초록 ▼

○ 연구결과
1. 배추좀나방 인공사료 개량 및 사육조건 개선
배추좀나방의 인공사료를 개선하고 대량 사육법 개발을 위하여 실시한 시험 결과는 다음과 같다.배추좀나방 난은 평균 0.45mm, 유충은 1령 1.29mm, 2령 3.10mm, 3령 4.65mm, 4령이 8.57mm 였으며 용 7.91mm, 성충 수컷은 4.96mm, 암컷은 4.97mm 였다. 배추좀나방의 산란습성은 산란전기 일 산란기는 2.8 , 평균 5.1일 이었으며 산란후기는 6.9일 이였다. 1일당 산란수는 48.7개, 총 산란수는 263개 정도였다. 1령에

○ 연구결과
1. 배추좀나방 인공사료 개량 및 사육조건 개선
배추좀나방의 인공사료를 개선하고 대량 사육법 개발을 위하여 실시한 시험 결과는 다음과 같다.배추좀나방 난은 평균 0.45mm, 유충은 1령 1.29mm, 2령 3.10mm, 3령 4.65mm, 4령이 8.57mm 였으며 용 7.91mm, 성충 수컷은 4.96mm, 암컷은 4.97mm 였다. 배추좀나방의 산란습성은 산란전기 일 산란기는 2.8 , 평균 5.1일 이었으며 산란후기는 6.9일 이였다. 1일당 산란수는 48.7개, 총 산란수는 263개 정도였다. 1령에서 4령까지의 유충 기간은 8.3～9.9일로 기주별로, 암수에 따라서 약간의 차이가 있었으나 기주식물에 따른 용화율은 배추에서 88%로 가장 좋았다. 부화율은 배추에서 84%로 가장 높았으며 기주선호도는 배추가 가장 높았다. 기주에 따른 식이선호성은 배추 45.2%, 케일 40.3%로 다른 두 기주보다 식이 선호성이 높았으며, 산란선호성에 있어서도 배추가 58.2%로 높았다.
온도에 따른 산란일은 20℃에서 1.9일, 30℃에서는 1.2일로 온도가 올라갈수록 짧아졌으며, 암컷수명도 같은 경향이었다. 암컷 산란수와 부화율은 온도가 높아질수록 떨어지므로 최소한 30℃이하로 유지 되어야 하였다. 온도별 유충생존율은 20℃와 25℃에서 93, 92%로 가장 좋았으며 35℃에서는 생존하는 개체가 없었다.
온도 25℃에서 배추좀나방 2령 유충은 상대습도 60%에서 생육이 가장 좋았다. 사충율 역시 9%로 가장 낮았다. 배추좀나방의 유충을 10～100마리 정도를 한 용기에 넣고 사육하였을 때 90% 이상의 용화율을 보였다. 인공사료를 개선하기 위하여 급속 냉동시킨 식물을 분말로 만들어 인공사료 4에 배추잎 분말가루를 20% 첨가하여 3령 유충을 사육하였을때 유충의 생존율이 63.8%로 가장 높았다.
2. 과립병바이러스의 세포학적, 조직학적 특성 검정
최근 국내외적으로 곤충병원성 바이러스를 이용하여 농업해충 방제법을 개발 중에 있다.
이러한 관점에서 배추좀나방 과립병바이러스인 PxGV를 이용하여 바이러스유래 biopesticide를 개발하고자 하였다. 이를 위하여 개발 중에 있는 과립병바이러스(PxGV)가 농업해충인 배추좀나방에 침입한 후 일어나는 분자병리학적과정에 대한 연구에 초점을 두고 수행하였다. 배추좀나방으로부터 GeneFishing방법을 이용하여 GV-related immune gene을 탐색 하였다. 확보한 유전자중 Px-caspase, Px-calreticulin, Px-lebocin, Px-catalase, Px-NOS, Px-thioredoxin peroxidase을 구체적으로 클로닝하고 PxGv 감염이 후 발현패턴을 연구하였다.
3. 과립병바이러스의 특성 및 병원활성에 대한 검정
배추좀나방과립병바이러스는 핵다각체바이러스와 비교하면 원통형으로 1개의 뉴클레오캪시드가 포매된 전형적인 과립병바이러스 형태를 보였다. 과립병바이러스를 영기별로 처리한 결과 유충이 처리 후 3일째부터 사충이 일어나기 시작하였으며 1.0×10⁸ OBs/㎖ 이상 농도에서 1령과 2령에서는 80% 이상의 사충율이 일어났으나 3령 유충은 1.0×10⁹ OBs/㎖에서 나타났다. 4령에서는 농도가 낮은 처리에서는 대부분이 용화되었다. 배추좀나방 유충의 초기 먹이 소비의 큰 감소는 바이러스를 먹인 4령 유충에만 나타났다. 하지만 총 먹이소비는 바이러스를 섭식한 1, 2, 3, 4령 각각 93, 76, 53, 47%로 감소하였다. 바이러스 증식량은 2령에 104을 접종하였을 때 1.86 × 10⁹, 3령은 9.42 × 10⁸ , 4령은 증식기간이 짧기 때문에 조금 낮은 농도인 9.42 × 10⁸ 이였다. 더 높은 농도인 10⁵～10⁶ 도 104 에서와 같은 경향이었다
4. 환경조건이 배추좀나방과립병바이러스 병원활성에 미치는 영향
과립병바이러스의 기주식물 온도에 의한 , 영향, 보관조건 및 태양광선에 대한 불활성화는 기주 식물별로 배추좀나방 2령 유충을 접종한 후 바이러스를 1.0×10⁸ OBs/㎖를 살포한 결과 모든 작물에서 60% 이상의 살충율을 보였으며, 평균 살충기간도 7일 정도로 약해 증상도 보이지 않아 기주식물에 안정하였다.
과립병바이러스의 기주식물, 온도에 의한 영향, 보관조건 및 태양광선에 대한 불활성화는 기주 식물별로 배추좀나방 2령 유충을 접종한 후 바이러스를 1.0×10⁸ OBs/㎖를 살포한 결과 모든 작물에서 60% 이상의 살충율을 보였으며, 평균 살충기간도 7일 정도였다. 그리고 약해 증상도 보이지 않아 기주식물에 안정하였다.
온도 안정성은 60℃에서는 5분 이상을 가열했을 때 약 30% 정도의 병원성이 감소하였다.
80℃ 이상에서는 병원성을 완전히 상실하여 60℃ 이상에서 5분 이상 가열시 병원성이 떨어졌다. 40℃ 이하의 저온에서는 8시간 동안 장시간 처리했을 때도 바이러스 활동에는 크게 영향을 미치지 않았으나 60℃ 에서는 1시간 이상 경과할수록 병원성을 거의 상실하였다. 보관조건은 -20℃ 이하의 저온에 동결 보관하는 것이 6개월까지 병원성의 활력을 유지하였으며, 5℃에서는 60일 정도 까지는 병원성의 상실이 없었다. 그러나 상온이나 25℃, 15℃는 60일 이후부터 병원성이 급격히 떨어지기 시작하였다. 바이러스 살포 후 태양광선에 노출한 후 일별로 잎을 채취하여 2령 유충에 먹인 결과 온실과 비닐하우스에서 잎의 앞면 살포구의 경우 2일 경과부터 병원성을 상실하기 시작하였으나 뒷면과 전체에 살포한 것은 5일째부터 병원성이 상실되었다. 살충력은 표면이 14일에 50% 이하로 떨어졌으나 잎뒷면과 전체에 살포한 것은 60% 이상 유지되었다. 노지포장에서는 살포 면에 관계없이 2일부터 불활성화가 나타나기 시작하였다.
5. 배추좀나방과립병바이러스의 제형의 안정성 및 효과 검정
유묘 검정에서 무처리 피해엽율은 21일 후에 45.8%의 피해를 보였으나 1.0×10⁶에서는 25.8%, 1.0×10⁷,은 11.8%, 1.0×10⁸에서는 5.4%로 피해율이 낮아졌다. 1.0×10⁸에서 7일째 70%, 21일째에는 94.3%의 방제가를 보였다. 바이러스 살포농도에 따른 밀도변화는 무처리 보다 21일째에 접종밀도보다 1.9배가 증가하였다. 그러나 바이러스를 1.0×10⁸, 10⁹, 10¹⁰ OBs/㎖ 농도로 살포한 구에서는 0.6배, 0,2배, 0.07배로 배추좀나방 밀도가 낮아졌다. 바이러스 접종농도별로 피해엽율은 무처리에서 접종 3일째부터 6.0%의 피해를 보이기 시작하여 12일째에는 44.7%의 높은 피해율을 보였으나 1.0×10⁸에서는 각각 4.7%, 33.3%를 나타냈다. 노지포장에서 배추좀나방 사충수 변화 처리 3일째부터 사충이 시작되어 바이러스 농도가 높을수록 높은 사충을 보였다. 무처리에서는 12일까지 거의 죽지 않는데 비하여 1.0×10⁸에서는 19마리, 1.0×10⁹은 24마리, 1.0×10¹⁰에서는 27마리로 대부분의 배추좀나방이 죽어, 1.0×10⁸에서는 5일째 71.1%, 12일째에 88.9%의 방제가를 보였다.
입상수화제는 유채에서 10배에서도 약해가 나오지 않았지만 배추와 갓에서는 1정도의 약해가 나타나 시제품들은 100배 이상으로 사용해야 할 것으로 판단된다. 천적에 미치는 영향에서 는 칠레이리응애에 PxGV-SC 대해 10배와 20배에서는 영향을 주었지만 100배에서는 3일째에 23.3%, 500배에서는 5일째에 57.8%로 영향이 아주 낮았다. 으뜸애꽃노린재와 콜레마니진디벌은 WG 제제에서 약간 높은 독성을 보였으나 온실가루이좀벌과 황온좀벌에서는 SC에 비해 더 낮은 독성을 보여 천적 종류에 따라 제형별 독성은 차이가 있었다.
6. 배추좀나방 과립병병바이러스 제형화
환경 친화적인 해충방제제를 개발하였으며 과립병 바이러스의 제형화 연구를 통하여 인축 및 환경에 대한 독성시험을 통하여 제품의 안전성을 확보하였다. 기초 제형연구를 통하여 과립병바이러스에 사용가능한 부자재를 선발하여 다양한 제형에 대하여 검토하였다. 고상제형 중에는 입상수화제를 액상 제형 중에는 액상 수화제를 선택하여 처방을 검토하였으며, 제품의 약효를 증진시키기 위한 보조제로서 특정 무기산을 선발하였다. 선발된 부자재를 이용하여 액상수화제 및 입상수화제의 처방을 확립하였고 약효비교 시험을 수행하였다. 약효시험결과, 액상 수화제보다는 입상수화제가 우수한 효과를 보임에 따라 입상수화제를 선발하였다. 선발된 입상수화제의 안전성을 확보하고자 인축 및 환경에 대한 독성시험을 수행하였다. 원분과 제품 모두 인축독성에서는 저독성인 것으로 환경생태독성에서 는 어독성 Ⅲ급에 해당하는 것으로 나타나 제품개발에 문제가 없을 것으로 판단되었다.

Abstract ▼

Ⅱ. Research content and scope
RESULTS AND DISCUSSION
1. Artificial diet of Plutella xylostella for mass rearing.
This study was conducted to improve artificial diet of Plutella xylostella for mass rearing. The sizes of Plutella xylostella are 0.45mm on egg, 1.29mm on 1st larva, 3.1mm on 2n

Ⅱ. Research content and scope
RESULTS AND DISCUSSION
1. Artificial diet of Plutella xylostella for mass rearing.
This study was conducted to improve artificial diet of Plutella xylostella for mass rearing. The sizes of Plutella xylostella are 0.45mm on egg, 1.29mm on 1st larva, 3.1mm on 2nd, 4.65mm on 3rd, 8.57mm on 4th larva and 7.91mm on pupa and 4.96～ 4.97 on adults. The duration of oviposition is 2.8 dyas on preoviposition, 5.1 days on oviposition, and 6.9 days on postoviposition. The number of eggs laid a day was 48.7 and 263 individuals in total. The developmental periods were 8.3～9.9 days which was different by host and sex. The rate of pupation and hatchability were 88% and 84% in chinese cabbage, respectively. Host and oviposition preference was the best on chinese cabbage and feeding preference was 45.2%, 40.3% on chinese cabbage, and kale, respectively.
The 50% oviposition was 1.9 and 1.2 days on 20℃, 30℃days, respectively. The shorter period, the higher temperature. The temperature should maintain below 30℃ at least because the number of eggs laid and hatchability decreased abruptly above 30℃. Survival rates of larva were 93, 92% at 20℃and 25℃. There was not alive population at 35℃. The 2nd instar of Plutella xylostella was well developed on condition of 60% relative humidity at 25℃. In addition, mortality was also low as- 10 - 9%. The pupation was over 90% in 10～100 larva container. Plutella xylostella could not develop on estabilished artificial diet for Spodoptera litura and S. exigua. The mofified artificial diet could survive 36～45.8%, pupate 27.6～38.6% and emergence all of them. Artificial diet(No. 4) which add chinese cabbage powder 20% survive 63.8% on 3rd larva of Plutella xylostella.
2. Pathogenicity of Plutella xylostella granulovirus(PxGV) with biological agent
This experiment conducted to investigate pathogenicity of Plutella xylostella granulovirus(PxGV) which biological agent to reduce risk of synthetic pesticides. Plutella xylostella granulovirus was long oval shape and has a nucleocapsid. The larva begun to died from 3rd days after spray of Plutella xylostella granulovirus. The mortality was over 80% in 1st and 2nd instar on 1.0×10⁸ OBs/㎖ concentration of PxGV but in 3rd instar on 1.0×10⁹ OBs/㎖. The first instar which treated Plutella xylostella granulovirus died before third instar and longer development period than control treated. This trend was similar to 2nd and 3rd instar.
Consumption of artificial diet reduced greatly in 4th instar. The total consumption reduced 93, 76, 53, and 47% in 1st, 2nd, 3rd, and 4th instar which fed Plutella xylostella granulovirus. Artificial diet treated with PxGV 10㎕ at 10⁴～10⁶ OBs/㎖. Virus multiplication concentration was 1.86 × 10⁹ on 2nd, 9.42 × 10⁸ on 3rd, 9.42 × 10⁸ on 4th instar.
3. Screening of the GV-dependent up/down regulated genes from Plutella xylostella
The diamondback moth Plutella xylostella (DBM) is an important pest of agricultural crops. Furthermore, DBM has become resistant to conventional chemical insecticides. For these reasons our research group has initiated to find alternative control measures using a granulosvirus (GV). However, the molecular interactions between PxGV and the midgut cells are largely unknown. Thus, we have attempted to screen and identify various immune genes using GeneFishing approaches from P. xylostella after PxGV infection. It remains to be further investigated for elucidating the potential functions of these genes in GV-midgut interactions in the context of insect immune response against PxGV.
4. Cloning and expression profiles of a caspase from Plutella xylostella.
Caspase plays a key role in apoptosis. Here, we cloned a partial fragment of caspase (465 bp) from Plutella xylostella using PCR-based gene cloning method. Sequencing and BLAST analysis shows that it has identity to various insects such as Spodoptera frugiperda (87%), Bombyx mori (81%), Drosophila melanogaster (58%), Mus musculus (41%) and Homo sapiens (32%). Currently, we are in the middle of obtaining the full length cDNA using 5'-RACE and 3'-RACE.
5. Cloning and expression patterns of calreticulin in response to GV infection from the diamondback moth, Plutella xylostella
Calreticulin (CRT) plays pivotal roles in Ca(2+) homeostasis, molecular chaperoning, infection, inflammation, and innate immunity. In an attempt to study the involvement of CRT in antiviral immunity, the full length cDNA of calreticulin (PxCRT) was cloned from the diamondback moth, Plutella xylostella. It consists of 1708 bp with an open reading frame of 1197 bp, encoding 399 amino acids. The deduced amino acid sequence of PxCRT showed high identity with those of Galleria mellonella (87%), Bombyx mori (87%), Anopheles gambiae (76%) and Drosophila melanogaster (71%). RT-PCR analysis during developmental life cycle shows that highest expression of PxCRT mRNA was detected in pupae. Spatial expression pattern analysis indicates that it was highly expressed in silk gland. In addition, expression patterns of PxCRT mRNA in response to various immune elicitors were examined. PxCRT mRNA was slightly induced after 3 h of LPS treatment, whereas it was gradually increased from 3 h to 6 h and then decreased after 9 h of laminarin treatment. Finally, induction pattern analysis of PxCRT in response to PxGV infection during the initial infection periods (3～12 h) shows that it was induced at 3 h and 9 h in a biphasic manner. Long term analysis of PxCRT expression during the late infection periods (1 5 days) indicates ～ that it was gradually increased from day 3 to day 5. Taken together, PxCRT might play a role in antiviral immunity although it has to be further studied.
6. Cloning and partial characterization of lebocin precursor from Plutella xylostella
Lebocin is known to show activity against gram-negative bacteria. In an attempt to clone and partially characterize a lebocin precursor, the full length cDNA of lebocin precursor (Px-lebocin) was cloned from the diamondback moth, Plutella xylostella. Using a PCR-based cloning method, we got a partial fragment of Px-lebocin (735 bp). BLAST analysis shows that the deduced amino acid sequence of Px-lebocin has a similarity to Trichoplusia ni (42%), Bombyx mori (26%), and Caenorhabditis elegans (13%). Developmental RT-PCR analysis shows that highest expression of Px-lebocin was detected in both pupae and adult. Spatial expression pattern analysis shows that it was highly expressed in Malpighian tubule. In addition, expression patterns of Px-lebocin mRNA in response to various immune elicitors were examined. Px-lebocin mRNA was induced slightly induced after 3 h of LPS treatment, whereas it was gradually increased from 3 h to 9 h and then decreased after 12 h of laminarin treatment. Finally, induction pattern analysis of Px-lebocin mRNA in response to PxGV infection during the initial infection periods (3～12 h) shows that it was induced at 3 h and 9 h in a biphasic manner. Long term analysis of Px-lebocin precursor expression during the late infection periods (1～5 days) indicates that it was highly induced at 1 day. Based on the data presented above, Px-lebocin might be involved in immune response to LPS, laminarin or granulovirus in P. xylostella. Yet, it remains to be further studied whether Px-lebocin has an antiviral activity against PxGv.
7. Cloning and expression patterns of PxCatalase from Plutella xylostella.
Catalase(CAT) plays am important role in oxidative stress during host-pathogen interactions. In order to study the role of PxCAT in insect immunity, a partial fragment of PxCAT (771 bp) was obtained using PCR-based cloning method from the diamondback moth, Plutella xylostella. The deduced amino acid sequence of PxCAT has high identities to Drosorphila melanogaster (69%), Anopheles gambiae (69%), Homo sapiens (66%), and Bombyx mori (82%), respectively. Temporal expression pattern analysis indicates that highest expression of PxCAT mRNA was detected in adult. Spatial expression pattern analysis shows that PxCAT mRNA was highly expressed in silk gland. In addition, expression patterns of PxCAT mRNA in response to various immune elicitors were examined. PxCAT mRNA was slightly induced after 3 h of LPS treatment, whereas it was highly increased 12 h of laminarin treatment. Finally, induction pattern analysis of PxCAT mRNA in response to PxGV infection during the initial infection periods (3～12 h) shows that it was induced at 3 h and 9 h in a biphasic manner. On the other hand, long term analysis of PxCAT mRNA expression during the late infection periods (1～5 days) indicates that it was not dramatically induced. These data suggest that PxCAT might play a role in innate immunity in P. xylostella.
8. Cloning and partial characterization of NOS from Plutella xylostella.
Nitric oxide synthase (NOS) is known to play diverse functions in innate immunity in mammals and insects. Thus, we were interested in studying the potential role of NOS during the immune responses from the diamondback moth, Plutella xylostella. We have attempted to clone the full length cDNA of NOS (PxNOS) from the diamondback moth, Plutella xylostella. Yet, we got a partial fragment of PxNOS (1698 bp). The deduced amino acid sequence of PxNOS showed high identity [Menduca sexta (60%), Apis mellifer (59%) and Drosorphila melanogaster (49%)]. Developmental expression study shows that highest expression of PxNOS mRNA was detected in 2nd instar. Spatial expression pattern analysis indicates that it was highly expressed in Malpighian tubule. In addition, expression patterns of PxNOS mRNA in response to various immune elicitors were examined. Expression of PxNOS mRNA was induced slightly induced after 24 h of LPS treatment, whereas it was highly increased 24 h of laminarin treatment. The precise role of PxNOS in terms of innate immunity
9. Cloning and partial characteriazation of thioredoxin peroxidase from Plutella xylostella
Thioredoxin peroxidase (Tpx) is known to be involved in oxidative stress defense system after being exposed to a pathogen in both vertebrates and invetebrates. In an attempt to study the involvement of thioredoxin peroxidase in antiviral insect immunity, the full length cDNA of thioredoxin peroxidase (PxTpx) was cloned from the diamondback moth, Plutella xylostella. Using a PCR method, we obtained a partial fragment of PxTpx (585 bp). The deduced amino acid sequence of PxTpx has a high identity to Bombyx mori (90%), Apis melifera (79%) and Drosorphila melanogaster (77%), respectively. Developmental expression study shows that highest expression of PxTpx was detected in both pupae and adult. Spatial expression pattern analysis shows that it was highly expressed in Malpighian tubule and silk gland. In addition, expression patterns of PxTpx mRNA in response to various immune elicitors were examined. PxTpx mRNA was slightly induced from 3 h to 12 h of LPS treatment, whereas it was highly expressed at 3 h and then gradually decreased after laminarin injection. Finally, induction pattern analysis of PxTpx in response to PxGV infection during the initial infection periods (3～12 h) shows that it was slightly induced at 9 h post-infection, whereas it was not increased 5 day during the late infection periods (1～5 days). Based on the induction pattern of PxTpx in response to laminarin, PxTpx might play a role in innate immunity in P.xylostella.
10. To improve stabilization and control effect
This experiment was conducted to improve control effect use stabilization include host, temperature, preservation method, and sun light. The 2nd instar of Plutella xylostella inoculated by host crops and sprayed PxGV 1.0×10⁸ OBs/ . Mortality was over 60% in all host crops ㎖ and mortal periods were about 7 days. The chemical injury did not appear so PxGV stable on host crops.
When heating treated over 5 minute at 60℃ on PxGV, the pathogenicity reduced 30%. At over 80℃ treatment, the pathogenicity forfeited completely. The activity of PxGV could not affect on below 40℃ during 8 hours treatment but the pathogenicity forfeited almost on 60℃ during 1 hour treatment.
For long term preservation, the pathogenicity maintained till 6 months on below -20℃ and 60 days on 5℃. However, the pathogenicity went down rapidly at 25℃and 15℃ after 60 days.
PxGV sprayed on upper, down and all leaf side of kale. The sprayed leaf put on glass house, PVC house and field to take sunshine. The leaf collected and feed to Plutella xylostella. The pathogenicity forfeit from 2 days in upper sprayed leaf on glass and PVC house and from 5 days down and all sprayed leaf. The pathogenicity was inactivity from 2 days in field put leaf.
11. Control effect of granulovirus by formulation
Formulation was necessary to enlarge control agent of granulovirus.
The damaged leaves were 45.8% in control treatment, but 25.8% in 1.0×10⁶, 11.8% in 1.0×10⁷, 5.4% in 1.0×10⁸ on seedling bioassay. The protection value was 70%, 94.3% at 7 and 21 days on 1.0×10⁸.
PxGV strain between China and Korea was similar pathogenicity, but in Korea strain, mortality higher in all concentration.
The population fluctuation of Plutella xylostella decreased 0.6-, 0.2-, and 0.07-fold in 1.0×10⁸, 10⁹, and 10¹⁰ OBs/㎖ treatment, respectively, meanwhile those increased 1.9-fold after 21 days in none-treatment.
The damaged leaves were 44.7% in none-treatment plot but 33.3% in 1.0×10⁸ OBs/㎖ application plot.
Plutella xylostella died from 3 days after application of granulovirus. The higher concentration, the higher mortality. The number of dead Plutella xylostella was 19 in 1.0×10⁸ OBs/ application plot which 88.9% of protection ㎖ value after 12 days.
The mortality of Kaolin and Bentonite was 52%, and 47.2%, respectively. The prototype made from Kyoungnong coporation. PxGV-WG had the same effect with suspension, but PxGV-EC decreased mortality. The chemical injury appeared degree 1 on chinese cabbage and leaf mustard in 10-fold dilution, so recommend use at least 100-fold.
The bioassay was conducted for testing toxicity of PxGV formulation to effect of natural enemies. Phytoseiulus persimilis effect on PxGV-SC 10- and 20-dilution, but survival rate was 57.8% in 500-dilution at 5 days after application. On PXGV-WG, Aphidius colemani and Orius strigicollis appeared a little high toxicity, but Encarsia formosia and Eretmocerus eremicus had no toxicity.
12. Formulation of PxGV
The studies were undertaken to develop the environmentally friendly granulovirus insecticide through the establishment of formulation recipes and the evaluation of mammalian and fish toxicity. Recipes of various formulation types for granulovirus were evaluated by using selected co-formulants which are suitable for granulovirus formulation. Formulation types for the studies were suspension concentrate (SC) as liquid type and water dispersible granule (WG) as solid type and specific inorganic acid was selected as efficacy enhancer. Recipes of SC and WG were established by using selected co-formulants and WG showed better result than SC at efficacy studies. To evaluate the safety of granulovirus technical and WG, tests for mammalian and fish toxicity were conducted. Both granulovirus technical and WG showed low toxicity to mammalian and fish. These results suggest that the granulovirus can be formulated various formulation types and be developed as a product in consequence of the low toxicity to human and environment.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 4
• Summary ... 10
• 목차 ... 22
• 제1장 연구과제의 개요 ... 26
• 제1절 연구개발의 목적 및 필요성 ... 26
• 1. 연구개발의 목적 ... 26
• 2. 연구개발의 필요성 ... 27
• 가. 기술적 측면 ... 27
• 나. 경제.산업적 측면 ... 28
• 다. 사회.문화적 측면 ... 28
• 제2절 연구개발의 목표 및 내용 ... 30
• 1. 연구개발 목표 ... 30
• 2. 연구의 내용 및 범위 ... 31
• 3. 연구개발 추진 체계 ... 34
• 제2장 국내외 기술 개발 현황 ... 35
• 제1절 국내기술 현황 ... 35
• 제2절 국외기술 현황 ... 35
• 제3절 앞으로 전망 ... 36
• 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 37
• 제1절 배추좀나방의 안정화된 사육법 개발 ... 37
• 1. 서언 ... 37
• 2. 재료 및 방법 ... 38
• 3. 결과 및 고찰 ... 39
• 4. 결과요약 ... 48
• 제2절 과립병바이러스의 특성 및 병원활성에 대한 검정 ... 49
• 1. 서언 ... 49
• 2. 재료 및 방법 ... 49
• 3. 결과 및 고찰 ... 51
• 4. 결과요약 ... 56
• 제3절 PxGV 감염된 배추좀나방으로부터 면역유전자 탐색에 관한 연구 ... 57
• 1. 서언 ... 57
• 2. 재료 및 방법 ... 57
• 3. 결과 및 고찰 ... 58
• 4. 결과요약 ... 63
• 제4절 배추좀나방의 caspase 유전자 클로닝 및 발현양상에 관한 연구 ... 64
• 1. 서언 ... 64
• 2. 재료 및 방법 ... 64
• 3. 결과 및 고찰 ... 65
• 4. 결과요약 ... 70
• 제5절 배추좀나방의 calreticulin 유전자 클로닝 및 발현연구 ... 71
• 1. 서언 ... 71
• 2. 재료 및 방법 ... 72
• 3. 결과 및 고찰 ... 76
• 4. 결과요약 ... 80
• 제6절 배추좀나방의 lebocin 유전자 클로닝 및 발현연구 ... 82
• 1. 서언 ... 82
• 2. 재료 및 방법 ... 82
• 3. 결과 및 고찰 ... 84
• 4. 결과요약 ... 87
• 제7절 배추좀나방의 카타라제유전자의 클로닝 및 발현양상조사 ... 89
• 1. 서언 ... 89
• 2. 재료 및 방법 ... 89
• 3. 결과 및 고찰 ... 92
• 4. 결과요약 ... 94
• 제8절 배추좀나방의 NOS 유전자 클로닝 및 발현연구 ... 96
• 1. 서언 ... 96
• 2. 재료 및 방법 ... 96
• 3. 결과 및 고찰 ... 98
• 4. 결과요약 ... 101
• 제9절 배추좀나방의 thioredoxin peroxidase 유전자의 클로닝 및 발현양상 조사 ... 102
• 1. 서언 ... 102
• 2. 재료 및 방법 ... 102
• 3. 결과 및 고찰 ... 104
• 4. 결과요약 ... 107
• 제10절 환경조건이 배추좀나방 과립병바이러스 병원활성 ... 109
• 1. 서언 ... 109
• 2. 재료 및 방법 ... 109
• 3. 결과 및 고찰 ... 111
• 4. 결과요약 ... 116
• 제11절 배추좀나방 과립병바이러스의 제형의 안정성 및 효과검정 ... 117
• 1. 서언 ... 117
• 2. 재료 및 방법 ... 118
• 3. 결과 및 고찰 ... 120
• 4. 결과요약 ... 131
• 제12절 배추좀나방 과립병병바이러스 제형화 ... 133
• 1. 서 언 ... 133
• 2. 재료 및 방법 ... 133
• 3. 결과 및 고찰 ... 151
• 4. 결과요약 ... 173
• 제4장 목표달성도와 관련분야에서의 기여도 ... 175
• 제1절 목표 달성도 ... 175
• 1. 제 1 차년도의 연구개발 목표와 평가의 착안점 및 달성도 ... 175
• 2. 제 2 차년도의 연구개발 목표와 평가의 착안점 및 달성도 ... 176
• 3. 제 3 차년도의 연구개발 목표와 평가의 착안점 및 달성도 ... 177
• 4. 최종 평가의 착안점 및 목표 달성도 ... 177
• 제2절 관련 분야에의 기여도 ... 178
• 1. 기술적 측면에서의 기여도 ... 178
• 2. 학문 발전에의 기여도 ... 179
• 3. 경제, 산업적 측면에의 기여도 ... 180
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 181
• 제1절 추가연구의 필요성 ... 181
• 1. 곤충 바이러스의 다른 해충으로 추가 연구의 필요성 ... 181
• 2. 포장 및 타 작물로의 확대의 필요성 ... 181
• 제2절 기업화 추진방향 ... 181
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 182
• 제1절 독일 바이엘 크롭 사이언스 방문 ... 182
• 제2절 중국 농업과학원 산하 생물농약 연구기관 방문 ... 185
• 제7장 참고문헌 ... 191
• 끝페이지 ... 204