초록 ▼

기존에 사용중인 Anti-H.pylori 항체 진단법은 우리나라와 같이 정상인도 H.pylori에 감염되어 있는 지역에서는 사용하기 곤란하다. 따라서 요즈음은 병소부위의 생체조직을 분리하여 H.pylori에 특이한 요소분해효소 (urease) 의 활성 유무를 관찰하여 위염이 H.pylori에 의한 것인지를 판별한다. 그러나 이러한 kit는 온도와 습기에 약한 요소 (urea) 가 다량 함유되어 있어 위양성 반응을 일으키기 쉽고 냉장 보관해야 하며 결과 판정에 소요되는 시간이 대단히 길다. 따라서 본 연구는 이러한 단점을 개선하고자

기존에 사용중인 Anti-H.pylori 항체 진단법은 우리나라와 같이 정상인도 H.pylori에 감염되어 있는 지역에서는 사용하기 곤란하다. 따라서 요즈음은 병소부위의 생체조직을 분리하여 H.pylori에 특이한 요소분해효소 (urease) 의 활성 유무를 관찰하여 위염이 H.pylori에 의한 것인지를 판별한다. 그러나 이러한 kit는 온도와 습기에 약한 요소 (urea) 가 다량 함유되어 있어 위양성 반응을 일으키기 쉽고 냉장 보관해야 하며 결과 판정에 소요되는 시간이 대단히 길다. 따라서 본 연구는 이러한 단점을 개선하고자 하였다. 기존 수입시약인 CLO test의 조성에 황산망간과 차아염소산으로 된 pnenate 시약을 첨가하여 반응소요시간을 2시간 이하로 줄이고 위양성율도 현저히 낮출수 있는 습식 HP 진단 kit의 기술이 개발되었고 수입시약보다 민감도가 우수함이 관찰되었다. 또한 대량생산과정을 수행하고 그 제품의 안정성 가혹실험 검사을 실시하여 그 유효기간과 성능을 조사하였다. 그 결과 1년의 저온유통이 가능함을 확인하였다. 따라서 시제품화에 하여 종근당 HP kit^TM (습식 HP 진단 kit 상품명)을 생산하고 있다.
또한 위궤양을 일으키는 원인균언 H. pylori균을 진단학는 습식 HP 진단 kit의 안정성 및 조작 편이도를 높이기 위해 membrane을 이용한 건식 HP kit을 개발하였다. 건식 HP kit에 필요한 pH indicator는 phenol red가 적합하였고, 그 용액의 최적 조성은 urea 10 g/l, KH₂P0₄ 4 g/l, phenol red 0.3 g/l, pH 7.4였고, 건조 조건은 25℃~37℃가 적합하였다. Membrane은 S&S사의 cellulose membrane #3000가 가장 적합하였다. 이러한 조건에서 만든 건식 HP kit을 기존의 종근당 HP kit^TM와 비교한 결과 동일한 수준의 민감도, 특이도와 보다 빠른 반응성을 보였다. 따라서 기존의 수입 습식 HP kit보다 우수한 성능을 가진 것을 생각된다. 대용량 제조를 위한 plastic housing의 대량 공급망을 확보하고 대량생산 가기를 제작, 구압하면 batch test 및 생산 validation과정을 수행할 수 있을 것이며 이를 통하여 시제품화가 가능할 것이다.

Abstract ▼

Helicobacter pylori is the causative agent of type B chronic gastritis and increases an individuaI risk of th development of stomach cancer. But among Korean patients coming to hospital as the result of gastric pains, it is difficult to diagnose H. pylori infection through the serum sample tested fo

Helicobacter pylori is the causative agent of type B chronic gastritis and increases an individuaI risk of th development of stomach cancer. But among Korean patients coming to hospital as the result of gastric pains, it is difficult to diagnose H. pylori infection through the serum sample tested for IgG antiboies to H. pylori by enzyme linked immunosorbent assay since Korean people are infected prevalently by it. In this problems, many investigators have directly tested biopsy specimens obtained by gastroscopic biopsy using urease test kit, which detects the activity of secre디ve urease from H. pylori. As the high component of naturally degradable urea in this kit, it must keep at low temperature but since it is not easy, is often detoriorated and resulted to the false negative signal.
In this research, we have recovered the defects of kit by means of adding phenate solution and minimizing urea concentration to the already manufactured urease test kit, CLO test kit (Canada). We observed that the reading time of sensitivities of our HP test kit was decreased in 2 hours and the false negative signal was decreased more than CLO test kit. And also in stablilty test of two urease test kit, our HP test kit have appeared more stable. Recently we have finished the batch test successfully and marlufactured HP test kit, named 'Chong Kun Dang HP diagnostic kit'.
For the more convenient and stable handling of HP test kit, we have also developed 'Drving HP test kit' using the membrane. we have confrrmed the component of kit that was composed of urea 10 g/l, KH2P04 4 g/l, penol red 0.3 g/l and it's working solution was set at pH 7.4. Membrane used cellulose membrane #3000 (S&S, USA). As compared with Chong Kun Dang HP diagnostic kit in the point of specificity and sensitivity, the drying HP test kit have proved to have identical qaulilities and the reading time of sensitivity of drying HP test kit was faster than Chong Kun Dang HP diagnostic kit. We think the drying HP test kit is more excellent than any other manufactured HP Lest kit. If the plastic housing of the drying HP test kit is produced at the large sca1es and the batch test is finished sucessfully, it will manufactured and sale to markets soon.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 목 차 ... 4
• 연구개발사업 최종보고서 요약문 ... 5
• Project Summery ... 6
• 총괄연구개발과제 연구결과 ... 7
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 7
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 10
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 30
• 4. 총괄연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 31
• 5. 총괄연구개발과제의 활용계획 ... 33
• 6. 첨부서류 ... 33
• 제1세부연구개발과제 연구결과 ... 35
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 36
• 2. 제1세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 37
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 38
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 43
• 5. 제1세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 44
• 6. 제1세부연구개발과제의 활용계획 ... 45
• 7. 참고문헌 ... 45
• 끝페이지 ... 46