초록 ▼

○ 연구결과
백강균 자실체 추출물은 항보체활성, 형액항응고 활성, TPA-induced superoxide (O₂^-) generation 저해활성, mitogen 활성과 macrophage 활성능을 나타내었다. 정제된 활성획분의 활성 본체는 neutral sugar와 uronic acid sugar로 구성된 polysaccharide 이며 분자량이 250,000Da을 나타내었음을 확인하였다. 백강균 자실체를 국수, 제빵 및 음료에 적용한 결과 자실체는 국수 및 제빵에 응용시 제품의 특성을

○ 연구결과
백강균 자실체 추출물은 항보체활성, 형액항응고 활성, TPA-induced superoxide (O₂^-) generation 저해활성, mitogen 활성과 macrophage 활성능을 나타내었다. 정제된 활성획분의 활성 본체는 neutral sugar와 uronic acid sugar로 구성된 polysaccharide 이며 분자량이 250,000Da을 나타내었음을 확인하였다. 백강균 자실체를 국수, 제빵 및 음료에 적용한 결과 자실체는 국수 및 제빵에 응용시 제품의 특성을 저하시키지 않음이 밝혀 졌으며, 자실체 추출물은 음료에 첨가가 가능한 것으로 조사되었다. 백강균 균사체 및 자실체의 생간에 필요한 최적배지는 현미:번데기 분말 비율이 90:10 임이 밝혀졌으며, 공기의 유입이 차단된 상태에서 20℃가 최적 배양조건으로 나타났다. 대량생산시 배양병의 수분함량이 60%일 때 가장 많은 자실체를 생산하였으며 종균방법이 확립되었다.

Abstract ▼

Ⅳ. The results
Chemical properties and physiological activities of the freeze-chied synnemata of Heauveria bassiana were examined. The proxin1ate analysis exhibited that the synnenmata consisted n1ainly of carbohydrate (49.86%), protein (11.36%) and moisture content of 30.64%. It contained a low

Ⅳ. The results
Chemical properties and physiological activities of the freeze-chied synnemata of Heauveria bassiana were examined. The proxin1ate analysis exhibited that the synnenmata consisted n1ainly of carbohydrate (49.86%), protein (11.36%) and moisture content of 30.64%. It contained a low content of cnlde ash (4.76%) and fat (3.38%). The carbohydrate was composed mainly of mannose (52.3 %), galactose (31.5%) glucose (13.2%) and rhamnose (3%). Trace amount of arabinose, xylose and fructose were present. Major amino acids in the synnemata were glutamic acid, glysine, aspartic acid, argine, threonine, alanine, valine, leucine, lysine and as partic acid with amount of 30.42, 25.22, 17.17, 15.12, 12.65, 15.23, 12.47, 11.47, 14.24, and 17.17 mg/g, respectively.
Among extracts from the synnelnata, the hot-vlater extract showed 6 7% of anti-complementary activity compared to that of positive control, followed by ethylacetatc extract (17%) and methanol extract (15%). It also connibuted to anti-coagulant activity with 55 sec of coagulating time. This fraction exhibited the most potent intestinal immune system modulating activity. The metlmnol extract revealed the highest inhibition activity (25%) on the TPA-induced superoxide(O₂^-) generation, followed by hot-water extract(18%) and ethylacetate extract(10%).
To analyze bioactive substances from hot-water extract immune system modulating activity such as mitogen activiting activity and macroplmge activating activity were measured. Tlle fraction exhibited about 80% of mitogen activiting activity compared to its positive control, LPS(1mg/ml) and it showed almost same active in macrophage activating activity.
The active substances exhibiting immune system modulating activity were purified from hot vlater extract by using ion exchange chromatngraphy and gelfiltration on TTPLC. Chemical composition of active fraction were analysed after ion exchange chromatography. This compound was polysacchariede composed of neutral sugar and uronic acid sugar enxibiting its content as 96.16% and 3.84%, respectively. The polycarbohydrases were consisted mainly of mannose, galactnse and glucose and trace amount of ramnose and arabinose were detected. The purified polysaccharide exhibited its molecular mass about 250,000 Da by using gclfiltraion on HPLC.
Dry-noodle were made with wheat flour which was mixed with synnemata of Beauveria bassiana flour at the level of 1.0%, 3.0% and 5.0%. No significant colour difference was found between dry-noodle made with the mixture flour with synnen1ata at 1% and 3% and dry-noodle made with 100% wheat flour. Similar results were found in the case of cooked-noodle. In the same way, no differences were found in weight, volume, ratio of water absorption, and turbidity of soup after addition of synnemata of Beauveria bassiana flour to cooked-noodleat at 1%, 3%. Breaking force of dry-noodle with 5% of synnelnata of Beauveria bassiana flour was lower than that of 100% wheat flour noodle. Hardness of cooked-noodle blended with synnemata of Beauveria bassiana flour at 5% was higher than that of 100% wheat flour noodle.
No differences were found in whiteness between bread with synnemata of Beauveria bassiana flour at 1%, 3% and 100% wheat flour bread, but whiteness 5% of synnemata bread was lower than that of 100% wheat bread. The yellowness of bread with synnemata was higher than that of 100% wheat flour bread at level of 1%, 3% and 5% addition. The hardness of bread blended with synnemata of Beauveria bassiana flour at 1% was lower than that of 100% wheat flour bread. but that 3% and 5% addition decreased hardness compared to that of 100% wheat flour bread.
Hot water extract was added to beverage model to test its application. Browness increased as the concentration of extract increased to 25% and pH and yellowness alse increase in this range of addition. On the contrary, whiteness decreased by the addition of synnemata extract to model beverage. Preference on colour was maximum at 15%, 20% and 25% of extract. The addition of extract at 15% exhibited maximum preference on taste and flavor. From the result 15% addition of hot water extract reveals as the optimum level in its use for beverage. This beverage could be stored at 5℃ without change of L, a- and b-value.
Unhulled barley and brown barley were selected as carbon sources for the production of Beauueria bassiana mycelia, and maximum production was found at the ratio of unhulled barley: A chrysalis powder or brown barley: chrysalis powder as 90:10. beer dregs, soybeen dregs and yolk powder did not increase the production of mycelia. At this ratio of 90:10 inorganic salts had no effect on the formation of mycelia.
Brown barley was identified as a sole carbon source for the fonnation of synnemata of Heauveria bassiana. Maximum production was found at the ratio of brown barley: cluysalis powder as 90:10. yolk powder could be used as a nirtogen source instead of chrysalis powder. Inorganic salt exhibited no effects. Aeration was critical factor for the production of synnelnata. In culture bottle the formation of synnelnata was observed only at low concentration of oxygcn. Optimum temperature and moisture contcnt was dctennined as at 20℃ and 90%, respectively.
The production of spore on brown barley media was tested at different moisture content bctween 50 and 90%. Optimum moisture contcnt was determined as 70%, and 4.08×10⁸ of spore were found at this level. However, maximum production of synemeta was observed at 60% of moisture and 4.01×10⁸ inoculation. 3.5g of synnemata was produced in this condition. Addition of 8% of bran the yield of synnemata increased to 4.5g
The data shown in the present study indicated that the extract of Beauueria bassiana synnemata contains some healthful chemical ingredients and it could provide beneficial physiological activities. These features of the synnemata should draw attention from food industry as well as other industrial fields.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 10
• CONTENTS ... 16
• 목차 ... 22
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 28
• 제1절 연구개발의 목표 ... 28
• 제2장 국내ㆍ외 관련기술의 현황 ... 34
• 제1절 국외연구동향 ... 34
• 제2절 국내 연구동향 ... 34
• 제3장 연구개발 수행내용 및 결과 ... 38
• 제1절 백강균의 생리활성 탐색 및 정제 ... 38
• 1. 서 론 ... 38
• 2. 재료 및 방법 ... 38
• 가. 백강균의 생리활성 탐색 ... 38
• 나. 생리활성 측정 방법 ... 38
• 1) 혈맥 항응고 ... 38
• 2) 유리 라디칼 생성 억제 ... 39
• 3) 항보체활성 ... 39
• 4) 장관면역 활성 측정 ... 39
• 5) 대식세포 활성 측정 ... 39
• 6) 임파구 활성 측정 ... 40
• 7) 세포 독성 평가 (SRB assay) ... 40
• 다. 백강균 자실체의 면역활성물질의 검색 및 정제 ... 40
• 1) 면역활성화물질의 추출 ... 40
• 2) 일반 성분 분석 ... 41
• 3) 구성당 분석 ... 41
• 4) 면역증강 활성 측정 ... 42
• 5) 면역 활성화 다당의 분리 및 정제 ... 42
• 3. 결과 및 고찰 ... 44
• 가. 백강균 자실체 및 균사체의 일반분석 ... 44
• 1) 백강균 자실체 및 균사체의 일반성분분석 ... 44
• 2) 자실체의 무기질 조성 ... 45
• 3) 자실체 아미노산 조성 ... 45
• 4) 자실체 구성당 조성 ... 45
• 나. 생리활성 ... 45
• 1) 추출조건별 생리활성(Ethanol, Methanol, Hot water extraction) 탐색 ... 45
• 2) 혈액 항 응고 활성측정 ... 46
• 3) 유리 라디칼 생성 억제 ... 47
• 4) 장관면역 활성 측정 ... 48
• 5) 항보체 활성 ... 49
• 6) 대식세포 활성 측정 ... 51
• 7) 면역활성 측정 ... 51
• 8) 세포 독성 평가 (SRB assay) ... 53
• 다. 생리활성물질 추출 및 정제과정 연구 ... 53
• 1) Anion exchange chromatography ... 53
• 2) 면역 활성 분획의 순도 확인 ... 56
• 3) Gel filtration chromatography ... 58
• 4) 정제된 immuno-stimulating 물질의 특성분석 ... 60
• 제2절 백강균 균사체 및 자실체의 식품 소재화 ... 64
• 1. 서 론 ... 64
• 2. 재료 및 방법 ... 64
• 가. 자실체 및 균사체 첨가에 따른 제빵 실험 ... 64
• 1) 일반성분분석 ... 64
• 2) 자실체 및 균사체 분말의 색도 ... 64
• 3) 복합분의 제조 ... 64
• 4) 제빵시험 ... 65
• 5) 색도측정 ... 65
• 6) 제빵특성 ... 65
• 7) 조직감의 측정 ... 65
• 나. 자실체 및 균사체첨가에 따른 제면실험 ... 66
• 1) 일반성분분석 ... 66
• 2) 복합분의 제조 ... 66
• 3) 백강균 균사체, 자실체 - 건면 및 조리면의 제조 ... 66
• 4) 백강균 균사체와 자실체 - 건면 및 조리면의 색도의 색도측정 ... 66
• 5) 백강균 - 건면의 조리시험 ... 67
• 6) 조직감의 측정 ... 68
• 다. 자실체 분말을 미용한 음료제조와 품질특성 ... 69
• 1) 재 료 ... 69
• 2) 음료제조 ... 69
• 3) pH ... 69
• 4) 당도 ... 69
• 5) 총당 ... 69
• 6) 갈색도 ... 70
• 7) 색도 측정 ... 70
• 8) 관능검사 ... 70
• 9) 통계적 분석 ... 70
• 3. 결과 및 토의 ... 70
• 가. 균사체 첨가 제빵실험 ... 70
• 1) 일반성분분석 ... 70
• 2) 균사체 분말의 색도 ... 71
• 3) Mixograph에 의한 반죽의 물리적 성질의 측정 ... 71
• 4) 빵의 색도 ... 72
• 5) 제빵특성 ... 73
• 6) 빵의 조직감 ... 74
• 나. 균사체 첨가에 따른 제면실험 ... 75
• 1) 백강균 균사체 - 건면의 색도 ... 75
• 2) 백강균 균사체 - 조리면의 색도 ... 75
• 3) 백강균 균사체 - 면의 조리특성 ... 76
• 4) 백강균 균사체 - 면의 조직감 ... 78
• 다. 자실체 첨가에 따른 제빵 실험 ... 80
• 1) 일반성분분석 ... 80
• 2) 자실체 분말의 색도 ... 80
• 3) 빵의 색도 ... 80
• 4) 제빵특성 ... 81
• 5) 빵의 조직감 ... 82
• 라. 자실체 첨가에 따른 제면실험 ... 82
• 1) 일반성분분석 ... 82
• 2) 백강균 자실체 - 면의 색도 ... 83
• 3) 백강균 자실체 - 면의 조리특성 ... 84
• 4) 백강균 자실체 - 면의 조직감 ... 85
• 마. 백강균 자실체 추출물을 이용한 음료개발 ... 86
• 1) 백강균 자실체 추출액의 품질특성 ... 86
• 2) 음료의 품질특성 ... 87
• 3) 음료의 관능검사 ... 88
• 4) 음료의 저장실험 ... 88
• 제3절 백강균 자실체 생산 및 배양의 최적화 ... 92
• 1. 서론 ... 92
• 2. 재료 및 방법 ... 92
• 가. 백강균의 자실체 대량생산에 적합한 경제적 배지 성분의 선발 ... 92
• 1) 탄소원의 영향 ... 92
• 2) 질소원의 영향 ... 93
• 3) 무기질의 영향 ... 93
• 나. 백강균의 자실체 대량생산에 적합한 경제적 배양 조건의 확립 ... 93
• 1) 호기조건에 따른 검토 ... 93
• 2) 온도의 영향 ... 93
• 3) 수분함량의 영향 ... 93
• 4) 빛에 의한 영향 ... 94
• 다. 효과적인 종균 생산방법 선정 ... 94
• 1) 무성포자의 접종에 의한 자실체 형성 ... 94
• 2) 액체배양에서 생산된 균사체 접종에 의한 자실체 형성 ... 94
• 3. 결과 및 토의 ... 94
• 가. 백강균의 균사체 대량생산에 적합한 경제적 배지선발 ... 94
• 1) 균사체 생산에 적합한 탄소원의 선정 ... 94
• 2) 균사체 생산에 적합한 질소원의 선정 ... 95
• 3) 균사체 생산에 적합한 무기염류원의 선정 ... 95
• 나. 백강균의 자실체 대략생산에 적합한 경제적 배지선발 ... 96
• 1) 자실체 생산에 적합한 탄소원의 선정 ... 96
• 2) 자실체 생산에 적합한 질소원의 선정 ... 96
• 3) 자실체 생산에 적합한 무기염류원의 선정 ... 96
• 4) 자실체 생산에 적합한 배양온도의 선정 ... 97
• 다. 백강균의 자실체 대량생산에 적합한 경제적 배양조건의 확립 ... 97
• 1) 자실체 형성에 필요한 최적의 호기적 조건 확립 ... 97
• 2) 자실체 형성에 필요한 최적의 온도 조건 확립 ... 98
• 3) 자실체 형성에 필요한 최적의 수분함량 조건 확립 ... 99
• 4) 자실체 형성에 필요한 최적의 조사조건 확립 ... 99
• 5) 백강균의 자실체 대량생산에 적합한 경제적 배지조건 확립 ... 100
• 라. 효과적인 종균 생산방법 선정 ... 100
• 1) 무성포자의 접종에 의한 자실체 형성 ... 100
• 2) 액체배양에서 생산된 균사체 접종에 의한 자실체 형성 ... 104
• 제4절 연구성과 ... 105
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 108
• 제1절 연구개발목표의 달성도 ... 108
• 제2절 기여도 ... 109
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 112
• 제1절 기대효과 및 활용방안 ... 112
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술점보 ... 114
• 제1절 동충하초의 국외 연구현황 ... 114
• 제2절 동충하초의 국내 연구현황 ... 115
• 제7장 참고문헌 ... 116
• 끝페이지 ... 121