초록 ▼

ㅁ 겐타마이신의 기기분석법(HPLC-ELSD)의 확립
확립 HPLC 기기분석 최적조건: (1) column; Atlantis C18(3.9150 mm,

ㅁ 겐타마이신의 기기분석법(HPLC-ELSD)의 확립
확립 HPLC 기기분석 최적조건: (1) column; Atlantis C18(3.9150 mm, ) (2)이동상; 2% TFA : MeOH = 98 : 2 (v/v) (3) 유속; 0.8ml/min (4) 시료주입량; 10ul
확립 ELSD 최적조건: (1) Drift tube temp.; (2) gas pressure; 30psi
ㅁ 확립된 기기분석법의 정확성, 정밀성, 직선성 등 조사
System suitability 수치가 K'>2, Resolution > 2, Symmetry factor<2, Plate count>2000으로 국제적 기준 (ICH-guideline)에 적합함.
Validation을 측정한 결과, accuracy=100%, intra-assay<1, inter-assay<2, r 값이 0.9999이상으로 국제적 기준 (ICH-guideline)에 적합함.
ㅁ 확립된 기기분석법과 기존 미생물학적 분석법간의 상관성 검증
5개 농도의 표준용액, 4개 원료에 대한 두가지 분석법간에는 유의한 차가 없었으며 양호한 상관성이 인정되었음(p>0.33)
다양한 시판 동물용 겐타마이신제제에 대해 두 방법간의 상관성 검증결과 단일제제에서는 주사제와 산제 모두 양호함(p>0.07)
ㅁ 개선된 기기분석법의 실험실간 비교시험
겐타마이신제제에 대한 3개 실험실간 재현성 값은 0.86~1.90%로 높은 정밀성을 보였음

Abstract ▼

As gentamicin lacks a suitable chromophore, which is necessary for UV detection, so it was difficult to quantitate five components, gentamicin C1a, C2, C2a, C2b and C1. For quantification of gentamicin components, a simple and versatile high-performance liquid chromatography with evaporative light s

As gentamicin lacks a suitable chromophore, which is necessary for UV detection, so it was difficult to quantitate five components, gentamicin C1a, C2, C2a, C2b and C1. For quantification of gentamicin components, a simple and versatile high-performance liquid chromatography with evaporative light scattering detection(HPLC-ELSD) method was developed on an Atlantis C18 (3.9150mm, ) column using a mobile phase consisting of 25.4mM trifluoroacetic acid in water-methanol(98:2, v/v) at a flow rate 0.8ml/min. Parameters of ELS detector were for drift tube temperature and 30psi for pressure of nitrogen gas in the impactor off-mode. Five gentamicin C components(C1a, C2, C2a, C2b and C1) were eluted at 4.5, 6.4, 7.1, 8.2 and 10.3 minute, respectively with good resolution(Rs>2.23). In range of 0.4~0.6 of total gentamicin, good linearity(r>0.999) was obtained. Repeatability relative standard deviation (%RSD) and intermediate precision relative standard deviation(%RSD) were less than 1% and 2 %, respectively. Recovery of analytes in spiked pharmaceutical samples was 98.6~102.8 % by logarithmic calibration curve. We compared this HPLC-ELSD method with microbiological assay(cylinder-plate assay) which is the official method for the assay of gentamicin in pharmaceuticals. Two methods did not show any significant difference(p>0.05) and had good correlationship(r=0.9987) in five concentration of standard solution. In four raw materials and four commercial drugs, both of assays have no difference(p>0.05). In conclusion, the new HPLC/ELSD method can be alternatives to microbiological assay for determination of gentamicin in veterinary pharmaceutical drugs.

목차 Contents

• 수의과학기술개발연구사업 연구과제 최종보고서 ... 1
• I. 연구배경 및 목표 ... 3
• II. 재료 및 방법 ... 4
• 1. 표준품 및 시약 ... 4
• 2. 표준용액 및 시료의 조제 ... 5
• 3. 분석기기 ... 5
• 4. 최적기기분석 조건 확립 ... 5
• 5. 개선된 기기분석법과 미생물학적 분석법의 상관성 조사 ... 5
• 6. 실험실간 비교실험 ... 5
• III. 연구결과 ... 5
• 1. 최적 기기분석조건 확립 ... 5
• 2. 확립된 기기분석법의 유효성 검증(Validation of developed HPLC/ELSD method) ... 7
• 3. 미생물학적 분석법의 상관성 조사 (Comparison of HPLC/ELSD and microbiological method) ... 9
• 4. 실험실간 비교실험(Collaborative study on HPLC method) ... 11
• IV. 고찰 ... 12
• V. 결론 ... 13
• VI. 참고문헌 ... 13
• VII. 연구결과 활용 ... 14
• 1. 정책반영 1건: ... 14
• 2. 기술전수(학회발표): 2건 ... 15
• VIII. 영문초록 ... 16