초록

○ 연구결과
국내의 건강한 모유 수유아로부터 9,11-CLA 생산능이 높은 Bifidobacterium breve 두 균주를 screening하여 이를 성공적으로 dairy starter로 개발하였다. 이 균주들을 사용하여 단독 또는 현재 발효유 제조에 사용하고 있는 유산균과 병용하여 요구르트 발효에 사용하였을 때, 다량의 CLA가 함유된 요구르트를 생산할 수 있었다. 한편 이들 CLA 생산 균주를 대량 생산하여 동결건조 균체를 제조하였으며, 이 건조 균체에 의해서도 CLA 생산이 성공적으로 이루어졌다.

Abstract ▼

III. Major Results and Recommendation
Among the screened bifidobacteria from human origin, 10 strains showed CLA producing capacity in skim milk medium. Bifidobacterium breve LMC 017 and LMC 220 showed highest CLA producing ability at the level of 1.54 mM and 1.37 mM 9,11-CLA, respectively, from

III. Major Results and Recommendation
Among the screened bifidobacteria from human origin, 10 strains showed CLA producing capacity in skim milk medium. Bifidobacterium breve LMC 017 and LMC 220 showed highest CLA producing ability at the level of 1.54 mM and 1.37 mM 9,11-CLA, respectively, from 2mM linoleic acid in MRS broth. When the two B. breve strains were incubated with linoleic acid, monolinolein, dilinolein, and 50% and 90% monoglyceride of safflower oil, respectively, the higher conversion of linoleic aicd to CLA was observed with monolinolein and 90% monoglyceride of safflower oil. Aerobic culture condition showed almost same CLA production with anaerobic condition by the B. breve strains in MRS media.
When B. breve LMC 017 was incubated with Streptococcus thermophillus and Lactobacillus acidophillus, commercial dairy starter cultures, 61.4 mg/100 ml of 9,11-CLA was produced in yoghurt for 9 hr fermentation and 12 hr storage with 0.5% monoglyceride of safflower oil. In the case of B. breve LMC 220 incubated with Streptococcus thermophillus and Lactobacillus acidophillus, the production of 9,11-CLA showed 95.0 mg/100 ml in yoghurt for 9 hr fermentation and 12 hr storage with 0.5% monoglyceride of safflower oil.
When the harvested cells of B. breve LMC 017 and 220 were reacted with free linoleic acid in buffer system, respectively, the highest conversion of linoleic acid to CLA was observed at pH 5.5. and the higher production of 9,11-CLA was observed with monolinolein. Freeze dried cells harvested from culture media containing lactose 30g, peptone 5g, casitone 20g, yeast extract 5g, monopotasssium phosphate 1g, dipotasssium phosphate 2g, ammonium citrate 2g, calcium carbonate 1g, L-cysteinㆍHCl 0.5g, and Tween 80 1g per 1 L showed high CLA producing ability.

목차 Contents

• 제출문 ... 1
• 요약문 ... 2
• SUMMARY ... 4
• CONTENTS ... 6
• 목차 ... 7
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 9
• 제1절 연구개발의 목적 ... 9
• 제2절 연구개발의 필요성 및 범위 ... 9
• 1. CLA의 생리활성과 기능성 물질로서의 의의 ... 9
• 2. CLA 함유 발효 유제품 개발의 필요성 ... 9
• 3. CLA 생산 미생물 균주 개발과 이를 이용한 발효 유제품 및 활용기술 개발의 중요성 ... 10
• 4. 연구개발의 범위 ... 11
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 12
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 14
• 제1절 연구수행 방법 ... 14
• 1. CLA 분석조건의 최적화 및 시료의 CLA 함량 분석 ... 14
• 가 . CLA 분석조건의 최적화 ... 14
• 나. 국내산 우유와 발효유의 CLA 함량 분석 ... 14
• 다. CLA 생산 균주의 CLA isomer 생산 pattern ... 15
• 2. CLA 생산균주 screening 및 동정 ... 15
• 가. CLA 생산균주 screening ... 15
• 나. CLA 생산 균주 동정 ... 15
• 3. Bifidobacterium breve 균주의 CLA 생산 특성 ... 16
• 가. 배지 종류에 따른 B. breve 균주의 생육과 CLA 생산 ... 16
• 나. CLA 생산 B. breve 균주의 기질 이용성 ... 18
• 다. 기질 첨가량에 따른 B. breve 균주의 CLA 생산능 ... 18
• 4. 혼합배양에 의한 요구르트 제조 ... 18
• 가. 상업용 유산균 starter 선발 ... 20
• 나. 혼합배양 조건과 CLA 함유 요구르트 제조 ... 20
• 5. CLA 생산 Bifidobacterium breve 균주의 활용 ... 20
• 가. B. breve 균체에 의한 CLA 생산 조건 ... 20
• 나. Bifidobacterium breve 균체 생산용 배지 ... 21
• 다. B. breve의 동결건조 균체에 의한 CLA 생산 ... 21
• 제2절 연구수행 내용 및 결과 ... 22
• 1. CLA 분석조건의 최적화 및 시료의 CLA 함량 분석 ... 22
• 가. CLA 분석조건의 최적화 ... 22
• 나. 국내산 우유와 발효유의 CLA 함량 ... 23
• 2. CLA 생산균주 screening ... 23
• 가. 한국인 유래 Bifidobacterium 분리 균주와 공시 Bifidobacterium 균주로부터 CLA 생산균주 screening ... 23
• 나. 상업용 dairy starter로부터 CLA 생산균주 screening ... 28
• 다. CLA 생산 Bifidobacterium sp. 균주의 동정 ... 28
• 3. CLA 생산 균주의 CLA isomer 생산 pattern ... 32
• 4. Bifidobacterium breve 균주의 CLA 생산 특성 ... 36
• 가. 배지 종류에 따른 B. breve LMC 017 및 LMC 220 균주의 CLA 생산능과 생육특성 ... 36
• 나. CLA 생산 B. breve의 기질 종류에 따른 CLA 생산능 ... 37
• 다. 기질 첨가량에 따른 B. breve의 CLA 생육과 CLA 생산 ... 42
• 5. 혼합배양에 의한 CLA 함유 요구르트 제조 ... 45
• 가. 상업용 starter로부터 혼합 배양 균주 선발 ... 45
• 나. 호기적 발효조건 검토 ... 49
• 다. 혼합배양에 의한 요구르트 발효시 CLA 생산 ... 51
• 라. 혼합배양에 의한 요구르트 발효시 기질 첨가량에 따른 CLA 생산 ... 57
• 6. Bifidobacterium breve 균체에 의한 고순도 CLA 생산 ... 63
• 가. pH에 따른 CLA 생산 ... 63
• 나. 기질 종류에 따른 CLA 생산 ... 63
• 다. Culture age에 따른 고순도 Active CLA 생산 ... 65
• 7. Bifidobacterium breve의 동결건조 균체의 생산 및 그 활용 ... 68
• 가. B. breve의 균체 생산을 위한 배지 조성 ... 68
• 나. B. breve의 동결건조 균체에 의한 CLA 생산 ... 70
• 제4장 참고문헌 ... 73
• 끝페이지 ... 76