초록 ▼

지원 기간 축소에 따라 본래 계획 중 다음과 같은 연구를 수행하기로 협약 과정에서수정한 바 있으며, 수정 계획서 상의 연구를 계획대로 모두 완료했음.
$\bullet$ ppGpp 합성 효소 준비
$\bullet$ ppGpp 합성 및 정제
$\bullet$ ppGpp와 GDP를 고정화하여 affinity column 제작
$\bullet$ 고정화된 ppGpp, GDP, GTP를 affinity ligand로 사용하여 affini

지원 기간 축소에 따라 본래 계획 중 다음과 같은 연구를 수행하기로 협약 과정에서수정한 바 있으며, 수정 계획서 상의 연구를 계획대로 모두 완료했음.
$\bullet$ ppGpp 합성 효소 준비
$\bullet$ ppGpp 합성 및 정제
$\bullet$ ppGpp와 GDP를 고정화하여 affinity column 제작
$\bullet$ 고정화된 ppGpp, GDP, GTP를 affinity ligand로 사용하여 affinity chromatography
$\bullet$ 각 ligand에 결합하는 단백질을 이차원 전기영동과 MALDI-TOF MS로 동정함
$\bullet$ 결합 단백질 혼합물을 trypsin으로 처리한 후 LC/MSMS로 동정함(shotgun analysis)
$\bullet$ 동정된 단백질을 ligand 변화에 따른 차이점 비교 분석
$\bullet$ ppGpp와 GDP의 비교는 3'-hydroxyl group에 존재하는 인산기의 차이에 따른 특이성을 관찰할 수 있음
$\bullet$ GTP와 ppGpp의 비교는 본 접근법의 타당성 검토에 도움됨

Abstract ▼

Due to the reduced period of support, the works below have been done. All of the experiemnts in the agreement have been accomplished as planned.
$\bullet$ Preparation of ribosomal fraction for ppGpp synthesis
$\bullet$ Synthesis and purification of ppGpp
$\bullet$

Due to the reduced period of support, the works below have been done. All of the experiemnts in the agreement have been accomplished as planned.
$\bullet$ Preparation of ribosomal fraction for ppGpp synthesis
$\bullet$ Synthesis and purification of ppGpp
$\bullet$ Immobilization of ppGpp and GDP to Sepharose
$\bullet$ Affinity chromatography with immobilized ppGpp, GDP, and GTP
$\bullet$ Further separation of the bound proteins by 2-dimensional gel electrophoresis
$\bullet$ Identification of bound proteins by MALDI-TOF MS
$\bullet$ Identification by LC/MSMS after trypsin hydrolysis (shotgun analysis)
$\bullet$ Comparison of the bound proteins between ligands employed
$\bullet$ Comparison between ppGpp and GDP will be related with the specificity of the pyrophosphate at 3'-hydroxyl group.
$\bullet$ ppGpp and GTP will be compared for verifying the method employed in this study

목차 Contents

• 일반연구자지원사업 최종보고서(초안) ...1
• 목차 ...2
• Ⅰ. 연구 계획 요약문 ...3
• 1. 국문 요약문 ...3
• Ⅱ. 연구 결과 요약문 ...4
• 1. 국문 요약문 ...4
• 2. SUMMARY...5
• Ⅲ. 연구 내용 ...6
• 1. 연구 개발 과제의 개요 ...6
• 2. 국내외 기술 개발 현황 ...9
• 3. 연구 수행 내용 및 결과 ...10
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ...13
• 5. 연구 결과의 활용 계획 ...13
• 6. 연구 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보 ...14
• 7. 주관연구책임자 대표적 연구 실적 ...14
• 8. 참고 문헌 ...15
• 9. 연구 성과 ...15
• 10. 기타 성과 ...15