초록 ▼

본 연구는 감염성질환 백신의 효능증강을 위한 면역보조제를 개발하고 개발된 면역보조제의 세포성 면역활성을 분석함으로써 향후 효과적인 감염성질환의 예방 및 치료백신의 개발에 활용할 수 있도록 하는 데에 그 목적이 있다. 본 과제에서는 내재성 면역활성과 후천성 면역반응 증강활성이 우수한 CIA07을 사람에게 적용되는 백신을 위한 면역보조제로 개발하기 위하여 HBsAg를 항원으로 하여 세포성면역 증강효능을 평가하였다. Balb/c 마우스와 C57BL/6 마우스를 백신 항원과 면역보조제 alum, CpG1826 또는 CIA07과 혼합하여 1

본 연구는 감염성질환 백신의 효능증강을 위한 면역보조제를 개발하고 개발된 면역보조제의 세포성 면역활성을 분석함으로써 향후 효과적인 감염성질환의 예방 및 치료백신의 개발에 활용할 수 있도록 하는 데에 그 목적이 있다. 본 과제에서는 내재성 면역활성과 후천성 면역반응 증강활성이 우수한 CIA07을 사람에게 적용되는 백신을 위한 면역보조제로 개발하기 위하여 HBsAg를 항원으로 하여 세포성면역 증강효능을 평가하였다. Balb/c 마우스와 C57BL/6 마우스를 백신 항원과 면역보조제 alum, CpG1826 또는 CIA07과 혼합하여 1주 간격 3회 접종하였다. 또한 CIA07의 구성 성분인 DNA fragment, modified LPS도 면역 증강작용을 비교분석하였다. 마우스를 면역화한 후 1주 후 비장세포에서 HBsAg 특이적으로 INF-$\Upsilon$를 분비하는 세포를 측정하였을 때 CIA07을 면역보조제로 투여한 군에서 INF-$\Upsilon$ 분비가 가장 높았다. 또한 CIA07은 마우스 PBMC에서 HBsAg 특이적 $CD8^+$ T 세포의 수를 증가시켰으며, CTL 활성도 증가시켰다. 이와 같은 결과는 CIA07이 항체면역반응 뿐만 아니라 세포성 면역반응을 증가시킨다는 것을 의미한다. CIA07이 HBsAg 이외의 다른 백신항원을 사용할 때에도 면역보조활성이 있는가는 확인하기 위하여 influenza virus HA subunit vaccine과 탄저 PA 항원에 대한 면역증강 활성을 평가하였다. CIA07은 influenza virus subunit 항원에 대한 항체를 증가시켰으며, $INF-$\Upsilon$^+$ $CD8^+$ T 세포의 수도 크게 증가시켰다. 한편 CIA07은 탄저 PA에 대한 항체생성을 증가시켰으나 그 활성은 alum과 CpG1826에 비하여 낮았고 독소중화활성은 alum 보다는 높았으나 CpG1826 보다는 낮은 것으로 나타났다. 이 결과로 볼 때 CIA07의 면역보조활성은 백신항원의 종류에 따라 다르게 나타나는 것으로 생각된다. 결론적으로 CIA07은 두 종류의 바이러스성 백신항원에 대하여 Th2 type 항체 면역반응과 Th1 type 세포성면역반응을 증가시키는 활성이 있는 것으로 나타나 향후 바이러스성 감염질환의 예방과 치료백신의 면역보조제로서의 활용가능성이 높은 것으로 사료된다.

Abstract ▼

CIA07 is an immunostimulatory agent composed of bacterial DNA fragments and modified LPS, which has antitumor activity against bladder cancer in mice. In this study, we investigated whether CIA07 is capable of inducing cellular immune responses against HBsAg in mice. Mice were immunized intramuscula

CIA07 is an immunostimulatory agent composed of bacterial DNA fragments and modified LPS, which has antitumor activity against bladder cancer in mice. In this study, we investigated whether CIA07 is capable of inducing cellular immune responses against HBsAg in mice. Mice were immunized intramuscularly 3 times at 1-week intervals with HBsAg alone or in combination with alum, bacterial DNA fragments, modified LPS, CIA07 or CpG1826. At one week after the final injection, splenocytes were analyzed for IFN-$\Upsilon$-production by flow cytometry. CIA07-treated mice were the highest in IFN-$\Upsilon$-production among the test groups. CIA07 was also found to increase the number of HBsAg-specific $CD8^+$ T cells in PBMC as determined by MHC I-peptide pentamer staining and to enhace CTL activity, indicating that CIA07 stimulates Th1-type cellular immune response against HBsAg. The adjuvant activity of CIA07 was also evaluated using influenza virus HA subunit vaccine and B. anthracis PA as immunogen. The results showed that CIA07 induced both antibody response and cellular response against influenza HA antigen but the immunostimulatory activity was lower with PA. These data suggest that CIA07 is able to induce both Th1 and Th2-type immune responses to viral vaccine antigens, and confirm its potential as an adjuvant in prophylactic/therapeutic vaccines for viral infection.

목차 Contents

• 학술연구용역사업 최종결과보고서 ...1
• 목차 ...2
• Ⅰ. 연구개발결과 요약문 ...3
• Summary ...4
• Ⅱ. 학술연구용역사업 연구결과 ...5
• 제1장 최종 연구개발 목표 ...5
• 제1절 연구목표 ...5
• 제2장 최종 연구개발 내용 및 방법 ...9
• 제1절 연구내용 ...9
• 제2절 연구방법 ...9
• 제3장 최종 연구개발 결과 ...13
• 제1절 면역보조제의 HBsAg 항원에 대한 세포성면역 유도활성 ...13
• 제2절 CIA07의 influenza virus 항원에 대한 면역활성 증강작용 ...17
• 제3절 CIA07의 B. anthracis PA 항원에 대한 면역활성증강작용 ...19
• 제4장 연구결과 고찰 및 결론 ...22
• 제5장 연구성과 ...24
• 제6장 참고문헌 ...25
• 제7장 첨부서류 ...27