초록 ▼

연구 방법 및 결과:
1. OLETF 쥐의 간에서 사이토카인의 변화
OLETF 쥐의 체중증가는 일반적인 방식대로 일어났으며 성장호르몬을 투여한 쥐 (주 6회 2 단위/kg)의 체중이 갖장 많이 증가하였다. 이와는 반대로 쑥뜸을 시행한 쥐 (주 3회 양측 신수혈에 각각 1 장씩의 애구를 시행함)의 체중증가가 가장 적었으나 통계적인 의미는 부여할 수 없었다.
정확한 정량을 할 수는 없었으나 housekeeping gene인 beta-actin의 발현정도를 근거로 비교해 보면 IL-1β는 일률적인 발현을 보이고 있었고,

연구 방법 및 결과:
1. OLETF 쥐의 간에서 사이토카인의 변화
OLETF 쥐의 체중증가는 일반적인 방식대로 일어났으며 성장호르몬을 투여한 쥐 (주 6회 2 단위/kg)의 체중이 갖장 많이 증가하였다. 이와는 반대로 쑥뜸을 시행한 쥐 (주 3회 양측 신수혈에 각각 1 장씩의 애구를 시행함)의 체중증가가 가장 적었으나 통계적인 의미는 부여할 수 없었다.
정확한 정량을 할 수는 없었으나 housekeeping gene인 beta-actin의 발현정도를 근거로 비교해 보면 IL-1β는 일률적인 발현을 보이고 있었고, TNF-α는 발현이 불규칙하였으나 성장호르몬과 쑥뜸에 의하여 발현이 증가하였다가 두 가지를 동시에 시행한 경우에는 억제됨을 알 수 있었다. IL-6의 경우에는 전반적으로 일정한 발현을 보였으나 IGF-I에서는 성장호르몬에 의해 증가한 발현이 쑥뜸 단독 처리시에는 감소를 그리고 두가지 모두를 시행한 경우에는 거의 발현이 감소되어서 쑥뜸은 IGF-I 성장인자의 발현을 강력히 억제함을 알 수 있었다.
연구 방법 및 결과:
2. OLETF 쥐의 신장에서 사이토카인의 변화
신장에서의 사이토카인의 발현은 양이 적어서 발현을 정량하기는 어려웠으며 본 실험에서 적용한 RT-PCR법으로 정량을 하였다. 특히 housekeeping gene인 beta-actin의 발현정도를 근거로 비교해 보면 1L-1ß는 간 조직에서의 발현과도 같게 일률적인 발현을 보이고 있었고， TNF-α는 발현도 역시 불규칙하였으나 성장호르몬보다는 쑥뜸에, 쑥뜸보다는 성장호르몬과 쑥뜸의 두 가지를 모두 처리한 동물의 신장조직에서의 발현이 증가하였다. 1L-6의 경우에는 전반적으로 불규칙한 발현양상을 보여서 다시 한번 동일한 실험으로 확인하거나 방법을 바꾸어서 Northem blot법 등이나， RPA등으로 정량을 하는 것이 필요하였다. IGF-I에서는 간 조직에서와 같은 발현 양상을 보였는데 성장호르몬이나 쑥뜸의 단독 처리 시에 대조군에 비해 증가하였던 transcripts의 양이 두 가지 모두를 시행한 경우에는 거의 발현이 감소되어서 앞으로 그 발현 양상에 대한 기전에 대한 연구가 필요할 것으로 사려되었다.
1. 1차년도 연구 : 쑥뜸의 유효성분에 대한 표적 인자 연구로서 사람의 면역세포인 말초혈액세포에서 preinflammatory cytokine인 interleukin-1ß (IL-1ß), interleukin-6(IL-6) , 인슐링양 성장인자-I (IGF-I)등의 사이토카인의 동태를 조사한다.
2. 2차년도 연구 : 노화의 동물모델로 제 2형 당뇨병을 자동적으로 일으키는 OLETF rat을 이용하여 쑥뜸을 시행하고， 이의 면역억제 효과를 preinflamrnatory cytokine인 interleukin 1ß (IL-1β), interleukin-6 (IL-6), 인슐링양 성장인자-I (IGF- \I)등의 동태를 조사하여 확인한다.
3. 3차년도 연구 : 노화의 동물모델로 제 2형 당뇨병을 자동적으로 일으키는 OLETF rat을 이용확여 쑥뜸을 시행하고 효과를 분자생물학적인 방법인 RT-PCR을 사용하여 사이토카인 유전자의 발현을 조사한다.

Abstract ▼

Methods and Results:
1. Expression of preinflammatory cytokines m OLETF rat liver tissues.
OLETF rats get weight gain with age till 26 week-old. GH treated (sc injection of two units / kg, 6 times a week) OLETF rat group get weight gam strikingly.
Contrast to GH, Moxa treated rats were gain

Methods and Results:
1. Expression of preinflammatory cytokines m OLETF rat liver tissues.
OLETF rats get weight gain with age till 26 week-old. GH treated (sc injection of two units / kg, 6 times a week) OLETF rat group get weight gam strikingly.
Contrast to GH, Moxa treated rats were gained weight less than other groups.
(acupuntured at B37 meridian site, 3 times a week) Expression of preinflammatory cytokine genes were studied compared to beta-actin gene expression, which was one of house keeping genes. Interleukin-1 beta (IL-1β)
gene was constantly expressed among various treatments, but tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) gene expression was increased with Moxa or GH treatment. In case of both treatment, TNF-α gene expression was suppressed than each treatment. Interleukin-6 (IL-6) gene expression was relatively constant.
Strikingly, effects of Moxibustion on IGF-I gene expression was strongly suppressed.
Methods and Results:
2. Expression of preinfiammatory cytokines in OLETF rat kidney tissues.
Cytokine genes' expression were so small in OLETF rat kidney tissues, we adopted RT-PCR method from tissue RNA. Also, expression of preinflammatory cytokine genes were studied compared to beta-actin gene expression, which was one of house keeping genes. We got the same results of IL-Iβ gene as compared to liver's. It meant that IL-Iβ gene expression was constant with each treatment.
TNF-α gene expression was not constant, and gene expression with Moxa treatment was better than that of GH treatment. Both treatment of Moxa and GH was the best stimulation of TNF-α gene expression.
IL -6 gene expreSSIon showed extremely variable, so we had to change detection method to Northern blot or RNAse protection assay. IGF-I gene expression was strongly suppressed with Moxa treatment.
We had a clear result that Moxa had a strong suppression to IGF-I gene expression, which will be the next step for research.
1. The first year study: As a target factor study, we investigate dynamic changes of preinfiammatory cytokines (IL-1β, TNF-α, IL-6 and IGF-I) with Moxa tar in human peripheral immune cells.
2. The second year study: Using a spontaneously developed adult-onset diabetic rat (OLETF rat) as an aging experimental animal model, we investigate dynamic changes of preinfiammatory cytokines (IL-1β, TNF-α, IL-6 and IGF-I) with Moxa tar.
3. The third year study: Using a OLETF rat, we tried to find out molecular assessment of Moxibustion effects on immune system, especially expression of preinfiammatory cytokines, compared to GH by semiquantitative RT-PCR for gene expression

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 목차 ... 3
• 연구개발사업 최종보고서 요약문(1) ... 4
• 연구개발사업 최종보고서 요약문(2) ... 5
• Project Summery (1) ... 6
• Project Summery (2) ... 7
• 총괄연구개발과제 연구결과 ... 8
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 8
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 15
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 27
• 4. 총괄연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 35
• 5. 총괄연구개발과제의 활용계획 ... 37
• 6. 첨부서류 ... 38
• 끝페이지 ... 48