초록 ▼

1. Thl vs ThZ 세포분화의 신호전달경로에서 cytokine signal 과 TCR signal 의 cross- talk 현상을 조사하고 분석한다．
2. Thl vs Th2 면역반응을 조절하는 신규 인자를 탐색,동정하고 그 기능을 조사한다．
1. TCR 신호전달경로 (Ras/ MAPK） 와 cytokine 신호전달 경로 (Jak/ sTAT) 활성의 변화가 Thl/ Th2 분화에 미치는 영항 및 그 기전 규명
da Ras 및 dn Ras transfection 그리고 siRNA 기법을 활용하여， T cen에서

1. Thl vs ThZ 세포분화의 신호전달경로에서 cytokine signal 과 TCR signal 의 cross- talk 현상을 조사하고 분석한다．
2. Thl vs Th2 면역반응을 조절하는 신규 인자를 탐색,동정하고 그 기능을 조사한다．
1. TCR 신호전달경로 (Ras/ MAPK） 와 cytokine 신호전달 경로 (Jak/ sTAT) 활성의 변화가 Thl/ Th2 분화에 미치는 영항 및 그 기전 규명
da Ras 및 dn Ras transfection 그리고 siRNA 기법을 활용하여， T cen에서 Ras는 Erk를 경유하여 Jakl/ STAT6의 활성유도로 IL-4 promoter의 활성을 증가시켜 Th2 분화에 기여함을 밝혔다． 한편 Ras의 Thl 분화억제 효과가 PI3K에 의해 유도됨과 Thl 분화유도 기능을 발휘하는 IFN-a의 Jak2/ STAT4 경로가 Ras에 의해 저해됨을 관찰하였다． 이러한 in vitro data를 Ras-transgenic (Ras-Tg) in vivo model을 사용 하여 비교 $\cdot$ 분석한 결과 Ras-Tg mice에서 IL- 4 의 신호전달게가 활성화되어 있음을 확인하였다．
2.Thl vs Th2 반응／ 분화 경로 특이적으로 발현 및 조절되는 유전자의 검색 및 기능 연구 Thl-specific target으로서 Thioredoxin (Trx가 그리고 Th2- specific target으로서 adenine nucleotide translocator 3 (ANT3)가 선별되었고 이들을 ThO 세포에 과발현 시켜 기능을 조사한 결과， Trx는 IFN-v생산유도를 그리고 ANT3는 IL- 4 생산증가 를 유도함을 관찰함으로써 각각 Thl 그리고 Th2 분화유도기능을 발휘함을 확인하였 다.또한, 이러한 Trx와 ANT3의 Thl/ Th2 분화 효과는 이들 단백질의 Thl/ Th2 세 포 생존 유도기작도 관련이 있음을 알 수 있었다．
1. TCR downstream 의 Ras/Erk 경로의 활성이 IL-4/Jakl/STAT6 경로와 positive cross- talk 을 함을 발견하였다．(J.Immunol,JBC 등에 논문발표）
2. 신규 T 세포 생존 및 분화 그리고 사멸조절 인자들을 발견하였고 이들을 이용한 Thl/ Th2 면역반응 조절의 가능성이 제시되었다．(Ceh Immunol, PNAS 등에 논문발표）

Abstract ▼

The purpose of the study is (1) to estabhsh the signal transduction network duhng Th differentiation into Thl or Th2 cehs, through the analysis of interaction and signal cross- talk between TCR- mediated and cytokine- mediated signaling pathways, and (2) to search novel target genes specific for Thl

The purpose of the study is (1) to estabhsh the signal transduction network duhng Th differentiation into Thl or Th2 cehs, through the analysis of interaction and signal cross- talk between TCR- mediated and cytokine- mediated signaling pathways, and (2) to search novel target genes specific for Thl vs Th2 response and investigation of their immunomodulatory functions in Thl vs Th2 differentiation.
1. Signal cross- talk between TCR signaling (Ras/ MAPK) pathway and cytokine signaling (Jak/STAT) pathway during Thl vs Th2 differentiation : Using da/ dn Ras overexpression and siRNA knock-out, we have found that Ras2Erk activity promotes Jakl/ STAT6 signaling feading tO IL-4 promoter activation, increased IL- 4 production, and Th2 differentiation. We have also observed that Ras suppresses IFN-v production and Thl differentiation induced by TCR or IFN- 0 via activation of PI3K or inhibition of Jak2/ STAT4 pathway, respectively. These in vitro findings were partiahy supported by in vivo data obtained by using transgenic models.
2.Identification of novel target genes couhter- regulated by Thl vs Th2 cytokines and their function in Thl vs Th2 differentiation : Employing DD- PCR, we have identified thioredoxin as a Thl- specific target, and ANT3 as a Th2- specific target. Using oVereXpression and siRNA knock- out Elpproach, we have found that Trx induces IFN- Y production and ANT3 induces IL-4 production, leading to Thl and Th2 differentiation, respectively. The Thl/Th2 differentiation- inducing actions of Trx and ANT3 seem to be associated with their regulatory functions on Th ceh survival.
1. The finding On the positive cross- talk between TCR/ Ras/ Erk and IL- VJakl/ STAT6 pathway win promote our understanding On the regulation and signahng network for Thl vs Th2 differentiation. 2. Novel Thl vs Th2 regulatory factors whl be utih2ed to develop immunomodulatory drugs for immune deviation of diverse diseases involving Thl/ Th2 deregulation.

목차 Contents

• Ⅰ. 연구계획 요약문...3
• 1. 국문요약문 ...3
• Ⅱ. 연구결과 요약문...4
• 1. 국문요약문 ...4
• 2. 영문요약문 ...5
• Ⅲ. 연구내용...6
• 1. 서론 ...6
• 2. 연구방법 및 이론 ...8
• 3. 결과 및 고찰 ...11
• I. Thl 및 Th2 세포분화의 신호전달체계 연구 : Thl vs Th2 cell의 분화과정에서 TCR 신호전달 경로와 cytokine 신호전달 경로간의 연계성 및 cross-talk 분석．...11
• (1) TCR 신호전달계 Ras/ MAPK 분자들이 Jak/STAT 경로에 미치는 영향...11
• (2) Thl/ Th2 세포분화경로에서 TCR과 결합하는 adaptor(Vav의 역할과 MAPK 분자들과의 상관관계...29
• (3) Ras/ MAPK (Erk)의 target으로서 Th2세포의 survival과 differentiation을 매개 하는 전사 조절인자와 활성조절 기작 연구...36
• (4) Cytokine 신호전달계 STAT 분자들이 Ras/ MAPK 경로에 미치는 영향...47
• Ⅱ. Thl 또는 Th2 분화반응 유도시 선택적으로 발현되는 target gene 의 검색과 이들의 Th 세포 분화조절기능 연구．...49
• (1) Thl vs Th2 cytokine에 의한 분화반응 유도시 특이적으로 발현되는 신규 유 전자의 검색과 동정...49
• (2) Trx와 ANT3의 발현을 통한 면역세포 생존,사멸 관련 기능연구...49
• (3) Trx 와 ANT3의 Thl 및 Th2 분화유도기능 연구...55
• (4) Th1 vs Th2 분화조절인자로서 T cen AICD 및 apaptosis에 관여하는 인자의 탐색...55
• 4. 결론...71
• 5. 인용문헌...75