초록 ▼

$\textbullet$ 새로운 항염증 물질 검색 시스템으로 사용될 수 있는 IkB-RAS interaction assay와 NRAT/SEAP assay를 확립하였다.
$\textbullet$ 이 검색법을 이용하여 양파로부터 두 가지 활성물질 분획, ACMVIIb-2A, ACMVIIb0-2B를 정제하였으며, 이 중 ACMVIIb-2A를 NFkB binding 된 HeLa cell에 처리하였을 때 TNF-a에 의한 NFkB-SEAP 활성을 저해하는 것을 관찰하였다.
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$\textbullet$ 새로운 항염증 물질 검색 시스템으로 사용될 수 있는 IkB-RAS interaction assay와 NRAT/SEAP assay를 확립하였다.
$\textbullet$ 이 검색법을 이용하여 양파로부터 두 가지 활성물질 분획, ACMVIIb-2A, ACMVIIb0-2B를 정제하였으며, 이 중 ACMVIIb-2A를 NFkB binding 된 HeLa cell에 처리하였을 때 TNF-a에 의한 NFkB-SEAP 활성을 저해하는 것을 관찰하였다.
$\textbullet$ 천연 식물로부터 전사인자 NFAT에 대하여 저해활성을 갖는 활성물질을 각각분리, 정제 하고 구조를 동정하였다.
$\textbullet$ 미생물 및 해양생물 추출액을 대상으로 항염증물질을 스크리닝한 결과 활성이 우수하고 배양이 용이한 새로운 활성물질 생산균주를 확보하여 활성물질을 분리 정제하여 최정적으로 활성물질 1종을 확보, 동물 세포활성 실험 결과, 분리한 활성물질은 RA기능조절제로서의 가치가 충분히 있으며 또한 RA와 유사하게 anti-angiogenic activity도 나타내었다.
$\textbullet$ 식물을 대량배양하여 acanthoic acid를 추출하였고, 그 유도체를 합성을 하여 약제를 양상 하는 방법을 확립하였다.
$\textbullet$ QSAR과 분자모델링 결과를 기반으로 90종의 acanthoic acid 유도체를 합성하였고, 이 중에서가 30$\muM$이하의 COX-2 선택적 저해 유도체 4종,10$\muM$ 이하에서 NF-kB저해 유도체 5종 가 10nM이하의 NO todtjd wjgo dbehcp 2종, 20$\muM$ 수준에서 TNF-a 및 IL-1$\beta$ 생성 저해 유돛에 4종, 가 10$\muM$이하에서 NFAT 저해활성 유도체 1종을 개발. 이중 in vitro 효능이 좋은 유도체 7종에 대하서 in vivo 실험을 실시하였고, 3종은 비교 약물인 KETOPROFEN과 비교시 대등하거나 우수한 항염효과를 확인하였다.
$\textbullet$ 천연물로부터 얻어지는 acanthoic acid의 원료확보를 위하여 전합성 연구가 이루어 졌고, 본 연구팀에서 개발한 radical 부가반응을 이용한 chiral 전이방법과 Diels-Alder환화반응을 이용하여 acanthoic acid의 5개 키랄센타와 전체 분자구조 형성방법을 확립하였다.

Abstract ▼

For the screening of anti-inflammatort agent, an yeast two hybrid assay strain bearing RXR-IkB$\beta$ transformant was developed. Among 3,500 microbial libraries screened, a fungal strain B000208 was selected as a candidate for RXR/IkB$\beta$ interaction stimulation. The active

For the screening of anti-inflammatort agent, an yeast two hybrid assay strain bearing RXR-IkB$\beta$ transformant was developed. Among 3,500 microbial libraries screened, a fungal strain B000208 was selected as a candidate for RXR/IkB$\beta$ interaction stimulation. The active compound in B000208 showed the same activity as 9-cis-retinoic acid in RXR reporter assay as well as in anti-angiogenesis assay. In summary, we established a new yeast cell based assay system for the screening of active compounds that regulate the interaction of RXR and its partner proteins.
Studies were carried out to elucidate the mode of actions of acanthoic acid and its derivatives. Efforts were also made t o design and synthesize biolgically improved analogs. Ninety analogs designed based on the QSAR and molecular modeling have been synthesized. Among them, five analogs showed selective COX-2 inhibition at less than 30$\muM$, four analogs showed NF-kB inhibition at less than 20$\muM$, five analogs completely inhibit NO production less than 40$\muM$ and five analogs inhibits production of TNF-a and/or IL-1$\beta$ at less than 10$\muM$ Particularly, three analogs selected based on in vitro activity have shown excellent analogs selected based on in vitro activity have shown excellent antiinflammatory activity at 5mg/kg, which is comparable to that of ketoprofen. Suh-30 showed in uitro anti-angiogenic activity at the submicromolar concentration.
Studies on the total synthesis of acanthoic acid were carried out. A new methodology, employing a combination of an intramolecular chiral transfer by an intramolecular radical addition and an intramoecular Diels-Alder cyclization, for constriction of the five stereogenic centers as well as the backbone of the target molecule has been developed.

목차 Contents

• 제1장 연구개발과제의 개요...15
• 제2장 국내외 기술개발 현황...17
• 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과...19
• 제1절 IkB-RXR 검색계를 이용한 항염증 물질의 분리...19
• 제2절 천연물로부터 전사인자 NRAT 억제제의 스크리닝...26
• 제3절 미생물 배양액 추출물 제조 및 스크리닝...66
• 제4절 섬오갈피나무로부터 acanthoic acid 대량정제...85
• 제5절 Acanthoic acid의 유도체 합성...86
• 제4장 목표 달성도 및 관련분야에의 기여도...116
• 제1절 연구개발 목표 달성도...116
• 제2절 특허출원...117
• 제3절 학술활동...118
• 제4절 관련분야에의 기여도...121
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...123
• 제1절 활용계획...123
• 제2절 기술적효과...123
• 제3절 경제적효과...124
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...125
• 제1절 개요...125
• 제2절 류마티스 관절염 치료제의 기전별 개발 현황...126
• 제7장 참고문헌...129