초록 ▼

● 본 연구의 최종 목표는 “유전체 수준(genome-wide level)에서 생체내 조건(in vivo) 단백질 상호작용을 분석할 수 있는 플랫폼의 개발 및 응용”으로서, 이 목표를 달성하기 위해 연차별로 다음과 같은 연구결과를 얻음
❏ 1차년도(2008): 유전체 수준에서 생체내 조건 단백질 상호작용을 관측할 수 있는 이분자 형광 상보 분석용 VN 부착 효모 라이브러리를 개발함
❏ 2차년도(2009): 이분자 형광 상보 분석용 VN 부착 효모 라이브러리를 이용하여 Ras2 단백질 상호 작용 네트워크를 분석함
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● 본 연구의 최종 목표는 “유전체 수준(genome-wide level)에서 생체내 조건(in vivo) 단백질 상호작용을 분석할 수 있는 플랫폼의 개발 및 응용”으로서, 이 목표를 달성하기 위해 연차별로 다음과 같은 연구결과를 얻음
❏ 1차년도(2008): 유전체 수준에서 생체내 조건 단백질 상호작용을 관측할 수 있는 이분자 형광 상보 분석용 VN 부착 효모 라이브러리를 개발함
❏ 2차년도(2009): 이분자 형광 상보 분석용 VN 부착 효모 라이브러리를 이용하여 Ras2 단백질 상호 작용 네트워크를 분석함
❏ 3차년도(2010): 이분자 형광 상보 분석용 VN 부착 효모 라이브러리를 이용하여 TOR kinase 단백질 상호작용 네트워크를 분석함
❏ 4차년도(2011): 이분자 형광 상보 분석을 위한 human GPCR-아데노바이러스 라이브러리를 구축하고 GPCR들 간 단백질 상호작용 네트워크를 분석함

Abstract ▼

Title
Development of platform for analysis of protein-protein interactions using live cell imaging

Purpose
● Development of genome-wide research resource for monitoring protein-protein interaction in living yeast cells
● Global analysis of Ras2 protein interaction network
● Global

Title
Development of platform for analysis of protein-protein interactions using live cell imaging

Purpose
● Development of genome-wide research resource for monitoring protein-protein interaction in living yeast cells
● Global analysis of Ras2 protein interaction network
● Global analysis of TOR kinase interaction network
● Analysis of protein interaction network of human GPCRs

Key Ideas
● As almost every cellular process is mediated by networks of protein–protein interactions, identification of these interactions is crucial for understanding the cellular functions of proteins.
● The bimolecular fluorescence complementation (BiFC) assay is based on the formation of a fluorescent complex by fragments of yellow fluorescent protein, brought together by association of two interacting partners fused to the fragments.
● The BiFC assay enables visualization of the subcellular localizations of specific protein complexes in the normal cellular environment.
● Due to the advantages of clear visualization of in vivo protein–protein interactions and direct readout measurable with simple equipment, the BiFC technique has been used to identify and visualize protein–protein interactions in a widerange of species including animals, plants, yeasts and filamentous fungi.
● This study aims to develop the BiFC assay-based platform to analyze protein-protein interactions in living cells, which will provide dynamic features of protein-protein interactions.

Methods & Research Content
● Construction of yeast VN (N-terminal fragment of Venus) fusion library for BiFC assay
● Global analysis of Ras2 protein interaction network using VN fusion libarary
● Global analysis of TOR kinase interaction network using VN fusion library
● Construction of human GPCR-VN fusion library for BiFC assay
● Investigation of protein interaction network of human GPCRs

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 6
• CONTENTS ... 7
• 목차 ... 8
• 제1장 연구개발 과제의 개요 ... 9
• 1. 연구개발의 과학기술, 사회경제적 중요성 ... 9
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 11
• 1. 지금까지의 연구개발 실적 ... 11
• 2. 현기술상태의 취약성 ... 12
• 3. 앞으로의 전망 ... 14
• 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 15
• 1. 1차년도 ... 15
• 2. 2차년도 ... 17
• 3. 3차년도 ... 22
• 4. 4차년도 ... 28
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 33
• 1. 연구개발목표의 달성도 ... 33
• 2. 관련분야에의 기여도 ... 34
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 36
• 1. 추가연구의 필요성 및 다른 연구에의 응용 ... 36
• 2. 기업화 추진 방안 ... 37
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 38
• 1. 관련 연구의 해외과학기술정보 ... 38
• 제7장 연구시설ㆍ장비 현황 ... 41
• 제8장 참고문헌 ... 42