보고서 정보
주관연구기관 |
경희대학교 Kyung Hee University |
연구책임자 |
배현수
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2004-08 |
과제시작연도 |
2003 |
주관부처 |
보건복지부 |
사업 관리 기관 |
한국보건산업진흥원 Korea Health Industry Development Institute |
등록번호 |
TRKO201400017464 |
과제고유번호 |
1460002884 |
사업명 |
한방치료기술개발 |
DB 구축일자 |
2014-11-10
|
키워드 |
유전자이식.발현억제.전침.진통.반응군.비반응군.gene delivery.mRNA blocking.responder.non-responder.analgesic effect.electroacupuncture.
|
초록
▼
◎ 20세기 중반부터 침의 진통기전이 본격적으로 연구되기 시작하였으나 모든 개체가 침치료에 대하여 유효한 반응을 나타내는 것은 아니라는 사실이 몇몇 의과학자들에게 큰 어려움을 주고 있으며 침 시술자들은 이들을 반응군과 비반응군으로 구분함.
◎ Takeshige 등은 쥐 (rat) 에게 시술한 침자극 이후의 미도피반사반응(tail flick latency, TFL) test에서 반응군과 비반응군의 비율을 6:4 정도로 보고하고 있으며, 두군의 차이가 met -enkephaline 의 합성에 관여하는 효소기전의 차이에 의한 것으로
◎ 20세기 중반부터 침의 진통기전이 본격적으로 연구되기 시작하였으나 모든 개체가 침치료에 대하여 유효한 반응을 나타내는 것은 아니라는 사실이 몇몇 의과학자들에게 큰 어려움을 주고 있으며 침 시술자들은 이들을 반응군과 비반응군으로 구분함.
◎ Takeshige 등은 쥐 (rat) 에게 시술한 침자극 이후의 미도피반사반응(tail flick latency, TFL) test에서 반응군과 비반응군의 비율을 6:4 정도로 보고하고 있으며, 두군의 차이가 met -enkephaline 의 합성에 관여하는 효소기전의 차이에 의한 것으로 보고, D-Phenylalanine을 사용함으로써 비반응군이 반응군으로 전환될 수도 있음을 밝힘.
◎ Han J.S.등은 전침의 진통효과실험에 있어서 Cholecystokinin-octapeptide;CCK-8 분비량의 차이가 개체간의 반응차이에 관계한다고 보고, CCK receptor antagonist인 L-365,260을 투여함으로써 반응이 적은 개체에서 전침에 의한 진통효과가 개선될 수 있음을 보임.
◎ 현재까지의 대부분의 연구는 침자극 후에 약물 또는 다른 전기적 자극 등을 이용하여 반응의 현황을 관찰하는 것에만 치중되었으며, 침자극에 대한 개체의 반응 차이를 유발시키는 특정 유전자의 비교, 분석에 관한 연구는 매우 미흡함.
cDNA microarray 결과 반응군에서 많이 발현된 유전자로는 transcrpition factor로서 대뇌피질의 progenitor cell의 증식을 매개하는 brain factor 1과 신경전달 물질의 합성을 매개하는 효소또서 doparnine beta-hydroxylase와 phosphotidylethanolamine N-methyltansferase, 신경돌기 성장 및 신경접합 협성을 증강시키는 Acetylcholinesterase T subunit 등 외에 다수의 신경계에 직접적 및 간접적으로 작용하는 단백질을 합성하는 유전자가 확인되었고 비반응군에서 많이 발현된 유전자에는 신경계 퇴화의 표식자로 볼 수 있는 tau와 cathepsin B 등이 있었음.
○ 이에 상기 연구결과를 토대로, 반응군 특이 유전자를 BF-I, Ach T, DBH gene으로 선정하고 비반응군 특이 유전자로서 Cathepsin B 및 Tau gene을 선정, 반응군/비반응군의 분류 및 전환에 관한 실험을 진행하였음.
○ adenoviral vector에 재조합된 각 상기 유전자를 stereotaxic한 상태에서 rat의 hypothalamus에 도입하였으며, 이후 TFL test를 통하여 상대군의 특이유전자의 도업이 반옹군과 비반응군간의 전환을 가능하게 하는지 확인하였음.
○ 실험결과, 실험 후 RT-PCR 상에서 도입된 각 재조합 유전자의 발현량이 유의하게 증가하였음을 확인하였으나, 각 유전자의 도입이 반응군과 비반응군간의 전환을 유발하지 않았으며, 반웅군/비반응군의 미분류 상태에서의 실험에서 또한 반응군 혹은 비반응군으로의 변화를 행동실험적으로 판찰할 수 없었음.
○ 상기 연구결과로 미루어보았을 때 반응군/비반응군의 분류와 연관된 특이 유전자는 복합적으로 작용할 것이라고 판단되며, 반응군/비반응군 전환을 유도하는 유전자는 2가지 이상의 gene의 조합에 의해 가능할 것이라 사료되며 이후 2종 이상의 gene의 조합 도입을 통하여 여러한 의문점을 해소할 계획임.
○ 이상의 결과를 통하여, 침자극에 대한 반응군/비반응군의 표현은 단일 유전자의 발현량의 차이에서 기인하는 것이 아닌 Ach T gene + DBH gene + BF-I gene 혹은 Tau gene + Cathepsin B gene 등의 복합적인 형태, 즉 gene-group dominant 한 상태에서 가능한 것이며, 이는
① TFL test 시 반응군에도 비반응군에도 속하지 않는 group에 대한 유전자 발현량의 심도있는 평가
② 2종 이상 유전자 조합상태의 도입을 통한 반응군/비반응군 전환 연구에 의하여 더욱 명료한 결과를 얻을 수 있을 것이라 사료됨.
Abstract
▼
Although analgesic effects of acupuncture has been studied after middle of 20C, not all of the subjects has obtained the effectiveness for their pain. This has been named Responder/Non-responder by scientists in the field of acupuncture.
Takeshige et. al., found 6:4 for the rate of Responder/Non-
Although analgesic effects of acupuncture has been studied after middle of 20C, not all of the subjects has obtained the effectiveness for their pain. This has been named Responder/Non-responder by scientists in the field of acupuncture.
Takeshige et. al., found 6:4 for the rate of Responder/Non-responder by Tail flick latency test on rats, and determined the differences between those groups would come from the differences of enzymatic mechanism concerned with synthesis of met-enkephline. Also, Han J.S. et. al. investigated analgesic effects of electroacupuncture and suggested L-365,260, cholecystokinin-octapeptide (CCK-8), could improved the effect on Non-responders. on our previous microarray studies, BF-I, DBH and Ach T gene was abundant in Responder group, while Cathepsin B and Tau gene was in Non-responder one. From these resu1ts, our team investigated if those genes could affect the exchange from one to the other group.
Recombinant adenoviral vectors were constructed inc1uding those genes and stereotaxical administration was performed into hypothalamus of rats, then observed the exchange of Responder/Non-responder by TFL behavior test. However, although the expression levels of injected recombinant adenoviral vector inc1uding those specific genes was increased on RT-PCR after TFL test, the exchange of Responder/Non-responder was not found on TFL test. In conclusion, our results suggested that the outcome of Responder/Non-responder was not derived from the difference of single specific gene, but rather from combination of specific genes, that is, the dominant condition of some genes. After all, further studies for the expression levels of specific genes not belonging to Responder either to Non-responder and combination gene therapy to result in the exchange of Responder/Non-responder should be performed.
목차 Contents
- 표지 ... 1
- 제출문 ... 2
- 목차 ... 3
- 요약문 ... 4
- Summery ... 6
- 총괄연구개발과제 연구결과 ... 6
- 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 7
- 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 13
- 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 65
- 4. 사업화 목표 달성도 및 계획(개발과제만 해당함) ... 69
- 5. 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 70
- 6. 연구개발결과의 파급효과 ... 86
- 7. 첨부서류 ... 87
- 끝페이지 ... 110
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.