초록 ▼

○ 연구목표
- 병원성 NTM에 의해 숙주 세포에서 차별적으로 발현되는 바이오마커 타깃 후보인자들을 발굴하고자 한다.
- 병원성 NTM의 바이오마커를 선별하여 진단적 유용 가능성을 평가하고 이를 이용한 NTM 폐질환 진단법 개발 등에 활용하고자 한다.
○ 연구내용
<1차년도>
- 병원성 NTM 균주 선별
▷ 폐질환 환자로부터 분리된 병원성에 관련된 NTM 확보
▷ 건강인 분리균주 및 오염균으로 판단된 단순집락 형성 NTM 균주 확보
- 임상 분리 NTM의 병원성 비교 (1)
▷ 환자와

○ 연구목표
- 병원성 NTM에 의해 숙주 세포에서 차별적으로 발현되는 바이오마커 타깃 후보인자들을 발굴하고자 한다.
- 병원성 NTM의 바이오마커를 선별하여 진단적 유용 가능성을 평가하고 이를 이용한 NTM 폐질환 진단법 개발 등에 활용하고자 한다.
○ 연구내용
<1차년도>
- 병원성 NTM 균주 선별
▷ 폐질환 환자로부터 분리된 병원성에 관련된 NTM 확보
▷ 건강인 분리균주 및 오염균으로 판단된 단순집락 형성 NTM 균주 확보
- 임상 분리 NTM의 병원성 비교 (1)
▷ 환자와 건강인으로부터 분리된 NTM의 병원성 차이 비교
▷ 주 타깃 병원체 : M. avium, M. intracellulare (1차년도)
▷ Intracellular survival assay (ICS), proinflammatory cytokine expression 등
<2차년도>
- 임상 분리 NTM의 병원성 비교 (2)
▷ Morphotype에 의한 NTM의 병원성 차이 비교
▷ 주 타깃 병원체 : M. abscessus complex (2차년도)
▷ Intracellular survival assay (ICS), proinflammatory cytokine expression 등
- Human monocyte-derived macrophage (HMDM)를 이용한 감염 시스템 개발
- In vitro 에서 HMDM 감염을 통해 유발되는 inflammatory marker (cytokine, chemokine 및 receptor 등) 발굴 : PCR-array
<3차년도>
- Bone marrow-derived macrophage (BMDM)를 이용한 감염 시스템 개발
- Mouse (C57BL/6) 감염 모델을 이용한 NTM의 병원성 비교
- Macrophage 감염 모델을 이용한 병원성 관련 후보 인자의 발현 여부 확인
○ 기대성과 및 활용방안
- 병원성 NTM에 의한 감염의 진단 후보물질 개발로 NTM 폐질환의 정확한 진단법 개발 및 치료 가능
- NTM 감염증에 대한 약제 타깃 선별 및 신속한 치료법 타깃 제시 가능

목차 Contents

• 연구최종보고서 ... 1
• 내부연구과제 요약서 [총괄] ... 2
• 내부연구과제 연구결과 요약서 [총괄과제] ... 3
• 제1장 연구의 목적 및 필요성 ... 4
• 제1절 현 연구(기술)상태의 문제점 및 앞으로의 전망 ... 4
• 제2절. 연구의 필요성과 중요성 ... 6
• 제2장 연구의 연구목표 및 달성도, 대외기여도 ... 8
• 제3장 국내·외 기술개발 현황 ... 8
• 제1절. 수행하고자 하는 연구와 관련되는 국내·외 연구기술개발 현황 ... 8
• 제4장 연구의 내용 및 결과 ... 12
• 【임상분리 NTM 균주 확보 및 병원성 평가】 ... 12
• 1) 병원성 NTM 균주 선별 ... 12
• 2) HMDM & THP-1 감염 모델 구축 ... 13
• 3) 세포 감염용 균주 준비 ... 14
• 4) 세포내 생존율 검사 (Intracellular survival assay, ICS) ... 15
• 5) Cytotoxicity test ... 17
• 6) MAC 감염에 의한 HMDM의 cytokine 분비능 비교 ... 19
• 【 MAC 및 M. abscessus 표준균주의 동물 감염모델 구축 】 ... 22
• 1) NTM의 macrophage 감염에 대한 factor 발현 분석 ... 22
• 2) M. abscessus의 HMDM 감염 모델 구축 ... 24
• 3) 세포내 생존율 검사 (Intracellular survival assay, ICS) ... 25
• 4) M. abscessus 감염에 의한 HMDM의 cytokine 분비능 비교 ... 26
• 5) MAC complex 및 M. abscessus 마우스 macrophage 감염실험 ... 27
• 【마우스 C57BL/6 J를 이용한 NTM 감염 모델 구축】 ... 31
• 1) MAC complex 표준균주 마우스 감염 모델 구축 ... 31
• 2) 동물모델(mouse)을 이용한 NTM 임상분리균주의 병원성 확인 ... 31
• RNA extraction and Real time PCR ... 51
• 고찰 및 결론 ... 57
• 제5장 연구결과의 활용계획 ... 59
• 제6장 연구의 주요 연구 성과 및 계획 ... 60
• 제7장 기대성과 및 활용방안 ... 61
• 제8장 참고문헌 및 첨부문서 ... 61