80의 발현이 억제되면 세포의 성장속도가 느려지며 그 주된 이유는 S phase의 비정상적 지연에 있음을 밝힘
$\bigcirc$ 방사선조사시 hINO80 발현이 억제된 세포는 생존력(viability)이 크게 감소하였음
$\bigcirc$ 현재 hINO80와 $\gamma-H2AX$와의 결합에 대한 자세한 분석과 hINO80의 DNA repair 기능에 초점을 맞추어 연구를 진행하고 있음

Abstract ▼

H2AX, a histone H2A variant X, is a recently identified haploinsufficiency tumor suppressor that plays a critical role for DNA double strand break (DSB) repair and the maintenance of genome integrity. H2AX is rapidly phosphorylated at 139-Ser on the C-terminal domain and the phoshporylated H2AX

H2AX, a histone H2A variant X, is a recently identified haploinsufficiency tumor suppressor that plays a critical role for DNA double strand break (DSB) repair and the maintenance of genome integrity. H2AX is rapidly phosphorylated at 139-Ser on the C-terminal domain and the phoshporylated H2AX $(\gamma-H2AX)$ serves as binding sites for DNA repair and checkpoint proteins. As a step towards understanding the molecular mechanisms underlying the tumor suppressor function of $\gamma-H2AX$, we investigated how the formation of $\gamma-H2AX$ is regulated and what cellular factors interact with $\gamma-H2AX$. We found that the SWI/SNF complex, tile founding member of the family of swi/snf-based ATP-dependent chromatin remodeling complexes, enhances DSB repair by promoting the formation of $\gamma-H2AX$ after exposure to ionizating radiation. The SWI/SNF complex stimulates the phosphorylation of H2AX by directly binding to the DSB-surrounding chromatin in the manner that is independent of ATM activation and recruitment to the DSB sites. In the meantime, through yeast two hybrid screening, we identified the human INO80 (hINO80), another member of the swi/snf family, as a candidate protein that interacts with $\gamma-H2AX$. We investigated the role of hINO80 in DNA repair When hINO80 was downregulated by siRNA, cell viability after exposure to ionizing radiation was remarkably decreased. Interestingly, however, hINO80 has no effect on the induction of $\gamma-H2AX$ after DNA damage, suggesting that different members of the swi/snf family adopt distinct mechanisms for facilitating DSB repair. The cells downregulated for hINO80 show a slow growth rate with the S phase cell cycle delayed to a great extent. We are continuing to investigate the role of hINO80 in DNA repair and cell cycle control.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 보고서 초록...3
• 요약문...4
• SUMMARY...5
• CONTENTS...6
• 목차...7
• 제 1 장 연구개발과제의 개요...8
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...11
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...12
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...39
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...42
• 제 5 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...43
• 제 7 장 참고문헌...44