초록 ▼

쯔쯔가무시 백신은 세계최초의 신약이며 쯔쯔가무시 백신의 개발은 현재 가을철 열성질병의 대표적인 쯔쯔가무시증의 급속한 발생에 대한 가장 효과적인 통제 수단이다. 쯔쯔가무시증은 제3종 법정전염병으로 1993년에 지정되고, 국가적으로 질환 통제, 관리가 되고 있지만 야외의 여가 활동 인구 증가 및 선도시의 확대 등으로 인하여 노동력 손실과 이에 따른 경제적 손실도 상당하였다. 쯔쯔가무시증을 예방하기 위한 백신 개발의 시도는 오래 전부터 있었는데, 인체에 적용할 수준의 상업적인 백신의 개발은 현재까지 전무한 형편이다. 본 과제는 사람이 사

쯔쯔가무시 백신은 세계최초의 신약이며 쯔쯔가무시 백신의 개발은 현재 가을철 열성질병의 대표적인 쯔쯔가무시증의 급속한 발생에 대한 가장 효과적인 통제 수단이다. 쯔쯔가무시증은 제3종 법정전염병으로 1993년에 지정되고, 국가적으로 질환 통제, 관리가 되고 있지만 야외의 여가 활동 인구 증가 및 선도시의 확대 등으로 인하여 노동력 손실과 이에 따른 경제적 손실도 상당하였다. 쯔쯔가무시증을 예방하기 위한 백신 개발의 시도는 오래 전부터 있었는데, 인체에 적용할 수준의 상업적인 백신의 개발은 현재까지 전무한 형편이다. 본 과제는 사람이 사용할 수 있는 효과적인 쯔쯔가무시증 사멸화 예방 백신을 개발하며 그 제품화를 목적으로 하며 다음과 같은 연구를 수행하였다.
본 과제에서는 수년간의 선행연구를 통하여 수정난 배양에 적용된 균주를 선별하였으며 각종 검정을 통해 관라하고 었다. 이러한 검정된 균주로 수정란을 이용한 대량 배양 방법을 확보 및 최적화하고 항원성이 손실되지 않은 정제방법으로 쯔쯔가무시균을 확보하였다. 확보된 쯔쯔가무시균은 포르말린으로 불활화과정을 거쳐 각 공정단계별의 검사 (성상, 불활화시험, pH측정, 포르말린 함량, 난 알부민 함량, 당 함량, 무균 시험, 이상독성부정 시험, 엔도톡신 시험, 단백질 함량 시험, 항원가 시험)를 거쳐 최종 백신 원액으로 사용하여 세계최초의 쯔쯔가무시증 백신으로 개발하였다. 백신의 유효성은 백신 투여후 면역 항체 형성 및 추이로 확인하였으며 동물 모델에서 쯔쯔가무시 생균 접종에 대한 방어 시험으로 확인하였다. 동종 균주(Karp, Gilliam) 뿐만 아니라 이종의 혈청형(Boryong)균주에도 교차 반응을 보이며 성공적인 방어를 확인하였으며, 그 방어 정도는 생쥐의 균주의 50% 치사량을 비 접종군보다 3,000배에서 10,000배정도를 증가시킨 것으로 확인하였다. 실시된 각종 독성 및 안전성(단회투여, 반복투여, 유전독성 항원성, 국소독성, 일반약리)시험에서 어떠한 비정상적 임상소견도 보고된 바 없다. 또한 분병된 백신제품의 안전성시험을 실시한 결과 ${2^{\circ}C}$~${8^{\circ}C}$ 냉장보관상태에서 24개월 동안 유효한 역가를 유지하는 것으로 확인되었다. 이상과 같은 결과 및 자료로 임상 시험 허가를 위한 자료를 작성하고 임상시험 계획서를 작성 검토하였으며 제품화를 위한 제조 준비를 하여 당면된 임상 시험을 준비를 완료하였다.

Abstract ▼

Scrub typhus is an acute feblile illness caused by Orientia tsutsugamushi (former name; Rickettsia tsutsugamushi), an obligate intracellular bacterium, which belongs to the Rickettsiaceae. This disease is endemic in Asia-Pacific regions and it can be assumed that not less than billions of people are

Scrub typhus is an acute feblile illness caused by Orientia tsutsugamushi (former name; Rickettsia tsutsugamushi), an obligate intracellular bacterium, which belongs to the Rickettsiaceae. This disease is endemic in Asia-Pacific regions and it can be assumed that not less than billions of people are exposed to the disease. An effective vaccine against O. tsutsugamushi is more desirable for the control of scrub typhus. There have been efforts to elucidate immunological mechanism for the prevention of the pathogen and to develop vaccine candidates for scrub typhus. But no vaccine for humans is available at present. Considering the complexity of the antigenicity among serotypes of O. tsutsugamushi and difficulty of identifying specific molecules with protective activity, we designed and inactivated whole cell vaccine formulation with mixture of different serotypes. Although animal cell culture method and embryonated chicken egg culture method have been widely used to obtain O. tsutsugamushi cells, both methods have some limitation in producing the sufficient amount of cells required for conm1ercial vaccine development. To overcome the limitation, we improved the infectivity by series of subcultivation for several years of the original O. tsutsugamushi strain in the embryonated egg.
We established a mass culture process using embryonated chicken egg culture of the adapted strain with high infectivity and strong immunogenicity. A manufacturing process including purification of bacteria from the yolk sac membrane, inactivation of the purified antigens was established. Efficacy of the vaccine was confirmed by protection study in which mice were immunized with the vaccine and then challenged with live O. tsutsugamushi strains. Preclinical toxicity test and stability test of the vaccine were completed. The safety and immunogenecity of the Tsutsugamushi vaccine candidate in human needs now to be evaluated in clinical trials.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 목차 ... 4
• 연구개발사업 최종보고서 요약문 ... 6
• Project Summery ... 7
• 총괄연구개발과제 연구결과 ... 8
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 8
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 12
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 15
• 4. 총괄연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 16
• 5. 총괄연구개발과제의 활용계획 ... 18
• 6. 첨부서류 ... 18
• 제1세부연구개발과제 연구결과 ... 19
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 20
• 2. 제1세부연구개발과제의 최종 연구대상 및 방법 ... 20
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 24
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 30
• 5. 제1세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 31
• 6. 제1세부연구개발과제의 활용계획 ... 32
• 7. 참고문헌 ... 32
• 제2세부연구개발과제 연구결과 ... 33
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 34
• 2. 제1세부연구개발과제의 최종 연구대상 및 방법 ... 35
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 36
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 49
• 5. 제1세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 50
• 6. 제1세부연구개발과제의 활용계획 ... 51
• 7. 참고문헌 ... 51