보고서 정보
주관연구기관 |
서울대학교 Seoul National University |
연구책임자 |
양희정
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보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2013-09 |
과제시작연도 |
2012 |
주관부처 |
교육과학기술부 |
사업 관리 기관 |
한국연구재단 |
등록번호 |
TRKO201400007185 |
과제고유번호 |
1345189140 |
사업명 |
기본연구지원사업 |
DB 구축일자 |
2014-05-31
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키워드 |
진세노사이드.고려인삼.간섬유화.비알코올성 간질환.ginsenoside.Korean ginseng.Liver steatosis.non-alcoholic liver disease.
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초록
▼
연구결과:
- 본 연구에서는 인삼의 발효가공물에서 다양한 진세노사이드를 분리하고, 발효인삼 가공물의 chemical profiling을 구축하고자 하였고, 활성 진세노사이드의 효율적인 분리 및 정제법을 개발하고자 하였다.
⋅ 본 연구기간 동안 각종 크로마토그램 기법을 활용하여 25-OH-20S-Rh1 (1), 25-OH-20R-Rh1 (2), 25-OH-Rh4 (3), 20S-Rg2 (4), 20S-Rh1 (5), 20R-Rg2 (6), 20R-Rh1 (7), 20S-AcetylRg2 (8), 20R-AcetylRg2 (
연구결과:
- 본 연구에서는 인삼의 발효가공물에서 다양한 진세노사이드를 분리하고, 발효인삼 가공물의 chemical profiling을 구축하고자 하였고, 활성 진세노사이드의 효율적인 분리 및 정제법을 개발하고자 하였다.
⋅ 본 연구기간 동안 각종 크로마토그램 기법을 활용하여 25-OH-20S-Rh1 (1), 25-OH-20R-Rh1 (2), 25-OH-Rh4 (3), 20S-Rg2 (4), 20S-Rh1 (5), 20R-Rg2 (6), 20R-Rh1 (7), 20S-AcetylRg2 (8), 20R-AcetylRg2 (9), 25-OH-20S-Rh2 (10), 25-OH-20R-Rh2 (11), Rk3 (12), Rh4 (13), 20S-Rg3 (14), 20R-Rg3 (15), oleanolic acid-28-Glu (16), Rk1 (17), Rg5 (18), 20S-Rh2 (19), 20R-Rh2 (20), 20S-AcetylRh2 (21), 20R-AcetylRh2 (22) 등의 총 22종의 진세노사이드를 분리하였다.
⋅ UPLC-QTOF/MS를 이용한 발효인삼 추출물의 chemical profiling을 구축할 수 있었다. 분리한 진세노사이드 1-22의 chemical profile과 발효인삼 추출물의 chemical profile을 구축하고, MS/MS 분석으로 배당체의 종류 및 모핵의 구조를 재확인하였다.
- in vitro 모델에서 분리한 진세노사이드의 간성상세포증식 억제 효과 평가 및 기전연구
⋅ 일차배양한 흰쥐의 간성상세포인 HSC-T6 세포와 인간의 간성상세포주인 LX-2 세포를 이용한 진세노사이드 이성질체의 세포증식 활성을 확인하였다.
⋅ 일차배양한 흰쥐의 간성상세포에서 발효인삼 추출물의 주성분인 S/R-Rh2와 S/R-Rg3를 처리한 후 MTT assay로 진세노사이드의 세포증식 억제를 측정하였다. 또한 인간에서 유래한 간성상세포주인 LX-2를 이용하여 S/R-Rh2, S/R-Rg2, S/R-Rg3, 25OH-20S/R-Rh2를 처리한 후 각 진세노사이드의 세포증식 효과를 측정하였다.
⋅ 그 결과 HSC-T6를 이용한 선행실험에서와 마찬가지로 S form이 R form에 비하여 현저하게 증식억제 효과를 보이고 있음을 확인할 수 있었다. 그리고 S-Rg3에 비하여 S-Rh2가 훨씬 뛰어난 활성을 보인 것을 확인하였다.
- 간섬유화 in vivo 모델
⋅ 흰쥐의 고지방식이 모델에서, in vitro에서 뛰어난 간성상세포 증식효과를 보였던 S-Rh2의 효과를 평가하였다.
⋅ S-Rh2 투여군이 고지방식이군에 비해 유의적으로 체중과 지방크기의 감소가 일어났으며, 간의 무게는 변화가 없었다.
⋅ 또한 S-Rh2 투여군에서 고지방식이군에 비해 GPT와 GOT 수치가 감소하는 것을 확인하였다.
⋅ 간조직을 H&E법으로 조직을 염색한 결과에서 S-Rh2를 처리한 경우에는 지방축적이 비교적 덜 되어있고, 간세포의 심각한 변형이 비교적 적음을 확인할 수 있었다.
Abstract
▼
Result:
-In the study, 22 ginsenosides were isolated from the fermented ginseng preparation using a wide range of chromatographic techniques. They were determined as 25-OH-20S-Rh1 (1), 25-OH-20R-Rh1 (2), 25-OH-Rh4 (3), 20S-Rg2 (4), 20S-Rh1 (5), 20R-Rg2 (6), 20R-Rh1 (7), 20S-AcetylRg2 (8), 20R-Ace
Result:
-In the study, 22 ginsenosides were isolated from the fermented ginseng preparation using a wide range of chromatographic techniques. They were determined as 25-OH-20S-Rh1 (1), 25-OH-20R-Rh1 (2), 25-OH-Rh4 (3), 20S-Rg2 (4), 20S-Rh1 (5), 20R-Rg2 (6), 20R-Rh1 (7), 20S-AcetylRg2 (8), 20R-AcetylRg2 (9), 25-OH-20S-Rh2 (10), 25-OH-20R-Rh2 (11), Rk3 (12), Rh4 (13), 20S-Rg3 (14), 20R-Rg3 (15), oleanolic acid-28-Glu (16), Rk1 (17), Rg5 (18), 20S-Rh2 (19), 20R-Rh2 (20), 20S-AcetylRh2 (21) and 20R-AcetylRh2 (22).
- The chemical profile of the fermented ginseng preparation was established by UPLC-QTOF/MS analysis, and it was compared with the chemical profile of the standard mixtures isolated from the ginseng preparation. The structures of 22 ginsenosides were confirmed by the MS/MS fragmentation patterns of the types of aglycones and sugar residues.
- The isolated ginsenosides were screened their anti-proliferative activities on hepatic stellate cell lines, HSC-T6 (rat hepatic stellate cell line) and LX-2 (human hepatic stellate cell line), and primary cultured hepatic stellate cells.
- As a result, S-Rh2 and S-Rg3, which are the major constituents of the fermented ginseng preparation, showed significantly the anti-proliferative activity on the hepatic stellate cells. S-form ginsenosides generally showed more potent activities than R-forms. Also, S-Rh2 having a glucose could decrease more cell viability than S-Rg3 having two glucoses.
- S-Rh2 which showed the potent anti-proliferative activity on the hepatic stellate cells treated to high fat diet-induced liver steatosis in C576BL/6 mice.
- As a result, the body weight and the size of fat tissue in S-Rh2 treated group significantly decreased comparing with the high fat-treated group and the liver weight was not changed. Also, it was observed that the GPT and GOT level of S-Rh2 treated group were decreased.
- In the result of H&E staining tissues, S-Rh2 prevented the fat accumulation and the distortion of hepatocytes compared to the high fat-treated group.
목차 Contents
- 일반연구자지원사업 최종보고서 양식 ... 1
- 목차 ... 3
- 연구 계획 요약문 ... 4
- 연구 결과 요약문 ... 5
- 한글요약문 ... 5
- SUMMARY ... 6
- 연구내용 및 결과 ... 7
- 1. 연구개발과제의 개요 ... 7
- 2. 국내외 기술개발 현황 ... 8
- 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 9
- 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 15
- 5. 연구결과의 활용계획 ... 16
- 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 16
- 7. 주관연구책임자 대표적 연구 실적 ... 17
- 8. 참고 문헌 ... 17
- 9. 연구 성과 ... 19
- 10. 기타사항(중요 연구 변경사항 등) ... 19
- 대표연구성과 ... 20
- 끝페이지 ... 20
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