초록 ▼

3. 연구결과
1) 종양세포에서 메틸레이션에 의한 ASC 발현억제 확인과 ASC 발현 유도
- 12개 종양세포주중에서 4개의 세포주만 ASC 발현이 관찰되어 많은 종양세포에서 높은 빈도로 ASC 발현이 억제되어 있음을 확인
- 상기 ASC 발현이 억제된 종양세포 중 염증반응과 밀접한 관련이 있는 대장암 세포인 DLD-1 을 대상으로 메틸레이션 억제제, ASC 유전자 도입을 통해 ASC 발현을 유도한 세포를 확립하였음
2) ASC 발현에 의한 종양세포 사멸 감수성 증가 및 사멸기전 분석
- ASC 발현 종양

3. 연구결과
1) 종양세포에서 메틸레이션에 의한 ASC 발현억제 확인과 ASC 발현 유도
- 12개 종양세포주중에서 4개의 세포주만 ASC 발현이 관찰되어 많은 종양세포에서 높은 빈도로 ASC 발현이 억제되어 있음을 확인
- 상기 ASC 발현이 억제된 종양세포 중 염증반응과 밀접한 관련이 있는 대장암 세포인 DLD-1 을 대상으로 메틸레이션 억제제, ASC 유전자 도입을 통해 ASC 발현을 유도한 세포를 확립하였음
2) ASC 발현에 의한 종양세포 사멸 감수성 증가 및 사멸기전 분석
- ASC 발현 종양세포에서 DNA 손상약물에 의한 세포사멸 증가 확인
- ASC 발현억제 종양세포 및 ASC 결핍 대식세포에서 세포사멸 감소 확인
- ASC 의존적 종양세포 사멸의 caspase, 인플라마좀 비의존성 확인
- 미토콘드리아 ROS, JNK 신호경로 활성화에 의한 프로그램 necroptosis 에 의한 ASC의 존적 종양세포 사멸기전 규명
- 메틸레이션 억제에 의한 ASC 발현은 또한 NF-kB 신호경로를 억제하여 종양세포 사멸을 증가시킴을 확인
3) Genotoxic stress 조건에서 NLRP3 인플라마좀의 세포사멸
- NLRP3 결핍 세포는 DNA 손상 자극에 의한 세포사멸을 억제하였고 caspase 의존적 현상임을 확인
- NLRP3 는 1형 인터페론 생성기전을 제어하여 바이러스 유도 세포사멸에 중요한 역할을 함을 확인
4) Pyrin 인플라마좀의 활성화 기전 규명
- Ribotoxic stress 는 p38 MAP kinase 의존적으로 pyrin 인플라마좀을 활성화 시킴을 확인
- Pyrin 발현 억제는 ribotoxic stress 에 의한 caspase-1 활성화를 감소시킴

Abstract ▼

3. Results
1) ASC expression in cancer cell lines
- ASC silencing in many tumor cell lines by methylation
- Establishment of ASC-expressing colorectal cancer DLD-1 cells through demethylation and stable ASC expression
2) ASC expression-dependent cancer cell death and its molecular mechan

3. Results
1) ASC expression in cancer cell lines
- ASC silencing in many tumor cell lines by methylation
- Establishment of ASC-expressing colorectal cancer DLD-1 cells through demethylation and stable ASC expression
2) ASC expression-dependent cancer cell death and its molecular mechanism
- Increase in cell death of ASC-expressing cancer cells in response to DNA-damaging agent
- Reduction in DNA damage-mediated cell death by siRNA knockdown of ASC or ASC knockout cells
- ASC induces caspase- or inflammasome-independent cell death
- ASC promotes necroptotic cell death by way of production of mitochondrial ROS and activation of JNK signaling pathway
- Demethylation-induced ASC expression inhibits NF-kB signaling pathways leading to cancer cell death
3) NLRP3 inflammasome-dependent cell death
- NLRP3-deficient cells were resistant to DNA damage-induced cell death
- NLRP3 regulates type I interferon production
4) Molecular mechanism of pyrin inflammasome activation
- Ribotoxic stress activates pyrin inflammasome activation via p38 MAP kinase signaling
- Knockdown of pyrin inhibits caspase-1 activation in response to ribotoxic stress

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 목차 ... 3
• 연구개발사업 최종연구개발결과보고서 요약문 ... 4
• Project Summary ... 6
• 1. 연구과제의 최종 연구개발 목표 ... 8
• 가. 연구배경 및 연구개발의 필요성 ... 8
• 나. 연구목적 및 연구범위 ... 9
• 2. 연구과제의 연구대상 및 방법 ... 10
• 1) 1단계: ASC 발현 조절에 의한 인플라마좀의 종양세포 사멸의 확인 ... 10
• 2) 2단계: 인플라마좀의 caspase-1 의존적/비의존적 종양억제 기전의 규명 ... 10
• 3) 3단계: Pattern-recognition receptor인 pyrin 인플라마좀의 종양세포 억제기전의 규명 ... 10
• 3. 연구과제의 연구개발결과 ... 11
• I. ASC 발현에 의한 종양세포 사멸 ... 11
• II. ASC 발현에 의한 종양세포 사멸기전 규명 ... 14
• III. NLRP3 인플라마좀의 세포사멸 연관성 확인 ... 21
• IV. Pyrin 인플라마좀의 p38 MAP kinase 에 의한 조절 ... 23
• 4. 연구과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 25
• 5. 연구과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 26
• (1) 연구성과 총괄 ... 26
• (2) 연구성과 상세내역 ... 27
• (3) 연구개발과제의 목표달성도 ... 37
• 6. 연구과제의 활용계획 ... 38
• (1) 연구종료 3년까지 예상 연구성과 ... 38
• (2) 연구성과의 활용계획 ... 38
• 7. 참고문헌 ... 39
• 8. 첨부서류 ... 41
• 끝페이지 ... 42