초록 ▼

1) 종양특이적 방사면역치료제 개발 1. I-131 표지 대장암 특이 인간화항체 치료제 개발 가. 대장암 환자의 조직절편에서 항체 유용성 평가 나. 종양이식모델에서 I-131표지 대장암 특이 인간화 항체 치료효과 평가 다. 대장암 특이 인간화 항체의 대량생산 2 2. 신개발 항체의 Re-188 방사면역치료제 개발 가. 종양이식모델에서 Re-188 표지 대장암 특이 인간화 항체 치료효과 평가 3. 동물모델에서 개발된 치료제의 유용성 평가 및 임상 치료 적용모델 개발 가. 전임상 연구를 통한 임상적용 가능성 평가 나. 치료 모델로서 임

1) 종양특이적 방사면역치료제 개발 1. I-131 표지 대장암 특이 인간화항체 치료제 개발 가. 대장암 환자의 조직절편에서 항체 유용성 평가 나. 종양이식모델에서 I-131표지 대장암 특이 인간화 항체 치료효과 평가 다. 대장암 특이 인간화 항체의 대량생산 2 2. 신개발 항체의 Re-188 방사면역치료제 개발 가. 종양이식모델에서 Re-188 표지 대장암 특이 인간화 항체 치료효과 평가 3. 동물모델에서 개발된 치료제의 유용성 평가 및 임상 치료 적용모델 개발 가. 전임상 연구를 통한 임상적용 가능성 평가 나. 치료 모델로서 임상환자에 적용가능한 모델 개발 및 임상적용 시스템 구축 2) 방사선 치료효과 증진 세포조절물질 개발 1. Phytosphingosine 유도체의 방사선 치료증진 효능; 가. 인체 암종 이식 동물 실험을 통한 방사선치료 증진제로서의 적용성 검증 및 종양 조직별 방사선치료효과 검증 나. 방사선 치료 증진 작용에 대한 target 규명 및 작용기전 해석. 다. PS, C6PS와 C8PS의 임상적용을 위한 안전성 확인 및 최적 투여용량 결 정. 라. Nano particle 도포 C8PS의 방사선 치료효율 검증 마. 상용 항암제와의 병용처리 효과 검증. 2. Cox-2 억제제의 방사선 민감도 증진 효능; 가. 폐암 세포 중에서 방사선에 대한 민감도가 다른 세포주를 선택하여 민감 정도를 확 인하고 대표적인 COX-2억제제를 이용 폐암세포에서 방사선 복합 처리 후 세포 사 멸 효과를 검증 나. 세포 사멸과 관련된 단백질들의 변화를 western blotting을 통해 확인 다. 동물 실험을 통한 COX-2억제제의 방사선 치료효능 증진 효능 검증 3) 방사선 치료효과 증진 생체반응조절물질 개발 가. 방사선에 의한 세포사멸은 방사선에 의해 유도되는 세포 내 ceramide의 축적에 의해 일어나며, ceramide 축적에 이상이 생긴 세포의 경우 방사선에 저항성을 갖게 되므로, ceramide를 이용하여 방사선에 대한 종양세포의 민감성을 증가시키고자 하였다. 이를 위하여 신규 ceramide derivatives를 탐색하여 종양의 방사선 민감도를 증가시키는 물질을 확보하여 in vivo 및 in vitro에서 효능을 확인하였다. 나. 종양의 미세환경은 방사선에 의한 종양의 민감도 및 방사선 치료 이후 종양 성장 여부를 좌우하는 중요한 요소이다. 종양 미세환경을 조절하기 위하여 종양 내혈관생성을 억제할 수 있는 천연물 추출물을 이용하여 종양 내 혈관생성 억제와 이에 의한 방사선 민감 증진 효능을 확인하였다. 4) 방사선 치료효과 증진 유전자치료제 및 유전자 특이적 방사핵종 전달자 개발 가. 본 연구에서는 Myc/Ras로 형질 전환된 MEF 세포를 대상으로 하여 telomerase 의 활성 억제 시 방사선 민감도가 증대될 수 있는지를 in vivo와 in vitro system 하에서 조사하였다. 또한 이때 p53 유전자가 telomerase 활성 억제 시 나타나는 방사선 민감도 증대 효과에 미치는 영향을 조사하였다. 방사선 치료 효과 증대의 주된 메카니즘을 규명하기 위하여 방사선 조사 뒤 세포의 다핵화 비율을 측정하 여 mitotic cell death의 발생을 조사하였다. 나. 표적 유전자의 정확한 도입 시스템 확립을 위해 여러 가지 크기의 재조합 HSV 수 용체인 ${HveC}_{123}$, ${HveC}_{215}$, ${HveC}_{317}$, HveB141 그리고 Mutant ${HveC}_{123}$ (Q76-77AA;M85F)을 용해성 재조합 단백질로 제조 및 정제하였다. 여러 농도의 재조합 수용체들과 KHZ.1(wild-type gD)과 Rid1(mutant gD) 바이러스를 섞은 후CHO-K 에 감염시켜 유전자 전달 효과를 측정하였다.

Abstract ▼

1) Development of tumor-specific radioimmunotherapeutic agents 1. Development of I-131 labeled colon cancer-specific humanized antibody A. Evaluation of usefulness of humanized 3E8 antibody in colon cancer patient's specimens B. Evaluation of radioimmunotherapeutic efficacy of I-131 labeled humanize

1) Development of tumor-specific radioimmunotherapeutic agents 1. Development of I-131 labeled colon cancer-specific humanized antibody A. Evaluation of usefulness of humanized 3E8 antibody in colon cancer patient's specimens B. Evaluation of radioimmunotherapeutic efficacy of I-131 labeled humanized 3E8 antibody in tumor bearing nude mice C. Mass production of colon cancer-specific humanized antibody (3E8) VII - 8 - 2. Development of Re-188 labeled colon cancer-specific humanized antibody A. Evaluation of radioimmunotherapeutic efficacy of Re-188 labeled humanized 3E8 antibody in tumor bearing nude mice 3. Evaluation of usefulness of radiolabeled humanized 3E8 antibody in animal tumor model and development of clinical application protocol A. Evaluation of feasibility for clinical application by preclinical animal study B. Development of clinical application protocol 2) Development of New cell activators enhancing efficacy of radiation therapy 1. Phytosphingosine derivatives as radiosensitizers; A. Determination of radiosensitization effects of C8PS in nude mice xenograft system with several human cancer cells. B. Mechanism of radiosensitizing effect of C8PS and target screening C. Safety study for PS derivatives (PS, C6PS, C8PS) D. Establishment of tumor specific delivery system for C8PS using nano particle E. Combination treatment effect of C8PS and common anti-cancer drugs. 2. Cox-2 inhibitor as a radiosensitizer A. Radiosensitization effect of Cox-2 inhibitor was evaluated using clonogenic assay and apoptosis detecting methods in A549 and H460 NSCLC cells. B. Increased apoptosis induced by Cox-2 inhibitor in combination with radiation was mediated by caspase activation C. In vivo lung cancer model, nimesulide treatment showed effective radiosensitizing effect on tumor growth delay. 3) Development of New biological response modifier Enhancing Efficacy of Radiation Therapy A. Radiation induced apoptosis is mediated by intracellular accumulation of ceramide. And the disruption of ceramide accumulation pathway causes the resistance of tumor cells against radiation. We hypothesized that exdogenouse treatment of ceramide derivaties or blockage of ceramide - VIII - - 9 metabolism may enhance tumor sensitivity against radiation. For this purpose, new ceramide derivatives were screened to select derivatives possessing radiosensitizing effect, and tested for it's effectiveness in vivo and in vitro. B. Microenvironment of tumor is one of the important factors determining tumor radiosensitivity and tumor regrowth after radiation treatment. To increase tumor radiosensitivity, several substances having with potential of anti-angiogenic effect were tested and confirmed its effectiveness for improvement of radio-sensitivity related with tumor angiogenesis suppression. 4) Development of new gene-therapeutic materials enhancing efficacy of radiation therapy A. In the present study, employing Myc/Ras transformed MEFs derived from both mTERC-/- INK4a-/- and mTERC-/- p53-/- mice, we measured the radio-therapeutic efficacy of telomerase inhibition in vitro and in vivo system and investigated the functional relation of p53 and telomere dysfunction in modulating radiation response, by comparing their radiosensitivity profiles with the genomic instabilities via structural changes of telomere repeat. In order to evaluate whether the reduced survival rate of telomere dysfunctional cells after exposure to radiation might have been due to mitotic cell death, we examined the formation of multinuclei B. For the development of targeted delivery system, we constructed soluble truncated forms of HveC (${HveC}_{123}$, ${HveC}_{215}$, ${HveC}_{317}$), HveB (HveB141) and mutant ${HveC}_{123}$(QN76-77AA;M85F). Purified soluble proteins were mixed with KHZ.1 and Rid1 virus in a dose-dependent manner, then measured the entry effect into CHO-K cells.

목차 Contents

• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ...20
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ...21
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ...22
• 1 절. 종양특이적 방사면역치료제 개발 ...22
• 2 절. 방사선치료효과 증진 세포조절물질 개발 ...28
• 1. Phytosphingosine 유도체를 이용한 방사선 치료효과 증진제 개발 ...28
• 2. COX-2억제제의 방사선치료효능 검증 ...36
• 3 절. COX-2 선택적 억제제의 방사선 감수성 증진 작용의 기전 해석 ...37
• 4 절. 방사선치료효과 증진 생체반응 조절 물질 개발 ...40
• 5 절. 방사선 치료효과 증진 유전자치료제 및 유전자 특이적 방사핵종 전달자 개발 ...44
• 6 절. 암의 방사선치료 효과를 증진시키는 유전자치료제 및 유전자 특이적 Auger 전자방사성동위원소 전달제 개발 ...55
• 제 4 장 연구개발 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ...159
• 1 절. 최종 목표...159
• 2 절. 당해 단계목표 및 달성도...159
• 제 5 장 연구개발결과 활용계획 ...166
• 1 절 경제적 측면...166
• 2 절 사회적 측면...166
• 3 절 기술적 측면...166
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외 과학기술정보 ...168