보고서 정보
주관연구기관 |
국립수의과학검역원 National Veterinary Research and Quarantine Service |
연구책임자 |
조윤상
|
참여연구자 |
이상은
,
조동희
,
황인영
,
허은정
,
남향미
,
임춘태
,
진영화
,
김종만
,
정석찬
,
이성식
,
정태성
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2008-03 |
과제시작연도 |
2007 |
주관부처 |
농림부 |
사업 관리 기관 |
농림기술관리센터 Agricultural Research & Development Promotion Center |
등록번호 |
TRKO201000006906 |
과제고유번호 |
1385006581 |
사업명 |
수의과학기술개발연구 |
DB 구축일자 |
2015-01-08
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키워드 |
소결핵.분자역학.단백질체분석.특이항원.ELISA.인터페론.VNTR.Proteomics analysis.Mycobacterium bovis.
|
초록
▼
?제1세부과제명: 국내분리 소결핵균의 분자생물학적 특성 분석
- 피내 양성소(n = 45), 도축장 결절소(n = 37)중 결핵균과 마이코박테리움 균주 (결핵균/비결핵균)가 분리된 개체는 각각 20%/38%, 84%/35%이었음
- 결절 사슴 (n = 3)으로부터 분리한 결핵균과 마이코박테리움 균주 (결핵균/비결핵균)가 분리된 개체는 67%/33% 이었음
- 피내 양성소(n = 45), 피내 의양성소(n = 4), 도축장 결절소(n = 37), 결절 사슴 (n = 3)에 직접 IS6110과 IS1081 PCR을
?제1세부과제명: 국내분리 소결핵균의 분자생물학적 특성 분석
- 피내 양성소(n = 45), 도축장 결절소(n = 37)중 결핵균과 마이코박테리움 균주 (결핵균/비결핵균)가 분리된 개체는 각각 20%/38%, 84%/35%이었음
- 결절 사슴 (n = 3)으로부터 분리한 결핵균과 마이코박테리움 균주 (결핵균/비결핵균)가 분리된 개체는 67%/33% 이었음
- 피내 양성소(n = 45), 피내 의양성소(n = 4), 도축장 결절소(n = 37), 결절 사슴 (n = 3)에 직접 IS6110과 IS1081 PCR을 적용한 결과, 양성율은 각각 89%, 100%, 86%, 100%이었음
- 국내분리 결핵균주 (n = 28)의 VNTR (variable number of tandem repeat) 타이핑은 6개의 ETR (exact tandem repeat)과 5개의 MPTR (multiple tandem repeat)을 사용하였으며, ETR에 의한 분별력은 0.81, MPTR에 의한 분별력은 0.45이었으며, ETR과 MPTR에 의한 분별력은 0.82이었음
- 국내분리 결핵균주의 ETR과 MPTR에 의한 VNTR 타이핑 결과, 15가지 형으로 분류되었으며, 이중 한우 분리균주 (n = 5)는 4가지 형이었고 양우 (n = 19)는 12가지 형이었으며, 사슴 (n = 4)은 1가지 형이었음
- 한우, 양우, 사슴 분리균주중 VNTR 3형이 가장 많았음
?제1세부과제명: 국내분리 소결핵균의 분자생물학적 특성 분석
- 표준균주의 배양상층액 (SUP)의 주요 단백질은 Ag85, MPB64, GroES, MPB70, EsxN, Thioredoxin, CFP10 등이었으며, 용해성단백질 (SOL)의 주요 단백질은 GroES, Ag85, DnaK, ABC transporter ATP binding protein 등이었음
- 표준균주, 소 분리균주, 사슴분리균주를 7H9 broth와 Sauton broth로 배양후 SUP를 추출하여 2차원 전기영동패턴을 비교한 결과, 7H9 broth 배양후에는 소에서 유래한 표준균주와 분리균주의 단백질들은 뚜렷한 차이를 보이지 않은 반면, 사슴 분리균주의 단백질들과는 뚜렷한 차이를 보였으며, Sauton broth 배양후에는 표준균주와 분리균주와 뚜렷한 차이를 보여 배지와 유래된 축종에 따라 균주간 발현되는 단백질의 차이를 보였음
Abstract
▼
Bovine tuberculosis in Korea has been diagnosed by tuberculin test since 1926. Even though the test and slaughter policy has been applied, bovine tuberculosis (bTB) has occurred sporadically until now. bTB is caused by Mycobacterium bovis, which can be infected to the warm-blood animals. Mycobacteri
Bovine tuberculosis in Korea has been diagnosed by tuberculin test since 1926. Even though the test and slaughter policy has been applied, bovine tuberculosis (bTB) has occurred sporadically until now. bTB is caused by Mycobacterium bovis, which can be infected to the warm-blood animals. Mycobacterium bovis should be characterized at molecular level to develop diagnosis and prevention of bTB through the state-of-the-art techniques. We applied variable number of tandem repeat typing (VNTR) for genetic analysis and two dimensional gel electrophoresis for proteomic analysis to Korean isolates. Korean isolates from Hanwoo (Korean native cattle), dairy cattle, and deer showed 15 VNTR type, and type 3 was predominant. We used ETR-A to F and MPTR-A to E as VNTR primers. Discrimination power using ETR and MPTR was elevated to 0.82, while that using only MPTR was 0.45. We analysed Mycobacterium bovis to define its proteome and comparison of standard strain and Korean isolate. After Sauton broth culture, the proteome of Korean isolate was different from that of standard strain on two dimensional gel electrophoresis. Interestingly, after 7H9 broth culture, the proteome of bovine isolate was different from that of deer isolate. Through proteomic analysis of M. bovis, major proteins of M. bovis were identified and the proteome of standard strain and isolates were different. This information would be helpful for the development of diagnosis and prevention to control bTB.
목차 Contents
- 초록 ...1
- Ⅰ. 연구배경 및 목표 ...3
- 1. 연구배경 ...3
- 2. 연구최종목표 ...3
- 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ...4
- Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ...4
- 1. 재료 ...4
- 2. 연구전략 및 방법 ...4
- Ⅲ. 연구결과 ...5
- 가. 제1세부과제명 : 국내분리 소결핵균의 분자생물학적 특성 분석 ...5
- 나. 제2세부과제며 : 우결핵 보조진단법 개발 ...9
- Ⅳ. 연구결과요약 ...12
- Ⅴ. 고찰 ...12
- Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ...15
- Ⅶ. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ...16
- Ⅷ. 주요연구과제 변경사항 ...16
- Ⅸ. 참고문헌 ...16
- Ⅹ. 영문초록 ...19
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