초록 ▼

제주도의 다양한 넙치 양식장으로부터 넙치를 채집하여, VHSV, VNNV 및 MBV 등의 바이러스성 질병의 감염 실태를 nested RT-PCR 기법을 이용하여 조사하였으며, 검출된 국내의 해양 바이러스를 대상으로 유전적인 특성을 분석하였다. 2010년 3월부터 2013년 2월까지 국내의 양식장들로부터 넙치 176마리를 수집하여 바이러스에 의한 감염을 진단하였다. 전체 조사시료 중에서 검사대상으로 선정한 5종의 바이러스가 검출된 시료는 54마리로 30.7%의 검출률을 나타내었으며, VHSV가 35.2%, VNNV가 42.6%, MB

제주도의 다양한 넙치 양식장으로부터 넙치를 채집하여, VHSV, VNNV 및 MBV 등의 바이러스성 질병의 감염 실태를 nested RT-PCR 기법을 이용하여 조사하였으며, 검출된 국내의 해양 바이러스를 대상으로 유전적인 특성을 분석하였다. 2010년 3월부터 2013년 2월까지 국내의 양식장들로부터 넙치 176마리를 수집하여 바이러스에 의한 감염을 진단하였다. 전체 조사시료 중에서 검사대상으로 선정한 5종의 바이러스가 검출된 시료는 54마리로 30.7%의 검출률을 나타내었으며, VHSV가 35.2%, VNNV가 42.6%, MBV가 20.4%인 것으로 나타났다. 넙치의 경우, VHSV뿐만 아니라 VNNV의 발생빈도도 높게 나타나는 것을 확인하였다. VHSV가 검출된 넙치의 조직별 감염정도를 RT-PCR로 확인한 결과, kidney에서는 band가 나타났지만 조직에 따라 band 농도에 차이를 보이는 것으로 조사되었다. 또한, VHSV의 정량적 분석을 위해 real-time PCR을 실시하였고 그 결과는 농도가 약했던 band의 경우에도 상당히 높은 virus copy값을 가지는 것으로 확인되었다.
바이러스의 특정 유전자를 cloning한 후 염기서열을 분석하여 보고된 reference virus strains와의 비교를 통해 계통분류학적인 위치를 파악하였다. VHSV isolates 중 VHSV-J1 isolate의 N gene 염기서열을 분석한 결과, genogroup IV에 속하는 것으로 나타났으며, RT-PCR에서 검출된 다른 VHSV isolates의 염기서열도 모두 VHSV-J1 isolate와 마찬가지로 genogroup IV으로 확인되었다. 넙치에서 발생하는 다양한 바이러스에 대한 유전적 변이가 보고되고 있으며, 이러한 유전적 변이를 활용하여 각바이러스의 type을 세부적으로 진단하는 방법을 개발하고자, VHSV를 넙치에 공격시켜 바이러스의 병원성을 조사하였으며, VHSV에 감수성이 있는 cell line을 사용하여 in vivo에서의 결과와 비교, 분석하였다. 동일한 바이러스의 경우, in vivo와 in vitro에서의 유전적 차이를 확인할 수 없었다. 또한, 공격실험을 통해 바이러스에 감염된 넙치의 생리적 특성을 분석한 결과, 대조구에 비해 비특이적 면역반응의 지표 인자인 MPO activity가 높은 활성을 나타내어 바이러스의 감염에 반응을 나타냈으며, lysozyme activity는 감소하는 수치를 나타내었다.
조직병리학적 분석결과, 바이러스에 감염된 넙치의 비장, 간, 신장에서 특징적인 병변을 확인할 수 있었다. 간에서는 간의 공포변성이 관찰되었으며, 일부개체에서는 경미한 간세포의 위축소견이 관찰되었고, 괴사 및 일부 탈락이 관찰되었다. 비장에서는 협조직의 액화괴사가 관찰되었고 일부 결정화된 결석이 관찰되었다. 신장에서는 농포가 형성되었으며, 일부 탈락된 부위가 관찰되었다.
본 연구는 양식넙치의 주요 바이러스 질병인 VHSV에 대한 다양한 연구를 진행하였으며, 다른 바이러스에 대한 분석도 병행하였다. 바이러스 질병에 대한 해결책이 아직 명확하게 제시되지 않은 시점에서 이러한 data는 vaccine의 개발 및 구제대책을 위한 기초 자료로 유용하게 활용될 것이라 여겨진다.

목차 Contents

• 일반연구자지원사업 최종(결과)보고서 ... 1
• 목 차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내·외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 29
• 5. 연구결과의 활용 계획 ... 30
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 30
• Ⅲ. 연구성과 ... 31