보고서 정보
주관연구기관 |
경북대학교 산학협력단 |
연구책임자 |
조제열
|
참여연구자 |
김지영
,
윤연희
,
이지현
,
채영미
,
최영진
,
김근호
,
강성민
,
박혜정
,
허선희
,
김주현
,
이재목
,
김태수
,
신동석
,
정미화
,
정현엽
,
이선호
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2011-04 |
과제시작연도 |
2010 |
주관부처 |
보건복지부 |
사업 관리 기관 |
한국보건산업진흥원 Korea Health Industry Development Institute |
등록번호 |
TRKO201300028481 |
과제고유번호 |
1355061225 |
사업명 |
보건의료기술연구개발 |
DB 구축일자 |
2013-09-14
|
키워드 |
치주질환.치주염.치은염.프로테오믹스.진단키트.Periodontal disease.Periodontitis.Gingivitis.Proteomics.Diagnostic Kit.
|
초록
▼
I. 치은열구액의 proteome 분석기법 정립과 분석결과로부터 치주염 후보바이오 마커의 선정, 검증
1. 정상, 초기, 중기, 후기의 GCF 각 100여개씩 총 400여개의 GCF를 수집: 정상 114명, 경도 71명, 중도 119명, 심도 62명의 환자로부터 총 366개의 샘플을 얻음.
2. 제 1세부에서는 수집된 GCF를 이용한 proteom 분석 기법 정립
- 수집된 치은열구액으로부터 단백질체를 분리 분석하기 위한 최적을 조건 정립
1. 단백질체의 분석을 위한 치은열구액 sampling
2. LC-
I. 치은열구액의 proteome 분석기법 정립과 분석결과로부터 치주염 후보바이오 마커의 선정, 검증
1. 정상, 초기, 중기, 후기의 GCF 각 100여개씩 총 400여개의 GCF를 수집: 정상 114명, 경도 71명, 중도 119명, 심도 62명의 환자로부터 총 366개의 샘플을 얻음.
2. 제 1세부에서는 수집된 GCF를 이용한 proteom 분석 기법 정립
- 수집된 치은열구액으로부터 단백질체를 분리 분석하기 위한 최적을 조건 정립
1. 단백질체의 분석을 위한 치은열구액 sampling
2. LC-MS/MS를 이용한 GCF 단백질체 분리를 위한 조건 정립
- 치은열구액으로부터 치주염 특이적인 단백질 또는 펩타이드의 선정
1.. 동정된 단백질체로부터 치주염에서 특이적으로 발현되는 단백질 분류
a. 두 번의 pooling samples를 이용하여 duplicate로 LC-MS/MS에서 분석된 protien profile을 분석함. 전체적으로 발견된 protein의 수는 115개가 확인됨. 정상인에 대해 치주염환자에서 1.5 fold 이상 발현의 증가가 있는 단백질은 39개 이며, 0.6 fold 이하인 protein들은 31개 임.
b. 치주염 환자의 GCF에서 높은 발현을 보인 단백질 중 fibronectin, MMP9 그리고 S100A8과 같은 단백질은 inflammation response에 관여하는 것으로 알려진 것으로 본 실험 결과가 신뢰성을 가진다고 사료됨.
II. 치은열구액으로부터 치주염 특이적인 선정된 딘백질의 검증
A. Azurocidin : 50 pg/ml롤 cutoff한 결과 특이도 74.2%와 민감도는 치은염 환자 66.7%, 중기 치주염 환자 76.3%, 말기 치주염 환자 60.0%로 나타났음.
B. Plastin-2 (LCP) 정상인에 비해 치주염을 가진 환자군에서 plastin -2의 발현이 높음을 확인 함.
C. TACE : 평균적으로 정상인에 비해 치은염과 중기, 말기의 치주염 환자의 치은열구액에서 더 많은 TACE 의 발현이 확임됨.
D. 8100A2 평균적으로 정상인에 비해 치은염과 중기의 치주염 환자의 치은열구액에서 더 많은 8100A2 의 발현이 확임됨
III. 치주조직을 이용하여 염증반응 관련한 enzyme과 cytokine등의 발현을 screening
A. Enzyme : CRP, TIMP-2, MT-MMP-2와 Catheptin D
B. Oxide materials : MDA, SOD, GPx , GSR
C. 염증성 인자 : IL-4, IL-10, IFN-gamma, S100A2 , S100A8, S100A9, Azurocidin
D. 골흡수 인자 : M-CSF, TACE
IV. 치은, 치주염 관련 인자들의 메커니즘 연구
A. Azurocidin : azurocidin의 발현이 높은 초기 치주염 과정에는 파골세포의 가능을 저해해서 뼈의 파괴를 막을 것으로 생각됨.
B. TACE : TACE가 사이토카인의 활성화를 촉진시킴으로 인해서 RANKL의 발현이 증가함을 알 수 있었음.
C. S100A2 : Jurkat cell에서 LPS 처리에 따른 S100A2 의 mRNA와 S100A2의 단백질 발현과 분비된 S100A2는 LPS 농도 의존적으로 증가함.
Abstract
▼
1. GCF sample collection: Normal-228, Gingivitis-336, Moderate periodontitis-497, Severe periodontitis 254 (total 1315)
2. Set up condition of GCF proteome analysis using LC-MS/MS
3. Verification of candidated periodontitis specific biomarkers : Azurocidin, Plastin-2 (LCP), TACE, S100A2
4.
1. GCF sample collection: Normal-228, Gingivitis-336, Moderate periodontitis-497, Severe periodontitis 254 (total 1315)
2. Set up condition of GCF proteome analysis using LC-MS/MS
3. Verification of candidated periodontitis specific biomarkers : Azurocidin, Plastin-2 (LCP), TACE, S100A2
4. Screening of expression of immune response factors and cytokines on gingival tissue : SOD, GPx, MDA, GSR, CRP, M-CSF, TIMP-2, MT-MMP-2, IL-4, IFN-gamma, Catheptin D, TACE, Azurocidin, S100A2 , S100A8, S100A9
5. Mechanism study of Gingivitis and periodontitis related factors : Azurocidin, TACE, S1 00A2
목차 Contents
- I. 총괄현황 ... 1
- 1. 표지 ... 2
- 2. 제출문 ... 4
- 3. 보고서 요약서 ... 5
- 4. 요약문 (한글) ... 6
- 5. 요약문 (영문) ... 7
- 6. 연구 성과 실적 및 향후 계획 ... 8
- 7. 참여연구원 현황표 ... 13
- II. 총괄연구과제 연구결과 ... 14
- 1. 연구개발과제의 배경 및 필요성 ... 15
- 2. 국내외 기술개발 현황 ... 18
- 3. 연구개발과제의 추진체계 ... 19
- 4.1 총괄연구개발과제 ... 20
- 4.2 제1세부연구개발과제 ... 85
- 4.3 제2세부연구개발과제 ... 104
- 5. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 125
- 6. 향후 연구성과 추진 계획 ... 127
- 7. 연구개발결과의 파급효과 ... 127
- 8. 연구개발결과의 활용계획 ... 128
- 9. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 129
- 10. 참고문헌 ... 129
- III. 제1세부 연구과제 연구결과 ... 130
- 1. 연구개발과제의 목표 ... 131
- 2. 연구개발과제의 추진체계 ... 133
- 3. 연구개발수행 내용 및 결과 ... 136
- 4. 참고문헌 ... 155
- IV. 제2세부 연구과제 연구결과 ... 157
- 1. 연구개발과제의 목표 ... 158
- 2. 연구개발과제의 추진체계 ... 159
- 3. 연구개발수행 내용 및 결과 ... 162
- 4. 참고문헌 ... 182
- 최종보고서 평가 면제요청서 (중개연구 논문성과 달성) ... 188
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