초록 ▼

1.실험동물을 이용한 아토피성 피부염 동물모델 확립 및 검증
1) Phase I 아토피 동물 모델 검증 및 확립
TMA(trimellitic anhydride)를 이용하여 면역교란 상태(사람에서의 아토피 상태)를 유도하고, 피부염 유발여부, 혈중 IgE 농도의 증가 및 조직병리학적 연구 등을 종합적으로 판단하여 TMA을 이용한 phase I 아토피 동물모델을 검증하고 유발조건을 확립하였음.
2) Phase II 아토피성 피부염 동물모델 검증 및 확립
TMA로 유도된 Phase I 면역교란 동물에 선행연구결과에서

1.실험동물을 이용한 아토피성 피부염 동물모델 확립 및 검증
1) Phase I 아토피 동물 모델 검증 및 확립
TMA(trimellitic anhydride)를 이용하여 면역교란 상태(사람에서의 아토피 상태)를 유도하고, 피부염 유발여부, 혈중 IgE 농도의 증가 및 조직병리학적 연구 등을 종합적으로 판단하여 TMA을 이용한 phase I 아토피 동물모델을 검증하고 유발조건을 확립하였음.
2) Phase II 아토피성 피부염 동물모델 검증 및 확립
TMA로 유도된 Phase I 면역교란 동물에 선행연구결과에서 얻어진 formaldehyde 및 집먼지진드기 추출물(DF)을 처리하여 아토피성 피부염 유사피부질환 유발, 혈중 IgE, 조직병리검사, 피부조직 내 비만세포 및 호산구 침윤, 소양증 등을 통하여 아토피성 피부염 유발을 검증하고 임상유사 피부질환 유발 조건을 확립하였음.
2.아토피성 피부염 동물모델에서 인체유해물질의 아토피성 피부염 유발 평가법 확립
TMA로 유도된 Phase I 면역교란 동물모델을 이용하여 다양한 인체유해물질의 아토피성 피부염 유사 피부질환 유발여부를 평가할 수 있는 실험법을 확립하였음. TMA를 주당 3회, 2주간 투여하여 면역교란동물을 제작 후 (혈중 IgE 농도 600ng/ml 이상, 피부염 및 조직병리 이상 없는 상태) 인체유해 물질을 반복투여하여 임상에서 아토피성 피부염의 원인으로 잘 알려진 집먼지진드기 추출물 및 새집증후군 유발물질로 잘 알려진 formaldehyde에서 아토피성 피부염 유사 피부질환이 본 동물모델에서 확인되었음. 그 외 다양한 인체유해 물질로서 새집증후군 후보물질 수종(benzene, dichlorobenzene, dichloromethane, xylene 등) 및 잔류농약성분 수종(aldrin, chlorpyrifos 등)을 phase I 면역교란 동물을 활용하여 아토피성 피부질환 유발여부를 평가하였음.
3.아토피성 피부염 동물모델에서 아토피성 피부염 평가 생체지표 발굴
DNA microarray 와 proteomics의 선행연구결과 도출된 정상군에 비해 변화가 있었던 생체지표를 RT-PCR 혹은 ELISA 분석으로 검증하였음. Haptoglobin, cathepsin D, calgranulin, IL-4, IFN-$\gamma$, TNF-$\alpha$ 등을 분석한 결과, 특히 haptoglobin, IL-4의 경우 본 과제에서 제작한 실험동물에서 피부질환의 정도에 따라 수치가 비례하는 높은 상호관련성을 보였음.
4.아토피성 피부염 동물모델과 아토피성 피부염 소아환자의 생체지표 비교분석
임상소아환자의 혈액을 생화학적 분석 및 proteomics 분석한 결과, total IgE level은 대조군에 비해 모두 10배 이상 증가하는 것을 확인했음. 이는 임상통계학적 결과 아토피 소아환자의 70% 이상이 IgE가 상승한다는 결과와 본 연구의 phase I 제작시 serum IgE level을 올리고자 하는 의도와 부합되는 결과임. 또한 eosinophil도 아토피성 피부염 환자의 평가항목과 본 동물모델에서 동일하게 증가함을 확인했음. 그러나 haptoglobin의 경우는 동물모델의 경우와는 다르게 DF 민감환자군에서 대조군에 비해 크게 증가하지 않았음.

Abstract ▼

1.Establishment and verification of atopic dermatitis (AD)-like animal models in mice
1) Establishment and verification of immune-imbalanced animals (Phase I)
After inducing immune-imbalanced animals using TMA(trimellitic anhydride), which is atopy status in human, we established and verified

1.Establishment and verification of atopic dermatitis (AD)-like animal models in mice
1) Establishment and verification of immune-imbalanced animals (Phase I)
After inducing immune-imbalanced animals using TMA(trimellitic anhydride), which is atopy status in human, we established and verified the experimental protocol and clinical indexes such as AD-dermatitis, the serum level of IgE, and histopathological index.
2) Establishment and verification of AD-like animal models (phase II)
Based on the preliminary results, formaldehyde and mite extracts were used to induce the AD-like dermatitis in animals. We verified the experimental protocols and clinical indexes including AD clinical index, serum IgE level, histology of skin, infiltration of mast cells and eosinophils, scratching index to support AD symptoms.
2. Establishment of experimental protocols to evaluate harmful effects of various noxious
chemicals and mite extracts on induction of AD-like lesion in mice The experimental protocols to induce immune-imbalanced animal and sequential AD-like skin lesions were established in mice. The AD- inducing effect of formadehyde, mite extracts, benzene, xylene, aldrin, chloropyrifos, dichlorobenzene, and dichloromethane were assessed in the phase I immune-imbalanced animal models.
3. Discovery of diagnostic or therapeutic biomarkers in AD-like mice and patient serums The biomarker candidates obtained from the preliminary studies using DNA array and proteomics were further investigated by RT-PCR and ELISA. Among them, haptoglobin, cathepsin D, calgranulin, IL-4, IFN-$\gamma$, and TNF-$\alpha$ were measured in animal skins and serums. Among them, haptoglobin and IL-4 exhibited good correlation with severity of skin lesion in animal models.

목차 Contents

• 용역연구개발과제 최종보고서...1
• 표지...3
• 제 출 문...6
• 목 차...7
• Ⅰ. 연구개발결과 요약문...8
• (한글) 인체유해물질과 아토피 피부염의 상관성 연구(II) -아토피 피부염 동물모델의 확립 및 검증...8
• (영문) Research on the relationship between harmful materials and atopic dermatitis in animal model (II) - Establishment and verification...10
• Ⅱ. 총괄연구개발과제 연구결과...12
• 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표...12
• 1.1 총괄연구개발과제의 목표...12
• 1.2 총괄연구개발과제의 목표달성도...13
• 1.3 국내.외 기술개발 현황...14
• 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법...22
• 제 1절. 연구개발 내용...22
• 제 2절. 연구방법...29
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과...36
• 제 1절. 연구결과 요약...36
• 제 2절. 연구결과...42
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...95
• 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과...102
• 5.1 활용성과...102
• 5.2 활용계획...103
• 제6장 기타 주요변경사항...104
• 제7장 참고문헌...105
• 제8장 첨부서류...108