초록 ▼

유사분열 조절 단백질로 알려진 VRK1 신호계의 조절은 활발히 증식하는 암세포 증식에 있어서 중요한 요소로 알려져 있기에, 이를 억제하는 물질의 개발은 항암제 개발에 있어서 중요할 것으로 예상 되어져 왔다. 이에 본 연구는 VRK1 및 결합 단백질, 기질탐색을 수행하여 VRK1 및 복합체의 작용기작의 규명과 새로운 신호체계를 제시하였고, 이들 중 항암 타겟을 선별하였다. 천연식물로부터 VRK1을 비롯한 항암타겟에 대한 활성억제제를 탐색하고, 이를 분리 동정 및 효능 검정을 실시하였다. 이렇게 분리한 단일 추출물을 결정 추출하였으며,

유사분열 조절 단백질로 알려진 VRK1 신호계의 조절은 활발히 증식하는 암세포 증식에 있어서 중요한 요소로 알려져 있기에, 이를 억제하는 물질의 개발은 항암제 개발에 있어서 중요할 것으로 예상 되어져 왔다. 이에 본 연구는 VRK1 및 결합 단백질, 기질탐색을 수행하여 VRK1 및 복합체의 작용기작의 규명과 새로운 신호체계를 제시하였고, 이들 중 항암 타겟을 선별하였다. 천연식물로부터 VRK1을 비롯한 항암타겟에 대한 활성억제제를 탐색하고, 이를 분리 동정 및 효능 검정을 실시하였다. 이렇게 분리한 단일 추출물을 결정 추출하였으며, 표적 특이성을 결정하고, 분자적 구조 분석과 다원적 물리특성을 결정하였다. 신약후보물질의 대량 생산법 확립 및 인프라 구축을 통한 산업화의 기반을 마련하였으며, 동시에 세포수준의 효능검증 및 분자적 작용기작, 신호전달체계를 확립하였고, 이를 질병 동물 모델에 적용하여 신약후보의 효능 검증을 완료하였다.

Abstract ▼

Ⅳ. Result
● Elucidating VRK1-regulating proteins
- Searching for VRK1 binding proteins and purification of recombinant protein which is bound on VRK1 protein, and elucidating the effects on its kinetic activity by VRK1-binding proteins. Based on these results, we clarify that VRK1-binding prot

Ⅳ. Result
● Elucidating VRK1-regulating proteins
- Searching for VRK1 binding proteins and purification of recombinant protein which is bound on VRK1 protein, and elucidating the effects on its kinetic activity by VRK1-binding proteins. Based on these results, we clarify that VRK1-binding proteins inhibit the catalytic activity of VRK1 in cells.
- VRK1 catalytic activity and its level are regulated by its binding proteins on cell cycle. We elucidate these results by using cytometry, western blot, genetic modification.
● Screening inhibitors against VRK1 by using natural compound library
- We search for inhibitors against VRK1 and its downstream pathway by using natural compound library already established in our lab, and as a result, we determine one single compound as candidate inhibitor in Machilus Thunbergii.
- Candidate inhibitor perturbs VRK1-mediated BAF phosphorylation in vitro and in vivo, and show target specificity.
We establish extraction and structure identification on candidate inhibitor and perform mass-extraction and mass-separation for production on large scale. Obtained compound is applied on cancer-generated mouse models
● The verification of candidate compound’s anticancer effect
- Using biochemical techniques, the alternation of mechanism is caused by candidate compound in cancer cells. This result is induced by inhibition of VRK1 which has a role in cell proliferation and division.
- Candidate compound perturbs progression of cell growth, and induce cell apoptosis. The anticancer effect of extracted compound show more significant effects compared with other compounds.
Through tumor-generated mouse models, candidate compound show anticancer effects on mouse.

목차 Contents

• 제 출 문 ... 1
• 보고서 요약서 ... 2
• 요 약 문 ... 3
• S U M M A R Y ... 6
• C O N T E N T S ... 9
• 목 차 ... 25
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 25
• 1. 연구개발대상 기술의 경제적·산업적 중요성 및 연구개발의 필요성 ... 25
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 31
• (1) 세계적 수준 ... 31
• (2) 국내수준 ... 31
• (3) 국내외 연구현황 ... 31
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 33
• 1) 세포사멸 있어서 PKCδ의 VRK1 기능조절에 관한 연구 ... 33
• 2) VRK1을 통한 MKP2(Mitogen-activated protein kinase phosphatase의 히스톤 인산화의 조절 ... 34
• 3) VRK1에 의해 유도되는 hnRNP A1의 인산화는 telomerase와 telomere 간의 결합을 조절 ... 35
• 4) 후박 추출물의 BAF 인산화 저해도 측정 ... 35
• 5) Obtusilactone B와 BAF의 특이적 상호작용 ... 37
• 6) SPR을 통한 obtusilactone B와 BAF의 상호작용 증명 ... 38
• 7) Obtusilactone B 처리에 의해 유도되는 생리학적 변화 ... 38
• 8) Obtusilactone B의 항암효과 규명 ... 40
• 제 4 장 연구개발결과의 활용계획 ... 42
• 제 5 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 43
• 제 6 장 연구시설ㆍ장비 현황 ... 44
• 제 7 장 참고문헌 ... 45
• 끝페이지 ... 46