초록 ▼

● 방사선 내성과 연관 있는 뇌종양 암줄기세포 표지자를 발굴하기 위하여 방사선 치료에 반응하지 않은 뇌종양 환자들에서 많이 발현되는 mRNA와 단백질을 동정하였으며, 실험적으로 암줄기세포 충만화 세포주, 방사선 내성 세포주를 제작하여 이 세포주에서 유의하게 발현이 증가하는 mRNA와 단백질을 동정하였음.
● 동정된 다수의 뇌종양 암줄기세포 방사선 저항성 표적인자 후보들 중 c-MET, WNT, EZH2를 참신성, 임상응용가능성 등의 기준으로 최종 선정하였으며, 뇌종양 암줄기세포 표지자 및 방사선 저항성 표적인자로서의 기능을 실

● 방사선 내성과 연관 있는 뇌종양 암줄기세포 표지자를 발굴하기 위하여 방사선 치료에 반응하지 않은 뇌종양 환자들에서 많이 발현되는 mRNA와 단백질을 동정하였으며, 실험적으로 암줄기세포 충만화 세포주, 방사선 내성 세포주를 제작하여 이 세포주에서 유의하게 발현이 증가하는 mRNA와 단백질을 동정하였음.
● 동정된 다수의 뇌종양 암줄기세포 방사선 저항성 표적인자 후보들 중 c-MET, WNT, EZH2를 참신성, 임상응용가능성 등의 기준으로 최종 선정하였으며, 뇌종양 암줄기세포 표지자 및 방사선 저항성 표적인자로서의 기능을 실험적으로 증명하였음.
● 방사선 내성과 연관 있는 유방암뇌전이 암줄기세포 표지자를 발굴하기 위하여 암줄기세포 충만화 세포주, 방사선 내성 세포주를 제작하여 이들에서 유의하게 발현이 증가하는 mRNA와 단백질을 동정하였으며, 여러 후보 단백질의 발현을 유방암세포주와 환자유래세포에서 유세포분석 기법으로 이용 가능성을 탐색하여 Notch, c-MET을 최종적으로 선정하였음.
● 유방암뇌전이 실험모델을 이용하여 Notch, c-MET과 암줄기세포 및 방사선 내성과의 관련성을 검증하였음.
● 방사선 내성 관련 교모세포종, 유방암뇌전이 암줄기세포 표지자를 발굴하여 새로운 치료 전략 개발을 위한 초석을 확립함.

Abstract ▼

In order to discover radioresistance-related genes in glioblastoma, we developed in vivo models that model the patient characteristics. We characterized the glioblastoma patient genetics in relation to their clinical parameters, as well as the gene expression pattern of the cells isolated from the i

In order to discover radioresistance-related genes in glioblastoma, we developed in vivo models that model the patient characteristics. We characterized the glioblastoma patient genetics in relation to their clinical parameters, as well as the gene expression pattern of the cells isolated from the in vivo models. The discovered candidate genes were evaluated from the clinical viewpoint, and we established their relevance to CSC characteristics and to radiation resistance in each model.
In addition, in order to discover novel genes related to radiation resistance in breast cancer, we analyzed the gene expression pattern of CSC-enriched cell lines and in vivo radioresistant cell lines. Our group validated these candidate genes in breast cancer and breast cancer brain metastasis models.

목차 Contents

• 제출문 ... 1
• 보고서 요약서 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 6
• CONTENTS ... 9
• 목차 ... 10
• 제 1 장 연구개발 과제의 개요 ... 12
• 1. 연구 개발의 목적 ... 12
• 2. 연구개발의 필요성 ... 12
• 제 2 장 국내외 기술 개발 현황 ... 16
• 1. 연구개발대상 기술의 국내·외 현황 ... 16
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 21
• Part I. 교모세포종 암줄기세포의 방사선 내성 발현 기전 규명을 통한 암줄기세포 표적 방사선 치료법 개발 ... 21
• 1절. 뇌종양 환자의 임상정보 분석 및 실험적 결과 분석을 통한 방사선 저항성 관련 표적 인자 발굴 ... 23
• 1. 뇌종양 환자의 임상정보 분석을 통한 방사선 저항성 관련 표적 인자 발굴 ... 23
• 2. 실험적 결과 분석을 통한 방사선 저항성 관련 표적 인자 발굴 ... 37
• 2절. 뇌종양 환자의 임상정보 분석 및 실험적 결과 분석을 통한 발굴한 방사선 저항성 관련 표적 인자(WNT, c-MET, EZH2)의 기능 규명(Validation) ... 51
• 1. 교모세포종 암줄기세포 충만화 세포주(U87MG-R4)를 이용해 발굴한 FZD4의 기능 검증 ... 51
• 2. 교모세포주 in vivo radiation model을 이용한 발굴한 WNT pathway의 방사선 저항성 기능 검증 ... 54
• 3. 교모세포종 환자 유래 암줄기세포주를 이용한 방사선 치료 내성 관련 c-MET pathway 기능 규명 ... 57
• 4. 방사선 저항성에 미치는 EZH2의 역할 및 shEZH2에 의한 방사선 감수성 증진 효과 규명 ... 68
• 3절. 교모세포종 환자 유래 암줄기세포를 이용한 In vivo radiation model 개발과 이를 통한 교모세포종의 방사선 저항성 메커니즘 규명 ... 73
• 1. 교모세포종 환자 유래 일차배양 암세포를 이용한 방사선 민감도와 임상데이터와의 상관관계 조사 ... 73
• 2. 교모세포종 환자유래 세포의 유전적 특성 규명 및 방사선에 의한 세포분열속도 변화 관찰 ... 78
• 3. 환자유래 암세포를 이용한 in vivo 방사선 모델 확립 ... 79
• 4. 교모세포종 환자유래 세포의 방사선 내성세포주 확립 및 암줄기세포 표적 후보 유전자 발굴 ... 84
• Part II 유방암 암줄기세포의 방사선 내성 발현 기전 규명을 통한 암줄기세포 표적 방사선 치료법 개발 ... 88
• 1절. 유방암 뇌전이 암줄기세포 충만화 세포주와 유방암 뇌전이 in vivo radiation model을 이용한 방사선 저항성 관련 유전자 검색 ... 90
• 1. 유방암 세포주에서의 암줄기세포 표지자 발현 패턴 분석 ... 90
• 2. 유방암 뇌전이 암줄기세포 충만화 세포주(MDA-MB-435 Br4)의 microarray – Notch pathway ... 92
• 3. 유방암 뇌전이 in vivo radiation model을 이용하여 확립한 방사선 저항 유방암 뇌전이 세포의 microarray ... 95
• 2절. 유방암 뇌전이 암줄기세포 충만화 세포주와 유방암 뇌전이 in vivo radiation model을 통해 발굴된 Notch와 c-MET의 방사선 저항성 기능 분석 ... 102
• 1. 유방암 뇌전이 암줄기세포 충만화 세포주를 통해 발굴된 유전자인 Notch의 기능 분석 ... 102
• 2. 유방암 암줄기 충만화 세포주/유방암 뇌전이 환자유래 세포의 방사선 내성도 조사 및 방사선 내성 세포주 확립 ... 105
• 3. 유방암 암세포에서 방사선 치료 내성 관련 c-MET pathway 기능 규명 ... 108
• 4. 유방암 뇌전이 암세포에서 방사선 치료 내성 관련 c-MET pathway 발굴 및 그 기능 규명 ... 112
• Part III 교모세포종 및 유방암 방사선 내성 관련 연구에 의해 발굴된 표적인자들의 임상적 의의 검증 ... 116
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 118
• 1. 연구개발목표의 달성도 ... 118
• 2. 관련분야 기술발전에의 기여도 ... 120
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 121
• 1. 연구 개발 결과의 활용 방안 ... 121
• 2. 기대성과 ... 122
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 124
• 제7장 연구시설·장비 현황 ... 125
• 제8장 참고문헌 ... 126
• 자체평가의견서 ... 128
• 방사선기술개발사업 (방사선의학기술개발 분야) 연구계획대비 수행점검 보고서 ... 133
• 첨부-연구마루 연구성과 다운로드 ... 143
• 수정 • 보완요구사항 반영 내역 ... 163