초록 ▼

결핵연구자원 다양화 및 자원관리 매뉴얼 개발을 목적으로 시작된 본 사업의 계획서
내용에 따른 결과는 다음과 같다.
(1) 국내 분리 결핵균 및 임상검체 확보 및 분양, 품질경영 : 2011년 신규자원으로 결핵 및 NTM 균주를 709주, 임상검체는 375 vial 확보 하였으며, 7주의 결핵균 항원 발현 대장균을 확보하여 자원의 다양화를 이루었다. 자원의 표준화를 위해 항결핵약제 내성관련 유전자 분석하고, NTM 균주의 16SrRNA, hsp65, ropB, ITS 유전자 분석으로 균종 검증을 하였다. NTM 유전자 분

결핵연구자원 다양화 및 자원관리 매뉴얼 개발을 목적으로 시작된 본 사업의 계획서
내용에 따른 결과는 다음과 같다.
(1) 국내 분리 결핵균 및 임상검체 확보 및 분양, 품질경영 : 2011년 신규자원으로 결핵 및 NTM 균주를 709주, 임상검체는 375 vial 확보 하였으며, 7주의 결핵균 항원 발현 대장균을 확보하여 자원의 다양화를 이루었다. 자원의 표준화를 위해 항결핵약제 내성관련 유전자 분석하고, NTM 균주의 16SrRNA, hsp65, ropB, ITS 유전자 분석으로 균종 검증을 하였다. NTM 유전자 분석으로 5종이 우리나라에서 새롭게 분류되어 총 41종의 임상분리 균종을 확보할 수 있었다.
결핵자원센터는 2011년 총 534주의 자원을 분양하였다. 특히 활성화 상태의 병원성 자원을 취급하기 어려운 연구기관에 DNA를 분양하여 자원은행의 역할을 확대하였다. ISO9001 품질경영시스템의 제3차 사후 심사에서 규정을 준수하여 운영이 되고 있음이 확인 되었다.
(2) 결핵연구자원국가협력은행 자문위원회 운영 : 사업의 효율적인 수행과 다양한 의견을 도출하기 위해 전문가를 중심으로 자문위원회를 조직했고, 1회의 자문회의를 실시하였다.
자문회의는 검체은행 운영 매뉴얼 수립에 관해 전반적인 논의가 이뤄졌고, 의견을 종합하여 반영하였다.
(3) 결핵연구자원 관리 매뉴얼 작성 : 표준화 균주는 생존율, 순도 및 동정 시험을 포함한 정기적인 품질검사를 통해 자원가치를 확인하고, 품질확인시험서를 기록, 보관하였다. 또한 자원을 생존과 분양이 가능한 앰플 및 바이알 수를 파악하기 위해 바코드화 하였다. 결핵자원 정보 개발 : 결핵협회 부속의원과 네트워크를 통해 필수 정보 항목 이외 폐결핵 유무, 치료현황, 합병증, 결핵 복약력, X-ray 판독 결과 등의 임상정보를 수집하고, NTM의 항생제 감수성 결과와 생화학 테스트 결과를 추가 하였다. 결핵연구자원 보존방법 확립 : 표준화 균주는 skim milk, glycerol 에 8 vial씩 -80℃에 보관하고, 병원성에 따라 동결건조 보존을 적용할 수 있도록 한다.
결핵연구자원 국가협력은행으로서 다양한 특성을 가진 결핵균주들 및 비결핵항산균들를 중심으로 한 운영에서 결핵연구자원의 다양화를 목적으로 인체유래 검체로서 혈청검체와 객담검체들을 수집 보관 할 과정에 대한 매뉴얼을 추가로 마련하였다. 검체는 전처리 후 객담 300ul, 혈청 300 ul 씩 분주 하여 –80℃ 보관한다.
(4) 표준화된 결핵연구자원 관리 매뉴얼 및 병원체 자원의 국가병원체 자원은행에 제공: 국자병원체자원은행과 논의하여 표준화 균주를 선정하고, 균주에 대한 정보를 기탁한다.

Abstract ▼

This project which initiated for the purpose of collection of diverse resource for the TB research and Establishment of manual for the Resource Storage. The results were as follows: 1. as new resources, 709 mycobacterium strains, and 375 clinical specimens, 7 E. coli containing M. tuberculosis speci

This project which initiated for the purpose of collection of diverse resource for the TB research and Establishment of manual for the Resource Storage. The results were as follows: 1. as new resources, 709 mycobacterium strains, and 375 clinical specimens, 7 E. coli containing M. tuberculosis specific antigen. We obtained informations such as drug resistance and gene sequences for the standardization of existing important resources. In particular, new species were additionally obtained in comparison to 2010. Clinical isolates of a total of 41 species were secured in KMRC. Newly separated and rare species were confirmed with hsp65, 16S rRNA, ropB and ITS gene sequences. A total of 534 strains were distributed for the research of various institute. It was confirmed in the inspection of ISO9001 Quality Management System that KMRC was well operated in compliance with the regulations.
2. Advisory Committee for the KMRC: in order to collect various opinions, the Advisory Committee including experts was organized and held advisory councils once. Comprehensive discussions on establishment of a specimen biobank manual were held and opinions were put together to be reflected.
3. Establishment of manual for the Resource Storage : the standardized strains have undergone regular quality test including survival rate, purity and identification test to check the value of the resource, and the informations were recorded and stored. Moreover, the resources were managed for the remains after distribution by bar-coding system. Through the network of KNTA clinics, the clinical information such as tuberculosis infection, treatment, the result of x-ray, the results of drug susceptibility test etc were collected. Standardized strains were stored at - 80°C in 8 vials each in skim milk and glycerol. Manual for the clinical specimen (specimen bank) were established. After pre-treatment, sputum and serum divide them in 200 ul respectively and store them at –80°C.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 학술연구용역사업 최종결과보고서 ... 3
• 목차 ... 4
• Ⅰ. 연구개발결과 요약문 ... 5
• (한글)최종결과보고서 요약문 ... 5
• (영문)Summary ... 6
• Ⅱ. 학술연구용역사업 연구결과 ... 7
• 제1장 최종 연구개발 목표 ... 7
• 1.1 목표 ... 7
• 1.2 목표달성도 및 관련분야에 대한 기여도 ... 15
• 1.3 국내·외 기술개발 현황 ... 16
• 제2장 최종 연구개발 내용 및 방법 ... 22
• 제3장 최종 연구개발 결과 ... 28
• 제4장 연구결과 고찰 및 결론 ... 141
• 제5장 연구성과 및 활용계획 ... 143
• 5.1 활용성과 ... 143
• 5.2 활용계획 ... 144
• 제6장 기타 중요변경사항 ... 145
• 제7장 연구비 사용 내역 ... 146
• 제8장 참고문헌 ... 147
• 제9장 첨부서류 ... 148