초록 ▼

목적: Genetic alteration 뿐만 아니라 epigenetic change도 tumor progression과 metastasis에 영향을 주는 것을 확인하였음. tumor suppressor gene의 promoter methylation은 gene silencing을 유도할 수 있음. 또한, 암세포에서 reactive oxygen species (ROS)와 epigenetic change와의 관련성은 잘 알려있지 않으나, DNA damage를 유도한다는 사실은 알려져 있음. 우리는 ROS가 catalase promot

목적: Genetic alteration 뿐만 아니라 epigenetic change도 tumor progression과 metastasis에 영향을 주는 것을 확인하였음. tumor suppressor gene의 promoter methylation은 gene silencing을 유도할 수 있음. 또한, 암세포에서 reactive oxygen species (ROS)와 epigenetic change와의 관련성은 잘 알려있지 않으나, DNA damage를 유도한다는 사실은 알려져 있음. 우리는 ROS가 catalase promoter에 hypermethylation을 유도하는지를 간암 세포주 실험을 통해 알아보았음.
방법: 간암 세포주인 Hep3B와 Huh7에 H2O2를 처리하여, catalase의 발현의 변화를 확인함. Catalase 발현변화는 real-time reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) 과 immunoblot analysis를 통해서 확인하였음. Catalase promoter의 methylation status는 methylation-specific PCR (MSP)과 bisulfite sequencing (BS)을 통해 확인하였음. 또한 ROS로 인한 catalase의 발현 변화와 catalase promoter의 methylation여부를 간암조직에서 real-time RT-PCR, immunoblot analysis, MSP와 BS를 통해 분석하였음.
실험결과: 우리는 ROS가 catalase promoter methylation을 유도한다는 사실을 확인하였음. Catalase promoter의 DNA의 methylation은 DNA methyltransferase 1에 의해서 유도됨. 실제 사람의 간암 조직에서도 ROS induction, catalase의 발현 저하, catalase promoter의 methylation의 관계를 확인하였음.
결론: 이와 같은 발견은 carcinogenesis 과정에서 ROS에 의해 유도되는 epigenetic 조절에 대한 novel mechanistic insights를 제공함. Tumor progression과 metastasis과정에서 catalase gene에 대한 ROS의 activity를 이해하는데 기초자료가 될 수 있음.

Abstract ▼

Background & Aims: In addition to genetic alterations, epigenetic changes underlie tumor progression and metastasis. Promoter methylation can silence tumor suppressor genes, and reactive oxygen species (ROS) promote DNA damage, although the relationship between ROS and epigenetic changes in cancer c

Background & Aims: In addition to genetic alterations, epigenetic changes underlie tumor progression and metastasis. Promoter methylation can silence tumor suppressor genes, and reactive oxygen species (ROS) promote DNA damage, although the relationship between ROS and epigenetic changes in cancer cells is not clear. We sought to determine whether ROS promote hypermethylation of the promoter region of catalase in hepatocellular carcinoma (HCC) cells.
Methods: HCC cells were exposed to H2O2 that down-regulates catalase expression. Catalase expression levels were examined by real-time reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunoblot analyses. The methylation status of catalase promoter was examined by methylation-specific PCR(MSP) and bisulfite sequencing (BS). ROS-induced catalase expression and catalase promoter methylation were confirmed in HCC tissues by real-time RT-PCR, immunoblot analysis, MSP and BS.
Results: We demonstrated that ROS induce hypermethylation of the catalase promoter. ROS induced DNA methylation of the CpG island II on the catalase promoter by recruiting DNA methyltransferase 1. In human HCC tissues, we observed a correlation among ROS induction, catalase down-regulation and catalase promoter methylation.
Conclusions: These findings provide novel mechanistic insights into epigenetic modulations induced by ROS in the process of carcinogenesis. They are potentially relevant to understanding the activity of ROS in silencing catalase genes and in subsequent tumor progression and metastasis.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 목 차 ... 3
• 연구개발사업 최종연구개발결과보고서 요약문 ... 4
• Project Summary ... 5
• 연구개발과제 연구결과 ... 6
• 1. 연구개발과제의 최종 연구 개발 목표 ... 6
• 2. 연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 6
• 3. 연구개발과제의 연구개발결과 ... 6
• 4. 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 39
• 5. 연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 40
• 6. 연구개발과제의 활용계획 ... 49
• 7. 참고문헌 ... 50
• 8. 첨부서류 ... 51