초록 ▼

옆모결관
1.1) 가토 및 인체 기증안을 상대로 안과용 생리식염수를 사용하여 초음파 수정체 유화술을 시행한 결과 수술중 \기포는 여러 상황에서 형성 될 수 있으며， 기포가 형성될 경우에는 각막 내피세포의 파손이 발생하는 것을 전자 현미경 및 F-actin 염색을 통하여 확인할 수 있었으며， 또한 초음파 없이 시행한 수술에서도 기포와 생리식염수만 존재하면 각막 내피세포의 파손이 발생하는 것을 확인하여， 수술중 사용되는 생리식염수와 기포 사이의 표면 장력이 내피세포 파손에 관여한다는 가설을 증명할 수 있었다.
2) 초음파 유

옆모결관
1.1) 가토 및 인체 기증안을 상대로 안과용 생리식염수를 사용하여 초음파 수정체 유화술을 시행한 결과 수술중 \기포는 여러 상황에서 형성 될 수 있으며， 기포가 형성될 경우에는 각막 내피세포의 파손이 발생하는 것을 전자 현미경 및 F-actin 염색을 통하여 확인할 수 있었으며， 또한 초음파 없이 시행한 수술에서도 기포와 생리식염수만 존재하면 각막 내피세포의 파손이 발생하는 것을 확인하여， 수술중 사용되는 생리식염수와 기포 사이의 표면 장력이 내피세포 파손에 관여한다는 가설을 증명할 수 있었다.
2) 초음파 유화술시 관류액 내에 용해된 기체 압력이 높을수록 기포의 생성이 많은 것을 발견하였다. 또한 밀폐된 유리병에 낮은 기압하에 보관된 용액도 유리병이 개봉되어 외부기체기 유입되면 점차 용액내 기체압력이 증가하였다. 기포의 발생을 억제하기 위하여는 공기의 투과가 불가능한 유리병에 관류액을 낮은 기압 상태로 보관하여야 하고， 관류액의 점차적인 배출에 대응하여 유리병 안에 공기가 들어감으로서 발생하는 잔여 관류액 내의 공기압 상승은 유리병 안에 공기통과용 유리관을 설치함으로서 억제할 수 있다는 사실을 발견하였다.
3) 안과생리식염수에 표면장력이 낮은 mineral oil을 넣고 초음파로 강하게 섞으면 표면장력이 낮은 용액이 생성되었으며 이를 사용하면 수술 중 기포가 발생하여도 내피세포의 손상은 발생하지 않았다(제 1 세부과제).
2. 1) 각막내피세포 표변에 존재하며 세포를 손상으로부터 보호하거나 손상을 최소화하는 역할을 하리라 생각되는 새로운 층을 뮤신 염색과 조직화학적방법을 통하여 알아본 결과， 새로운 층의 성상은 0.5 - 1 micron 두께의 뮤신성분이 섞인 층으로서 그 성분은 keratan sulfate와 유사하리라는 결과를 최초로 얻을 수 있었다.
2) 각막의 내피층과 상피층을 분리하여 생리식염수에 일부만 담가 기체(공기)， 액체(식염수)， 고체(내피세포 표면; 뮤신층)의 3가지 phase가 마주치도록 하여 뮤신층이 파손되도록 하고， 파손된 뮤신이 주위의 생리식염수의 표면장력을 변화시키는 것을 측정한 결과， 내피세포 뮤신이 계면활성적으로 활성적이며 그 활성도가 상피세포의 뮤신보다 높다는 사실을 발견할 수 있었다.
3) 내피세포 표면에 위치한 뮤신은 내피세포가 생성， 분비하는 것임을 mucinl의 RT-PCR, in situ hybridization 및 immunohistochemistry를 통하여 밝힐 수 있었다(제2 세부과제).
3. 1) 가토안을 상대로 기존 사용되고 있는 여러 종류의 점탄성 물질을 사용， 초음파 수정체 유화술을 시행하여 점탄성 물질의 내피세포 보호작용 여부를 확인한 결과，hyaluronic acid로만 구성된 물질은 기포의 공격에 대하여 각막내피세포를 보호하지 못하였으나 methylcellulose로 구성된 물질은 일부 보호하였고 hyaluronic acid와 chondroitin sulfate로 구성 된 물질은 보호작용이 우수한 것을 발견하였다.
2) 가토안을 상대로 기존 사용되고 있는 여러 종류의 점탄성 물질을 사용하여 내피세포와 접촉시키고 초음파 수정체 유화술로 점탄성 물질을 제거한 후 뮤산층을 관찰하였다. 그 결과， hyaluronic acid로만 구성된 물질은 뮤신층에 영향을 미치지 않았으나， hyaluronic acid와 chondroitin sulfate로 구성된 물질은 뮤신층과 동반되어 제거되는 것이 관찰되었다.
3) Hyaluronic acid 단일제재보다 hyaluronic acid 에 methylcellulose 또는 chondroitin sulfate를 혼합한 점탄성 물질이 내피세포의 파손을 방지하였다. (제 3 세부과제)
이상과 같은 결과는 목표를 무난히 달성한 것으로서 향후 백내장 수술시 각막내피세포 보호를 가능하게 하는 중요한 자료를 제공하였다고 생각되며， 또한 향후 국산 의료 기자재 생산에 필요한 정보를 많이 제공하였다고 판단된다.

Abstract ▼

Results
1. Subject 1
1) We found that suface tesion between the air bubble and nonnal saline used during the operation is responsible for the endothelial demage in rabbit's and donated human eyes by proving that bubble can be produced in many different circumstances in the operation even witho

Results
1. Subject 1
1) We found that suface tesion between the air bubble and nonnal saline used during the operation is responsible for the endothelial demage in rabbit's and donated human eyes by proving that bubble can be produced in many different circumstances in the operation even without the phacoemulsification procedure if there are air bubbles and normal saline, and by confinning this endothelial demage with electromicroscope and F-actin staining.
2) We also found out that higher the pressure of dissolved gas pressure in solution during the phacoemulsification, more air bubbles were produced. So, to prevent the bubble production, the solution used during' the phacoemulsification must be kept in low pressure and in the glass bottle through which the air can not penetrate. Rising of the air pressure in the circulating solution by the entrance of air when the solution is drained out of the bottle can be prevented by placing the glass tube for the passage of the air ..
3) Using the mixture of mineral oil and balanced salt solutionCBSS plus in plastic bag) during phacoemulsification experiment, we could decrease the amount of corneal epithelial demage in anterior chamber where air bubble is present.
Subject 2
1) The layer, which was believed to prevent or minimize the corneal endothelium by existing on the endothelial surface was examined with mucinous staining and histochemistrical methods. For the first time, we found out that the layer is 0.5 - 1.0 micron thick, mixed with mucinous component which is similar to keratin sulfate.
2) We found out that the mucin layer is active as the sulfactant and its activity is much more higher than that of mucin layer of corneal epithelium, when we destroyed the mucin layer and 3 different phases; gas(air), liquid (nonnal saline), solid(surface of endothelium; mucinous layer), of seperated corneal epithelium and endothelium are faced to each other after they are partially incubated in nonnal saline, and the amount of surface tension change by demaged mucin layer was measured.
3) We found a large amount of lectin gold on the endothelium surface by staining them with 8 diffenrent lectin gold and transmission and scanning electromicroscopic examination. With immunohistochemical staining and RT-PCR, in situ hybidization, we found mud as one of the component of mucin layer.
Subject 3
1) By phacoemusification of rabbit's eyes, we tried to compare the effectiveness of viscoelastics protecting the coneal endothelium. As a results, viscoelastics composed of only hyaluronic acid had poor endothelial protection ability against air bubbles, thoes made of methycellulose had partial effectiveness, while the viscoelastics composed of acid and chondroitin sulfate had the most protection effects.
2) After conventional viscoelastics had made a contact with endothelial cells and we removed them with phacoemulsification and saw what happened to the mucin layer.
Viscoelastics which made only of hyaluronic acid had no effect on mucin layer while one with hyaluronic acid and chondroitin sulfate had removed with mucin layer.
3) We checked the amount of the endothelial demage with F-actin staining with rabbit eye where new kind of viscoelastic composed of methy1cellulose was injected to anterior chamber and phacoemulsification was done with BBS plus. We found that viscoelastic composed of hyaluronic acid combined with methy1cellulose or chondroitin sulfate can prevent endothelial demage.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 목차 ... 4
• 연구개발사업 최종보고서 요약문(한글) ... 6
• Project Summery ... 8
• 총괄연구개발과제 연구결과 ... 10
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 10
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 14
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 31
• 4. 총괄연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 33
• 5. 총괄연구개발과제의 활용계획 ... 38
• 6. 첨부서류 ... 39
• 제1세부연구개발과제 연구결과 ... 40
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 41
• 2. 제1세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 41
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 43
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 48
• 5. 제1세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 49
• 6. 제1세부연구개발과제의 활용계획 ... 50
• 7. 참고문헌 ... 51
• 제2세부연구개발과제 연구결과 ... 52
• 1. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 53
• 2. 제2세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 53
• 3. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 56
• 4. 제2세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 62
• 5. 제2세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 63
• 6. 제2세부연구개발과제의 활용계획 ... 64
• 7. 참고문헌 ... 64
• 제3세부연구개발과제 연구결과 ... 66
• 1. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 67
• 2. 제3세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 67
• 3. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 69
• 4. 제3세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 72
• 5. 제3세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 73
• 6. 제3세부연구개발과제의 활용계획 ... 74
• 7. 참고문헌 ... 74
• 끝페이지 ... 75