초록 ▼

연구목표
● 허혈성 뇌졸중에서 PI3K 활성제 투여를 통한 뇌손상 억제 효과 확인.
● 현재 임상에서 사용되고 있는 약제들 중 PI3K 활성효과가 있을 것으로 예상되는 약제들의 PI3K 활성효과를 규명.
● PI3K 활성효과가 확인된 약제들의 허혈성 뇌손상 억제 효과를 확인.
● PI3K 활성제 혹은 활성효과를 갖는 약제들의 허혈성 뇌손상에 대한 보호효과 확인을 통하여 현재까지 뚜렷한 치료법이 없는 뇌졸중 환자들에게 도움이 될 수 있는 새로운 치료법 개발을 위한 근거 제시.
연구내용
● 허혈성 뇌졸중

연구목표
● 허혈성 뇌졸중에서 PI3K 활성제 투여를 통한 뇌손상 억제 효과 확인.
● 현재 임상에서 사용되고 있는 약제들 중 PI3K 활성효과가 있을 것으로 예상되는 약제들의 PI3K 활성효과를 규명.
● PI3K 활성효과가 확인된 약제들의 허혈성 뇌손상 억제 효과를 확인.
● PI3K 활성제 혹은 활성효과를 갖는 약제들의 허혈성 뇌손상에 대한 보호효과 확인을 통하여 현재까지 뚜렷한 치료법이 없는 뇌졸중 환자들에게 도움이 될 수 있는 새로운 치료법 개발을 위한 근거 제시.
연구내용
● 허혈성 뇌졸중 동물모델을 이용한 in vivo study (1, 2년차 연구)
- 대조군과 PI3K 활성제 혹은 활성효과를 갖는 약제 투여군에서
ㆍ 뇌경색 부피 측정 - TTC stain, Brain MRI 등
ㆍ 뇌부종 측정 - Water content 측정
ㆍ 신경세포 사멸 변화 측정 - TUNEL staining, Cresyl violet staining
ㆍ 세포 내 인자들의 변화 측정 - IHC, Western blotting, EMSA
ㆍ 염증세포 침윤 변화 측정 - MPO activity
ㆍ 신경학적 증상의 개선 정도 측정
- forelimb placement
- forelimb use asymmetry
- corner turn tests
● 산화성 손상을 받은 신경세포를 이용한 in vitro study (1년차 연구)
ㆍ PC12세포의 신경세포 분화유도
ㆍ 신경세포에 산화성 손상을 가함
ㆍ PI3K 활성효과가 있을 것으로 예상되는 약제들을 처리함.
ㆍ 세포생존도 측정 - CCK-8, MTT, trypan blue staining
ㆍ Apoptosis에 대한 영향 평가 - DAPI staining
ㆍ Free radical 측정
ㆍ Western blotting
ㆍ Immunocytochemistry
기대효과
(응용분야 및 활용범위 포함)
● PI3K 활성제를 투약함으로써 허혈성 뇌졸중에 의한 뇌손상 방지 효과가 확인되고 그 정확한 기전들을 제시할 경우 허혈성 뇌졸중의 새로운 치료법 개발을 위한 연구들을 유도할 수 있을 것임.
● 임상에서 사용중인 약제들 중에서 PI3K 활성효과를 확인하고 허혈성 뇌졸중에 대한 보호효과를 확인함으로써 PI3K 활성제 혹은 활성효과를 갖는 물질들을 개발하기 위한 연구들이 활발히 진행될 수 있을 것임.
● 수많은 허혈성 뇌졸중 환자들이 있음을 고려할 때, PI3K 활성제 혹은 활성효과를 갖는 물질들을 뇌경색 환자들에게 투여함으로써 치료효과를 높일 수 있다면 이는 허혈성 뇌졸중의 새로운 치료법으로써 국내외적으로 막대한 고부가가치를 창출할 수 있을 것임.
● 본 연구의 성공적 수행을 위해서는 다양한 분자생물학적 기법들에 대한 첨단 기초과학적 지식들이 요구되는 바 참여 연구원들의 새로운 지식의 습득 및 허혈성 뇌졸중의 새로운 치료법 개발에 참여할 수 있는 인력양성에 기여할 것임.

Abstract ▼

Purpose
● Confirmation of protective effect of a PI3K activator against ischemic brain injury.
● Investigation of PI3K-activating effect of drugs, which are clinically used and expected to have an effect of PI3K-activating.
● Confirmation of protective effect of drugs with PI3K-activating e

Purpose
● Confirmation of protective effect of a PI3K activator against ischemic brain injury.
● Investigation of PI3K-activating effect of drugs, which are clinically used and expected to have an effect of PI3K-activating.
● Confirmation of protective effect of drugs with PI3K-activating effect against ischemic brain injury.
● Suggestion of a basis for the development of new therapeutic strategy for ischemic stroke by confirming the protective effect of a PI3K activator and drugs with PI3K-activating effect against ischemic stroke.
Contents
● In vivo study using ischemic stroke rat models (for 1st and 2nd years)
- In control and experimental groups
ㆍ Evaluation of infarct volume - TTC staining, Brain MRI, etc.
ㆍ Assessment of brain edema - measurement of water contents.
ㆍ Analysis of neuronal cell death - TUNEL staining, Cresyl violet staining.
ㆍ Measurement of intracellular signaling proteins - IHC, Western blotting, EMSA.
ㆍ Evaluation of inflammation - MPO activity
ㆍ Assessment of neurological functions
- forelimb placement
- forelimb use asymmetry
- corner turn tests
● In vitro study using neuronally differentiated PC12 cells injured by oxidative stress (for 1 st year)
ㆍ Induction of neuronal differentiation of PC12 cells
ㆍ Infliction of oxidative stress on neuronal cells
ㆍ Treatment with drugs which are which are clinically used and expected to have an effect of PI3K-activating
ㆍ Evaluation of cell viability - CCK-8, MTT, trypan blue stating
ㆍ Analysis of effect of drugs on apoptosis - DAPI staining
ㆍ Measurement of free radical
ㆍ Western blotting
ㆍ Immunocytochemistry
Expected Contribution
(응용분야 및 활용범위 포함)
● Induction of further studies for the development of new therapeutic strategy for ischemic stroke by presenting that PI3K activator can prevent ischemic brain damage.
● Contribution to the development of new PI3K activatot or new drugs with PI3K-activating effect for the treatment of ischemic stroke.
● Creation of lots of economic profit by developing new therapeutic strategy for ischemic stroke using new PI3K activators or drugs with PI3K-activating effect.
● Contribution to training of researchers and students because this study needs far advanced molecular biological techniques and well skilled in vivo techniques.

목차 Contents

• (2010)년도 일반연구자지원사업 결 과 보 고 서 ... 1
• 차 례 ... 2
• I. 연구목적 및 방법 ... 3
• 1. 당초 연구의 목적, 필요성 및 연구목표 ... 3
• 2. 당초 연구 내용, 범위 및 방법 ... 10
• II. 연구수행 내용 및 결과 ... 14
• III. 연구결과의 활용계획 ... 25
• 1. 연구결과 활용계획 ... 25
• 2. 연구성과 ... 25
• IV. 참고문헌 ... 26
• 한글요약문 ... 29
• SUMMARY ... 30