초록 ▼

1. 제1세부과제
○ VIGS를 이용한 작물의 유용유전자 대량발굴 및 기능분석
- 다양한 작물을 기주로 하는 CMV vector의 기주특이성 및 각 기주에서의 VIGS적용 가능성을 파악
- CMV RNA genome 1, 2, 3을 각각 35S Promoter를 포함하는 binary vector에 삽입시키고, Agro-infiltration 및 gene-gun 접종시 VIGS 적용성과 in vitro transcripts와의 효율성을 비교
- 기개발 CMV strain과는 다른 strain의 CMV vector

1. 제1세부과제
○ VIGS를 이용한 작물의 유용유전자 대량발굴 및 기능분석
- 다양한 작물을 기주로 하는 CMV vector의 기주특이성 및 각 기주에서의 VIGS적용 가능성을 파악
- CMV RNA genome 1, 2, 3을 각각 35S Promoter를 포함하는 binary vector에 삽입시키고, Agro-infiltration 및 gene-gun 접종시 VIGS 적용성과 in vitro transcripts와의 효율성을 비교
- 기개발 CMV strain과는 다른 strain의 CMV vector 개발을 통하여 신규성을 갖는 다양한 기주에 적용 가능한 vector로의 개발 및 VIGS 적용 가능성을 파악하고, 관련 유전자의 적용 및 발굴을 위한 시스템을 확립
- 여러 strain 기반의 CMV vector 개발로 가지과 (고추, 토마토), 십자화과(무 등), 박과식물(애호박 등)에 대한 VIGS 시스템 적용을 확증하고, CMV RNA2의 MCS의 변형을 통한 대량 유전자 검정기능을 확립
○ 바이러스벡터를 이용한 고기능성 유전자 산물 생산과 활용
- 동물유래 유용 유전자의 식물체내 발현 스크리닝을 위하여 기본적인 TMV vector를 이용한 유전자 발현을 검정
- TMV 벡터를 이용한 발현 검정외에 CMV 벡터를 이용한 유전자들의 발현을 비교 검정
- 인간 IL1 receptor antagonist 유전자의 CMV 벡터를 이용한 식물체 발현을 확인하고, 공동연구원으로 합류하는 전남대 이진하박사 연구팀과 협동으로 식물체내에서 발현시키는 산물의 정제, 특성분석, 세포투여 및 기능검정 수행
2. 제1협동과제
○ 고등식물체 고효율 대량발현용 바이러스클론 개발 및 기능분석용 벡터 개발
- 가지과(고추)바이러스 벡터의 실용화 응용: 고추 감염바이러스 벡터의 고효율화를 위한 변형제작 ; 고추에 감염하는 바이러스벡터(CMV 및 PepMoV)를 활용하여 바이러스의 병원성및 진딧물전반에 관련된 부분을 탐색하고 병원성관련 유전자의 약독화를 통한 바이러스벡터의 고효율화를 검정

Abstract ▼

Novel Gn-CMV vector system was developed from a domestic isolate, of which clone was driven by 35S promoter for the VIGS system of Solanaceae, Brassicae, and Cucurbitae crops. Which was conformed by VIGS of pds and other genes related morphology of plants. Infectious full-length clones of CFMMV and

Novel Gn-CMV vector system was developed from a domestic isolate, of which clone was driven by 35S promoter for the VIGS system of Solanaceae, Brassicae, and Cucurbitae crops. Which was conformed by VIGS of pds and other genes related morphology of plants. Infectious full-length clones of CFMMV and RMV was constructed for applying to virus vector and to study interactions between viruses and plants such as Cucurbitae and Brassicae. Human IL-1 receptor antagonist protein was expressed in chili pepper using CMV vector and it was effective to human pulp cell. Also, IL-15 and Mic-2 protein of chicken were cloned into virus vector and expressed successfully in tobacco plants.
A full-length cDNA clone (pSP6PepMoV-Vb1) of the genomic RNA of a Korean isolate of Pepper mottle virus (PepMoV-Vb1) and Cucumber mosaic virus (CMV Col RNA3) clone was constructed. The New pSP6PepMoV-Vb1/GFP/NAT and pSP6PepMoV- Vb1/EnD clones were highly infectious in Nicotiana benthamiana and Capsicum annuum. It should offer the possbility to screen faster, ehalier and more efficiently the response of resistance plants to virus infection. In addition, CMV and Cucumbegenome and the mutants analyzed using a genetic footprinting technique. Furthermore, the strategy described is applicable to any cloned DNA. We sure this systems revealed the predicted key points of gene functions in genome and molecular farming.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 9
• 목차 ... 12
• 제 1 장 서론 ... 13
• 제 1 절 연구개발의 목적 ... 13
• 제 2 절 연구개발의 필요성 ... 13
• 제 2 절 연구개발의 범위 ... 15
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 20
• 제 1 절 국ㆍ내외 관련분야에 대한 기술개발현황 ... 20
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 23
• 제 1 절 VIGS를 이용한 작물의 유용유전자 대량발굴 및 새로운 고기능성 유용유전자 산물 생산과 활용 (제1세부과제: 중앙대 이긍표) ... 23
• 제 2 절 고등식물체 고효율 대량발현용 바이러스 클론 개발 및 기능분석용 벡터 개발 (제1협동과제: 서울여대 홍진성) ... 90
• 제 3 절 바이러스 집단의 유전체변이 발생기전 해석과 진화기구 규명 (제2협동과제: 강원대 최장경) ... 116
• 제 4 절 Emerging virus 게놈분석 및 작물의 조기 저항성 검정 분석을 통한 분자육종 소재개발 (제3협동과제: 국립원예특작과학원 최국선) ... 148
• 제 5 절 바이러스벡터 시스템을 활용한 고추의 바이러스저항성 유전자 발굴 및 실용화 (제4협동과제: 고려대 김영진) ... 165
• 제 4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 184
• 제 1 절 목표대비 대외달성도 ... 184
• 제 2 절 정량적 성과 (논문게재, 특허출원, 기타) ... 187
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 190
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 191
• 제 7 장 기타 중요 변동사항 ... 195
• 제 8 장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구장비현황 ... 196
• 제 9 장 참고문헌 ... 197
• 끝페이지 ... 199