초록 ▼

$\circ$ 연구내용
(1) 종양표적 박테리아와 광학리포터를 이용한 분자 치료 모니터링 영상 기술 개발
- 광학 영상유전자 발현 시스템 구축
- 종양모델에서 종양 표적 박테리아의 광학 영상적 모니터링
- 살모넬라의 용해효과 및 종양 표적 평가
- 종양모델에서 항암 독소 발현 살모넬라 약독화 균주의 제작 및 종양표적/용해효과 평가
- 항암 유전자 발현 대장균의 제작 및 종양표적 및 종양치료 효과 평가
- 원격조절에 의한 살모넬라의 종양 내 치료유전자 선택적 발현
- 박테

$\circ$ 연구내용
(1) 종양표적 박테리아와 광학리포터를 이용한 분자 치료 모니터링 영상 기술 개발
- 광학 영상유전자 발현 시스템 구축
- 종양모델에서 종양 표적 박테리아의 광학 영상적 모니터링
- 살모넬라의 용해효과 및 종양 표적 평가
- 종양모델에서 항암 독소 발현 살모넬라 약독화 균주의 제작 및 종양표적/용해효과 평가
- 항암 유전자 발현 대장균의 제작 및 종양표적 및 종양치료 효과 평가
- 원격조절에 의한 살모넬라의 종양 내 치료유전자 선택적 발현
- 박테리아의 종양표적 관련 요인
(2) 종양표적 박테리아를 이용한 암 치료에 관한 기작 연구
- 암증식, 전이, 혈관형성 마우스 실험 모델 확립
- p53 유전자 클로닝
- 암증식 및 전이에 있어서 p53의 역할 (p53에 의한 VEGF 발현 조절 기작, p53과Egr-l과의 결합, PAF에 의한 VEGF 발현 조절에 있어서 NF-KB와 AP-l의 역할)
- p53에 의한 폐로의 암전이 억제에 관한 연구
(3) 약독화 세균을 이용한 유전자 전송기술 개발
- S. typhi 유래의 독소 ClyA를 이용한 세균외 단백질 전송 벡터의 제작
- S. typhi 유래의 독소 ClyA를 이용한 항암유전자 LIGHT의 세균외 전송 벡터의 제작
- 세균 독소 ClyA를 이용한 항암 효능의 검증
- 새로운 phage 유전자를 이용한 유전자 전달 벡터의 제작
- Salmonella typhimurium 균주에서 asd 및 wzy 변이 균주의 제작 및 면역성 검증
(4) 세포 내 단백질 치료법의 응용
- Novel MTD 개발
- 선택된 Novel MTD의 세포투과성 확인(Quantitative Flow Cytometrv, Confocal laser Scanning Microscopy, In vivo Tissue Distribution)
- CP-Adaptors 발현벡터 디자인
- CP-Adaptors 발현벡터 제작, 발현 및 정제
- CP-Adaptors의 세포투과성 결정
- CP-Adaptors 에 의한 THP-l 세포의 cytokine 분비 유도

Abstract ▼

$\circ$ Research contents
(1) Development of molecular therapy monitoring technology using tumor-targeting bacteria and optical reporter gene
- Development of optical imaging gene expression system
- In vivo optical monitoring of tumor-targeting bacteria
- Evaluating targeting

$\circ$ Research contents
(1) Development of molecular therapy monitoring technology using tumor-targeting bacteria and optical reporter gene
- Development of optical imaging gene expression system
- In vivo optical monitoring of tumor-targeting bacteria
- Evaluating targeting capacity and toxicity of wild-type Salmonella
- Evaluating targeting capacity and tumor-suppressive effects of anttenuated Salmonella with anti-cancer genes.
- Evaluating targeting capacity and tumor-suppressive effects of non-toxic bacteria (E. coli) with anti-cancer genes.
- Remote control of therapeutic gene expression in tumor-targeting Salmonella
- Clarifying the tumor-targeting factors of bacteria.
(2) Mechanism research for cancer therapy using tumor-targeting bacteria
Establishment of mouse experimental model for cancer proliferation, metastasis and formation of blood vessels
- Cloning of p53 gene
- Role of p53 in cancer proliferation and metastasis (VEGF expression mechanism by p53, incorporation p53 and Egr-l and roles of NF-${\kappa}$B and AP-l in VEGF expression by PAF)
- Research on the suppression of lung metastasis by p53
(3) Development of gene transfer technology using attenuated Salmonella
- Establishing ClyA gene-containing plasmid in order to producing and secreting ClyA toxin from bacteria.
- Establishing LIGHT-conjugated ClyA toxin gene for dual expressions of therapeutic genes
- Verification of anti-cancer effect using ClyA toxin.
- The production of gene-transferring vector using novel phage gene
- Verification of immunity in asd or/and wzy mutated S. typhi
(4) Application of intracellular protein therapy
- Development of novel MTD
- Confirmation of cell permeability of selected novel MTD by quantitative flow cytometry, confocal laser scanning microscopy and in vivo tissue distribution
- Structure & design of CP-Adaptors
- Construction of inducible CP-Adaptors expression vector and inducible expression and purification
- Confirmation of cell permeability of CP-Adaptors
- Ex vivo activation of THP-l cells by CP-Adaptors

목차 Contents

• 제출문...1
• 목차...2
• I. 연구개발결과 요약문...4
• 한글 요약문...4
• 영문 요약문...6
• II. 총괄연구개발과제 연구결과...8
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표...8
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과...11
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...33
• 4. 총괄연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도...36
• 5. 총괄연구개발과제의 활용계획...61
• 6. 첨부서류...63
• III-1. 제1세부연구개발과제 연구결과 : 종양표적 박테리아와 광학리포터를 이용한 유전자 치료 영상 기술 개발...70
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...71
• 2. 제1세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...72
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과...73
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...85
• 5. 제1세부연구개발과제의 활용계획...88
• 7. 참고문헌...89
• III-2. 제2세부연구개발과제 연구결과 : 종양표적 박테리아를 이용한 암 치료에 관한 기작 연구...90
• 1. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...91
• 2. 제2세부연구개발과제의 인구대상 및 방법...94
• 3. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발결과...95
• 4. 제2세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...101
• 5. 제2세부연구개발과제의 활용계획...102
• 7. 참고문헌...103
• III-3. 제3세부연구개발과제 연구결과 : 약독화 박테리아를 이용한 유전자전송기술 개발...106
• 1. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...107
• 2. 제3세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...107
• 3. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발결과...107
• 4. 제3세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...117
• 5. 제3세부연구개발과제의 활용계획...117
• 7. 참고문헌...118
• III-4. 제4세부연구개발과제 연구결과 : 세포 내 단백질 치료법의 응용;MyD88의 암조직 침투, 분비 및 세포내 전송을 통한 immunostimulatory therapy ...119
• 1. 제4세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...122
• 2. 제4세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...123
• 3. 제4세부연구개발과제의 최종 연구개발결과...127
• 4. 제4세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...141
• 5. 제4세부연구개발과제의 활용계획...143
• 7. 참고문헌...145