초록 ▼

Ⅰ. 연구개발의 목적 및 필요성
사건 해결에 결정적인 단서를 제공하는 사건현장의 중요 미량 움 증거물(100g 미만의 DNA)은 일반적인 분석 방법으로는 좋은 결과를 얻기 어려우며, 이러한 미량 DNA 증거물 중 특히 “접촉 증거물(Touch DNA)"의 성공적인 분석을 위해서는 시료의 채취, DNA 분리 및 증폭 과정은 물론 PCR 후 전기영동 조건의 최적화 등에 대한 체계적인 연구가 필수적으로 요구됨. 또한 사건현장에는 범죄와 관련된 식물편이 발견되는 경우가 있는데, 지금까지는 식물의 형태학적/조직학적 감정에 의존해 왔으나

Ⅰ. 연구개발의 목적 및 필요성
사건 해결에 결정적인 단서를 제공하는 사건현장의 중요 미량 움 증거물(100g 미만의 DNA)은 일반적인 분석 방법으로는 좋은 결과를 얻기 어려우며, 이러한 미량 DNA 증거물 중 특히 “접촉 증거물(Touch DNA)"의 성공적인 분석을 위해서는 시료의 채취, DNA 분리 및 증폭 과정은 물론 PCR 후 전기영동 조건의 최적화 등에 대한 체계적인 연구가 필수적으로 요구됨. 또한 사건현장에는 범죄와 관련된 식물편이 발견되는 경우가 있는데, 지금까지는 식물의 형태학적/조직학적 감정에 의존해 왔으나 보다 정확한 식별 및 개체식별을 위한 DNA 분석법을 확립할 필요가 있음.
Ⅱ. 연구개발의 내용 및 범위
○ DNA 분리 방법의 비교
● 미량 증거물별(접촉증거물, 소변 등) DNA 검출 한계설정
● DNA 분리 방법(상용 키트)에 따른 DNA 분리 수율 비교: QIAuick Micro kit(QIAGEN), DNA IQ SYSTEM(Promege), PrepFiler kit(Applied Biosystems), forensicGEM(ZyGEM).
○ 식물 조직의 DNA 분리 및 염기서열 분석에 의한 종식별
● 식물 조직의 DNA 바코드 유전자인 엽록체 DNA의 ITS 마커 (psbK-psbI, psbA-trnH, atpF-atpH)외 mat 유전자의 염기서열을 결정
● GenBank 염기서열 상동성 검색(Blast Search)를 토한 미지 식물의 종식별
Ⅲ. 연구개발 결과 및 성과
○ 생물학적 증거물 별 특성에 따른 최적의 DNA 분리방법 적용으로 DNA 분리 수율 향상
○ forensicGEM DNA 분리방법의 유효성 확인으로 분석 시간 및 비용 절감
○ 형태학적 및 조직학적 검사가 불가능한 미량의 미지 식물 조직에 대한 종식별 가능

Abstract ▼

Successful DNA typing of LCN(Low copy number) samples from crime scene have been hot issue in DNA analysis laboratories in the world. In many cases, LCN samples were crucial for solving the crime. However, LCN samples have only below 100pg DNA resulting ambiguous results. The success of DNA typing w

Successful DNA typing of LCN(Low copy number) samples from crime scene have been hot issue in DNA analysis laboratories in the world. In many cases, LCN samples were crucial for solving the crime. However, LCN samples have only below 100pg DNA resulting ambiguous results. The success of DNA typing with LCN sample were known to depend largely on the quantity and quality of DNA. Two new DNA extraction kit, Prepfiler and forensicGEM, were evaluated and compared to conventional DNA extraction kit such as QIAquick micro kit(QIAGEN) and DNA IQ system(Promega). DNA quantity were measured by qPCR using Quantifiler Human DNA quantification kit(Applied Biosystems) and ABI7500 real-time machine(Applied Biosystems). New single-tube DNA extraction method using forensicGEM was ecaluated for saliva forensic samples such as buccal swabs, FTA-card saliva, and cigarette butts in this study. DNA extraction by forensicGEM method was demonstrated to rapid, simple and sensitive for reference samples such as buccal swabs, cups, and so forth. The optimum total reaction volume and forensicGEM™ volume were determined to 50？L and 1.0？L, respectively.
Species identification of pinus demonstrated using DNA sequencing of three ITS(Internal transcribed of pinus demonstrated using DNA sequencing of three ITS(Internal transcribed spacer, psbK-psbI, psbA-trnH, atpF-atpH) and mat gene followed by sequence homology search by GenBank Blast.

목차 Contents

• 자체연구사업 최종보고서 ...1
• 요약문 ...2
• Summary ...3
• 목차 ...4
• Ⅰ. 연구개발과제 연구결과 ...5
• 제1장 연구개발과제의 개요 ...5
• 제1절 연구개발과제의 목표 ...5
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ...5
• 제2장 연구개발과제의 국내.외 연구개발 현황 ...5
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ...7
• 제4장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ...14
• 제5장 연구개발과제 연구개발 결과 활용계획 ...14
• 제1절 활용성과 ...14
• 제2절 활용계획 ...16
• 제6장 참고문헌 ...16
• 제7장 첨부서류 ...17