초록 ▼

수지상세포 ex vivo 유전자치료제는 ex vivo에서 수지상세포에 유전자를 전달하여 제조한 치료제를 환자에게 투여하는 방법으로 최근 임상사례가 증가하고 있는 첨단 생물의약품임. 본 연구에는 마우스와 원숭이에서 재조합 바이러스로 전이한 수지상세포 유전자 치료제의 효능평가 방법을 설정하고 독성시험결과를 비교 평가하고자 함. 본 연구에서는 마우스 및 원숭이의 수지상세포 ex vivo 유전자 치료제의 제조 기법을 설정하였으며, 재조합 아데노바이러스에 의한 유전자 전달효율 측정 방법을 확립함. 또한 마우스 종양 모델에서 수지상세포 유전자

수지상세포 ex vivo 유전자치료제는 ex vivo에서 수지상세포에 유전자를 전달하여 제조한 치료제를 환자에게 투여하는 방법으로 최근 임상사례가 증가하고 있는 첨단 생물의약품임. 본 연구에는 마우스와 원숭이에서 재조합 바이러스로 전이한 수지상세포 유전자 치료제의 효능평가 방법을 설정하고 독성시험결과를 비교 평가하고자 함. 본 연구에서는 마우스 및 원숭이의 수지상세포 ex vivo 유전자 치료제의 제조 기법을 설정하였으며, 재조합 아데노바이러스에 의한 유전자 전달효율 측정 방법을 확립함. 또한 마우스 종양 모델에서 수지상세포 유전자치료제의 효능 평가 방법을 설정하였으며, SIV 감염 원숭이 모델에서 면역원성 및 효능 평가를 수행하였음. 수지상세포 ex vivo 유전자치료제를 투여한 마우스 및 원숭이에서 복제가능한 바이러스의 검출을 시도하였으며, 모든 시료에서 검출한계 아래 값을 보였음. 면역기능에 주는 영향을 평가하기 위해 마우스 및 원숭이에서 선천 면역반응, 항원에 특이적인 면역반응, 재조합아데노바이러스에 대한 면역반응 및 면역세포의 분포를 분석하였음. 독성항목을 설정하기 위해 전달 유전자의 생체분포를 검사하고, 체중, 혈액학적 검사를 수행하였음. 원숭이의 투여부위에서 더 많은 전달유전자가 발견되었으나, 투여물질과 연관된 독성은 나타나지 않음. 재조합 바이러스 대신 naked DNA를 전달한 수지상세포 유전자치료제를 투여한 마우스에서 면역세포 분포를 분석하였음. 본 연구결과를 통하여 마우스와 원숭이에서 효능, 생체분포 및 독성 결과를 비교 평가함으로써 항 후 세포를 매개하는 ex vivo 유전자치료제의 바람직한 효능 및 독성 평가 방법을 제시할 수 있을 것임.

Abstract ▼

The dendritic cell (DC)-based ex vivo gene therapy is recently developed, and several clinical trials of this type of drug have been conducted. In this study, we established the methods for the evaluation of efficacy of DC-based gene therapy and obtained toxicological data in mice and monkeys. DC we

The dendritic cell (DC)-based ex vivo gene therapy is recently developed, and several clinical trials of this type of drug have been conducted. In this study, we established the methods for the evaluation of efficacy of DC-based gene therapy and obtained toxicological data in mice and monkeys. DC were prepared from and mouse bone marrow and monkey PBMC and transduction efficacy of adenovirus-infected DC were investigated. By using a surrogate mouse tumor model, the therapeutic efficacy of the gene therapy was evaluated. To test the efficacy of DC in nonhuman primates, autologous monkey DC infected with adenovirus were inoculated into SIV-infected monkeys receiving anti-retroviral therapy, and immune responses and vira loads were determined. In addition, the level of replication competent adenovirus (RCA) were measured in organs from mice and monkeys that received DC-based gene therapy. All organs showed undetectable level of RCA. To investigate the effect of injected DC on immunological functions, acquired immune responses to adenovirus, transgene products as well as innated immune responses were determined. Also, population of immune cells in blood and spleen of mice and monkeys was determined by using FACS. To test toxcity of DC-based ex vivo gene therapy, body weights, general clinical signs, and hematological values were observed in mice and monkeys. No toxicity associated with DC-based gene therapy was found. Our results will give helpful informations about methods for evaluation of safety and efficacy of ex vivo gene therapy.

목차 Contents

• 용역연구개발과제 최종보고서 ...1
• 표지 ...2
• 제출문 ...4
• 목차 ...5
• I. 총괄연구개발과제 요약문 ...7
• 1. 국문요약문 ...7
• 2. 영문요약문 ...9
• II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...11
• 제1장 총괄연구개발과제의 목적 및 필요성 ...11
• 제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 ...17
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 ...20
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 ...49
• 제5장 총괄주요연구 변경사항 ...50
• 제6장 총괄참고문헌 ...51
• 제7장 총괄첨부서류 ...52