초록 ▼

인간배아줄기세포 배양 및 유지의 최적화
먼저 배양액을 개발하여 자연분화율과 염색체 이상을 최소화하고 안정적으로 세포가 성장 할 수 있는 배양 환경 개발하였으며, 지지세포를 지속적으로 공급할 수 있도록 시스템화하였고 세포대체요법과 임상적용을 위한 기반으로 효과적인 대량 배양 시스템을 구축하였다. 또한 줄기세포의 냉동보존 및 장기 배양이 유전자 및 epigenetics에 미치는 영향 및 최소화조건 수립하였다.
효율적인 분석을 위한 Multi-Screening System
Multi-screening system의 도입을

인간배아줄기세포 배양 및 유지의 최적화
먼저 배양액을 개발하여 자연분화율과 염색체 이상을 최소화하고 안정적으로 세포가 성장 할 수 있는 배양 환경 개발하였으며, 지지세포를 지속적으로 공급할 수 있도록 시스템화하였고 세포대체요법과 임상적용을 위한 기반으로 효과적인 대량 배양 시스템을 구축하였다. 또한 줄기세포의 냉동보존 및 장기 배양이 유전자 및 epigenetics에 미치는 영향 및 최소화조건 수립하였다.
효율적인 분석을 위한 Multi-Screening System
Multi-screening system의 도입을 통하여 유전자 분석(Dr.J Loring공동 연구) 과 Protein 분석(One throughput array)을 효과적으로 실시하였다.
배양 환경 조절을 통한 특정 방향으로 분화되는 전구세포 유도
내배엽 특이적 분화 조건을 마련하고 2 계대 이상 내배엽 세포가 유지/증식되는 배양 환경을 수립하였으며 더 나아가 특정 유도물질이나 전달체를 이용하지 않고도 특정 세포를 지지세포로 이용하여 배양방법에 변화를 줌으로써 내배엽으로 분화가 유도되는 조건을 마련하였다.

Abstract ▼

Establishment of human embryonic stem cells (hESC) and recently development of iPS (induced pluripotent stem) cells have shed a light on the cell replacement therapy. In vitro culture of hES cells is desired further optimization. We have optimized culture medium and culture surface in co-culture sys

Establishment of human embryonic stem cells (hESC) and recently development of iPS (induced pluripotent stem) cells have shed a light on the cell replacement therapy. In vitro culture of hES cells is desired further optimization. We have optimized culture medium and culture surface in co-culture system. At the same time, feeder-free and xeno-free culture system in under development. Polymer membrane based co-culture system is useful to derive clinical grade hES cells in that it prevents from contamination of feeder cells. Newly developed culture medium is suited for both hESCs and MEFs and subsequently this medium supports better self-renewal and expansion of hESCs.
We characterized two Miz-hES lines (Miz-hES4 and Miz-hES6). Those two lines have typical features of plurupotent stem cells. We also analyzed the expression profile of immune related molecules in Miz hES lines. Storage is as important as culture. We combined vitrification and slow freezing method and modified freezing medium components by adding a factor regulating apoptosis signal). Thus we can improve the rates of survival/attachment/(undifferentiated) colony formation after thawing to the 50% survival rate. We are going to further analysis with multi screening method (Protein One Throughput array, illumina multi-screening system).

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 초록...3
• 요약문...4
• SUMMARY...8
• CONTENTS...9
• 목차...10
• 제1장 연구개발과제의 개요...11
• 1. 연구개발의 목적 및 필요성...11
• 2. 연구개발의 범위 및 목표...13
• 제2장 국내외 기술개발 현황...15
• 1. 국외기술현황...15
• 2. 국내기술현황...16
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...17
• 1. 배아줄기세포 배양의 최적화...17
• 2. 폴리머를 이용한 줄기세포 배양...31
• 3. 배아줄기세포의 특성연구...36
• 4. 배아줄기세포의 안전한 냉동보존 방법...40
• 5. 배아줄기세포 분석 시스템 확립...41
• 6. 촉진인자 혹은 사이토카인을 이용하지 않는 분화방향성 조절...42
• 7. 내배엽-특이적 분화조건 수립...45
• 8. 췌장소도 세포분화 및 소도 조직형성 조건 수립...47
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...49
• 1. 연구개발 목표의 달성도...49
• 2. 평가의 착안점에 다른 관련 분야의 기술발전에의 기여도...50
• 3. 연구 성과 및 기여도...51
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...53
• 1. 연구목표 및 내용...53
• 2. 추가연구의 필요성과 타 연구에의 응용...53
• 3. 연구수행결과 현황...54
• 4. 발표된 연구개발 성과...60
• 5. 기술이전 및 연구결과 활용계획...60
• 6. 기대효과...61
• 7. 문제점 및 건의사항...61
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...62
• 1. 배양 환경에 관한 연구...62
• 2. 배양액의 개발...62
• 3. matrix 개발...62
• 4. 계대배양 Tool 개발...63
• 5. 배아줄기세포 분화...63
• 6. iPS cell...65
• 제7장 참고문헌...67