초록 ▼

IV. 연구개발 결과 및 활용에 대한 건의
1. 제1세부과제 : 콩 불마름병 저항성 유전분석 및 내병성 콩 계통 육성
가. 콩 불마름병 유전자 탐색을 위한 분자유전자지도 제작
1) 수원157 X 단백콩 집단의 유전자 지도 제작을 위하여 20개 연관군 가운데 158개의 SSR마아커를 선정하여 모부본간 DNA변이를 조사하였으며, 그 가운데 모부본간 polymorphism을 보이는 것은 93종으로서 전체적으로 59%를 나타내었다.
2) 모부본간(수원157, 단백콩) polymorphism이 보이고 있는 93종의 SS

IV. 연구개발 결과 및 활용에 대한 건의
1. 제1세부과제 : 콩 불마름병 저항성 유전분석 및 내병성 콩 계통 육성
가. 콩 불마름병 유전자 탐색을 위한 분자유전자지도 제작
1) 수원157 X 단백콩 집단의 유전자 지도 제작을 위하여 20개 연관군 가운데 158개의 SSR마아커를 선정하여 모부본간 DNA변이를 조사하였으며, 그 가운데 모부본간 polymorphism을 보이는 것은 93종으로서 전체적으로 59%를 나타내었다.
2) 모부본간(수원157, 단백콩) polymorphism이 보이고 있는 93종의 SSR marker를 이용하여 79개의 SSR marker의 유전자형을 결정하였다.
3) 유전자형 분리조사 자료를 MAPMAKER 3.0 프로그램을 이용하여 유전자지도를 제작한 결과, 69개의 마아커가 18개의 연관군으로 분류되었으며, 두 marker간의 간격은 13.0cM으로 세밀한 유전자 지도를 제작하였다. 7개의 MARKER로 구성된 LGD2는 85.5cM, 8개의 marker로 구성된 LGH는 134.4cM이었다. 그리고, Satt426등 SSR marker는 연관되어 있지 않았다.
나. 콩 불마름병 저항성 유전 분석
1) 콩불마름병에 감수성인 수원157호와 저항성인 단백콩간의 교배를 통해 얻어진 369개체의 F2 집단을 온실에서 파종하여 콩 개체간의 DNA를 추출한 후 콩 불마름병 병원균주 OCS-F 계통을 가지고 저항성 반응의 차이를 조사하였다. OCS-F 콩 불마름병 병원균에 대한 F2 개체간의 병반응 조사결과는 정규분포곡선을 그리고 있으며, hetero의평균값이 모본인 수원157호에 가까운 것으로 보아 감수성 유전자가 우성이며 저항성 유전자가 열성임을 알 수 있었으며, 유전적 분리 데이터와 병반응 데이터를 SAS를 이용한 single anova factor naova 분석결과 Satt372마커가 OCS-F 콩 불마름병 저항성에 15%의 높은 상관관계를 가지고 있음이 확인되었다.
2) 온실에서 모부본과 RILs에 콩불마름병 병원균주 6계통을 각각 접종하였을때, 각 군주에서 모부본간 PLP resistance score가 다양하게 나타났다. 수원157(BLP-susceptible)과 단백콩(BLP-resistance)에서 8ra에 대해서는 1.3과 1.8, LMG7403에 대해서는 4.2과 2.3의 score를 보여주고 있다. 이러한 결과를 볼 때 RIL 계통에서의 pathogenic variability of X. axonopodis를 예상할 수 있고, 또한 그 다양성을 확인할 수 있었다.
3) RILs계통들에 대한 불마름병 균계별 저항성 조사와 SSR마커들의 분리비 자료를 이용하여 SAS를 이용한 Single factor anova 분석을 한 결과 각 균계별로 연관군 D2에서 가장 높은 상관관계를 가지며 ocsF균에서는 LGD2인 Satt372마아커에서 43.5%의 상관값을 가지고 있었다.
4) LG(linkage group) D2/R에 속하는 Satt372 locus는 콩불마름병 병원균주 6계통 모두에 반응을 하고 있다. 또한 LMG7403에서는 18%, OCS-F 대해서는 43%의 수치를 보이고 있다. 이는 Satt372가 BLP resistance에 대한 QTL에 밀접하게 연관되어 있다는 것을 보여준다.
5) PI96188은 Xanthomonas campestris pv. glycines (8ra)에 대하여 다른 품종과는 확연이 다른 반응(novel response)를 보인다. 이것은 병의 침임에 대한 과민 반응의 일종으로 보이면 이 과민 반응도 식물의 자기 방어반응 중 하나로 생각되어 지고 있다. 그리고이 과민 반응을 일으키는 유전자는 기존의 불마름병에 대해서 저항성을 일으키는 기작과는 다르므로 기존의 불마름병저항성등이 더 이상 이용할 수 없을 때 대안으로 이용되어질 수 있을 것이라 생각되어진다. 하지만 아직은 마커로 사용되어지기에는 거리가 너무 멀리 떨어져 있으므로 더 근접한 마커를 찾는 것이 중요하겠다.
다. 주요 콩 유전자원의 불마름병원 균계별 저항성 조사
1) 콩불마름병균의 유전적 다양성을 조사하기 위하여, 본 과제 수행기간 매년 우리나라 전역에서 콩불마름병 시료를 채취, 병원균을 분리, 동정하였다. 또한 품종과 병원균 분화형과의 차이점을 알기 위하여 연구소 또는 시험장 단위의 포장에서 자연 발생한 이병시료를 채취, 병원균을 분리 동정하였다.
2) 병원균이 가지는 avrBS3 상동 유전자 profile과 분리된 품종간의 유의성을 알아보았다. 결과, 품종간에 avrBS3 상동 유전자 즉, 비병원성 유전자 profile은 차이가 많았으나 같은 품종에서도 유전자 profile이 다른 균들이 분리되어 품종과 유전자 profile 간의 유의적 관계는 발견하지 못하였다.
3) 몇몇 품종에서는 콩깍지 및 줄기에서도 병징을 발견, 균을 분리 할 수 있었다(그림 5). 콩깍지, 줄기 와 잎에서 각각 분리된 균들의 비병원성 유전자 profile을 비교 한 결과 같은 조직에서도 각기 다른 유전자 profile이 발견되어 조직에 대한 비병원성 유전자의 특이성은 발견되지 않았다.
4) 우리나라 전역에서, 또 각기 다른 품종에서 수집된 155종의 콩불마름병균의 비병원성 유전자 profile을 분석한 결과 6개의 group으로 나눌 수 있었다.
5) 각각의 group에서 대표균주를 선발하여 우리나라에서 수집한 몇몇 콩 품종에 접종한 뒤 그 병원성을 검정하였다. 국내 육성 품종들에 대하여 field에서 이병 정도를 조사하였다. 그 결과 푸른콩, 단백콩 등은 포장에서 저항성을 보였다.
6) 콩불마름병균의 비병원성 유전자의 기능을 알아보기 위하여 상동성을 보이는 avrBS3 유전자를 mutation 시킨 뒤 비병원성 유전자의기능을 knock out 시키기로 하였다. 결과 Xanthomonas axonopodis pv. glycines sdll018 strain에서 한 band가 mutation 되며 저항성 반응이 감수성으로 변함을 확인하였다.
7) 콩 불마름병균 (Xanthomonas campestris pv. glycines)의 chromosomal gene을 avrBS3 gene과 southern blotting을 통하여 상동성을 조사한 바, 고추반점병원세균인(Xanthomonas campestris pv. vesicatoria)의 비병원성 유전자인 avrBS3 유전자와의 상동성이 매우 높아 그 상동성을 이용하여 콩 불마름병균의 비병원성 유전자를 탐색하였다.
2. 제2세부과제 : 콩 불마름병 특이적 저항성 콩 유전자 분리 및 마커 개발
가. 신팔달 2호와 SS2-2를 근류균 처리군과 무처리군으로 나눠 본엽 3엽기때 sampling 하였다.
나. 신팔달 2호와 SS2-2에서 mRNA를 추출하여 SSH 방법에 의해 screening 하였다.
다. 77개의 SS2-2 specific clone들을 찾아 plasmid에서 insert를 확인했다.
라. 이들 DNA를 probe로 만들어 ³²P로 Northern Blot으로 재확인 했다.
마. 그 결과 vsp A, B gene의 발현이 많았고 이와 관련하여 vsp B promoter binding gene 과 transcript factor 들을 찾을 수 있었다. vsp gene의 잎별 발현량을 조사한 결과 SS2-2에서 더 오래 지속됨을 알 수 있었다.
바. gene 동정 결과 SS2-2 특이적인 JA dependent defence gene(vsp gene)을 찾았고 SA dependent defence gene(PR 1a)도 찾았으나 신팔달 2호에서 더 특이적인 것으로 나타났다. 이 결과를 토대로 SS2-2의 저항성은 Jasmonate와 연관이 있을 것으로 보이며 Salicylic acid와의 상호작용이 예상되어 각 개체에 SA와 JA를 각각 100㎛씩 처리하여 시간대별로 gene의 발현 정도를 판단코자 실험 중에 있으며 병원균 침입에 급속도로 JA level이 증가함에 따라 SAR(systemic acquired resistance)도 판단이 가능하리라 본다. 또한 병원균이 침입을 하게 되면 JA production이 증가하는 것이 아니라 JA sensitivity가 증가한다는 보고에 따라 실험에서 찾은 Homeodomain leucine zipper protein의 JA response domain의 affinity가 높아지는 것이 아닌가 추축해본다.
3. 제3세부과제 : 콩 불마름병 저항성관련 후보식물유전자 분석에 의한 마커 개발
가. 병 저항성 관련 유사 유전자를 이용한 분자표지 개발
1) 진균, 세균 바이러스 병해에 대한 식물의 저항성 유전자 구조를 분석하여 공통적 서열 부분의 서열을 이용하여 콩의 병해저항성유전자 유사체인 sSRGA3, 4, 5, 6, 7, 8 등 6종의 병해저항성 유전자 유사체를 익산나무콩으로부터 분리하였다. 이들 병해저항성 유전자 유사체의 염기서열은 GenBank에 등록된 염기서열 중 콩과 완두의 병해 저항성 단백질 상동 유전자의 부분 염기서열과 각각 82-96%의 높은 상동성을 나타내었다.
2) 감수성과 저항성 품종조합인 수원 157과 단백콩에 불마름병균 (X. campestris pv. glycines 8ra)을 접종하여 병해저항성 유전자 유사체의 발현 양상을 비교하였다.
병해저항성 유전자 유사체의 발현은 감수성과 이병성 품종에서 극히 낮았으며 불마름병균에 의해 발현이 유도되지 않았다.
3) 감수성과 저항성 품종조합인 수원 157 과 단백콩, 장엽콩과 SS2-2 등 2조합에 대한 생물적(yeast extract) 및 비생물적(paraquat, H2O2, 상처, UV)스트레스와 호르몬(ABA, SA, ethylene) 처리 하에서 이들 병해저항성 유전자 유사체의 발현 양상을 비교 분석하였는데 병해저항성 유전자 유사체의 발현은 어느 품종, 어느 처리조건에 의해서도 유도되지 않았다.
나. 세균 및 진균병 저항성관련 유전자의 발현 양상 비교를 통한 분자표지 개발
1) 병해 저항성 유도물질인 phytoalexin의 생합성에 관련된 phenylalanie ammonia-lyase (PAL)와 chalcone synthase (CS), isofavone synthatase (IFS)를 단백콩으로부터 분리하였다. 또한 진균과 세균병 저항성 관련 유전자인 PR-a, peroxidase (Per), SAM 등의 유전자를 분양 또는 분리하여 확보하였다.
2) 감수성과 저항성 품종조합인 수원 157과 단백콩에 불마름병균 (X. campestris pv. glycines 8ra)을 접종하여 병저항성관련 유전자 발현 양상을 비교하였다. 병저항성관련 유전자의 발현은 불마름병균에 의하여 유도되었으나 저항성 품종과 이병성 품종에서의 발현정도에 일반적으로 유사하였다.
3) 이들 병 저항성관련 유전자의 발현 양상을 감수성과 저항성 품종조합인 수원 157과 단백콩, 장엽콩과 SS2-2, 진주1호와 PI96188 등 3조합에 대한 생물적(yeast extract) 및 비생물적(paraquat, H2O2, 상처, UV)스트레스와 호르몬(ABA, SA, ethylene) 처리 하에서 비교 분석하였다. 감수성과 저항성 품종의 이들 병저항성관련 유전자의 발현 양상이 각 처리조건에서 유사하여 이들 유전자의 발현 양상과 불마름병 저항성 사이에는 뚜렷한 연관성이 관찰되지 않았다.
4. 활용에 대한 건의
가. 콩 불마름병 저항성 유전분석 및 내병성 콩 계통 육성
1) 최근 개발된 DNA의 자동염기서열 분석장치와 fluorescence-labelled primer set을 이용함으로써, 1회 전기영동에 의한 10여개 SSR 마커를 동시에 분석하여 식물의 유전자지도 작성을 신속하게 할 수 있는 기술 발달을 꾀할 수 있다.
2) 콩 세대진전을 위한 최적지인태국(년간 자연생태에서 3-4세대 진전 가능) Kasetschart 대학교의 Prof. Peerasak Srinives의 협조로 향후 주요 콩 집단의 SSD에 의한 세대촉진의 영속성을 확보함으로써 기타 육종 목표인 변화에 대처하여 우수한 품종을 조기에 육성이 가능하다.
3) 여러 가지 다양한 균계가 분화되고 있는 우리나라의 상황에서, 기존 육종방법으로 다양한 균계에 저항성을 나타내는 내병성 계통의 선발은 어렵다. 따라서 콩에서 DNA 마커에 의한 간접선발로 육종효율을 향상시킬 수 있는 기술을 도입할 필요가 있다.
나. 콩 불마름병 특이적 저항성 콩 유전자 분리 및 마커 개발
콩불마름병 저항성 유전자의 동정 결과 Jasmonic acid와 관련이 있는 것으로 추측됨에 따라 콩으로 Jasmonic dependent defence gene을 찾아 확인하여 그 mechanism을 분석 할 필요가 있다. 그리고 defence pathway에는 saliclic acid, jasmonic acid, ethylene이 각기 상호작용하며 일부분에서는 억제 작용을 일으키므로 콩에서 작용들을 분석할 필요가 있겠다. 본 실험 결과에 따라 Jasmonate defence pathway를 중심으로 단계별로 작용하는 세부적인 factor들과 signal molecule에 대한 연구가 더 수행되어야 할 것이다.
다. 콩 불마름병 저항성관련 후부식물유전자 분석에 의한 마커 개발
병해저항성 유전자 유사체와 병저항성관련 유전자의 발현과 불마름병 저항성간에는 뚜렷한 상관관계가 발견되지 않았으나 본 연구에서 확보된 이들 유전자들은 복합저항성 콩 품종 육성에 유용유전자 또는 표식자로 개발 소재로 활용이 가능하다.

Abstract ▼

Genetic Analysis for Bacterial Leaf Pustule Resistance for Improvement of Soybean Varieties
Bacterial leaf pustule (BLP) caused by Xanthomonas axonopodis pv. glycines is one of the most prevalent bacterial diseases in plants. Early symptoms are characterized by small,yellow-to-brown lesions with

Genetic Analysis for Bacterial Leaf Pustule Resistance for Improvement of Soybean Varieties
Bacterial leaf pustule (BLP) caused by Xanthomonas axonopodis pv. glycines is one of the most prevalent bacterial diseases in plants. Early symptoms are characterized by small,yellow-to-brown lesions with a raised pustule in the center. The lesions progressively merge to form large necrotic areas, which cause premature defoliation and subsequently a loss of grain yield. The first goal of this research was performed to identify quantitative trait loci (QTL) for resistance to BLP as well as to understand the resistance of soybean genotypes to different BLP isolates. Also, candidate gene analysis and differential display between resistant and susceptible soybean genotypes was performed to develop BLP-specific DNA markers.
1. Genetic Analysis for Bacterial Leaf Pustule Resistance for Improvement of Soybean Varieties
Quantitative trait loci (QTLs) for resistance to BLP in soybean (Glycine max [L.] Merr.) were identified using simple sequence repeat (SSR) markers, and the consistency of QTL detection across bacterial isolates as well as across greenhouse and field experiments were examined. Recombinant inbred lines (RILs) derived from a cross of BLP-susceptible 'Suwon157' and BLP-resistant 'Danbaekkong' were utilized to identify QTL conditioning the resistance to BLP with 76 SSR markers. For phenotypic analysis, six isolates of X. axonopodis were collected from different geographic origins (ocsF, ocsG and sd12178 from Korea, 8ra from USA, LMG7403 from Zambia, and LMG7404 from Zimbabwe). A combination of single-factor analysis of variance and multiple regression analysis revealed that three QTLs conditioned resistance to BLP in the field. Under greenhouse condition, one to four QTLs were revealed to be associated with resistance to each isolate. Satt372 on linkage group (LG) D2 was detected across six isolates under both greenhouse andfield conditions, an indication that resistance to BLP was mainly controlled by a single major gene tightly linked to Satt372. Several minor QTLson LG A1, C1, F, L, and O were also found depending on the isolates.
seventy-five different soybean cultivars were tested for the response to several different X.campestris pv. glycines races collected worldwide. Among tested cultivars, one cultivar, G. max cv. PI96188 showed very different response to all X. campestris pv. glycines races. It showed HR-like necrosis without halos but still carried pustules in the back of the necrosis symptom. Rxp gene conferring resistance to bacterial pustule was reported to be on linkage group (LG) D2. The gene controlling the novel response in PI96188 was mapped to whether the gene was the same as Rxp.
An RIL population from a cross of PI96188 and Jinju 1 was constructed. Five markers on LG D2 were not associated with novel response in PI96188, indicating that the gene controlling this specific response was different from Rxp. Further mapping study revealed that Sat_108 on LG O was identified as being associated with novel response in PI96188.
2. Molecular Genetic Analysis of Bacterial Pustule Disease Resistance in Hypernodulating Soybean Mutant
One of the most important disease of soybean in Korea is bacteria pustule, which is caused by Xanthomonas campestris pv.glycines.
SS2-2, hypernodulating soybean mutant, was isolated from Sinpaldal 2 treated with ethyl methanesulfonate (EMS) (Ha B.K. 2002). SS2-2 has more nodules than the wild type (Sinpaldal 2) and is resistant to Xanthomonas campestris pv.glycines, whereas the wild type is susceptive. The experiment was performed to analyze the resistance genes.
First, specific expressed genes were selected through Suppression Subtractive Hybridization (SSH) of Sinpaldal 2 and SS-2-2. specific genes in SS2-2 were selected.
To identify the genes, Northern blot was done with probes. This result showed that Vegetative Storage Protein(vsp A, vsp B), Homeodomain Leucine Zipper Protein, Glycine max repressor protein (Dr1), cytochrome P450 like_TBP and A.thaliana putative RING Zinc Finger Protein were SS2-2 specific and Glycine max PRla precursor (PRla) was Sinpaldal 2 specific. The expression of vsp A and vsp B genes, plant defence genes, was activated by jasmonic acid (JA). Homeodomain Leucine Zipper Protein has four DNA-binding sites of the soybean vsp B promoter: one in the JA response domain, two in the phosphate response domain, and one binding site in the sugar response domain (Zhijun Tang et al). cytochrome P450 is induced by SA and detoxify allelochemicals in response to plant defence (Li X et al). In addition, Dr1 and Ring Zinc Finger Protein have a role for transcription factor.
However, PR1a is responsive for Salicylic acid (SA) and is Sinpaldal 2 specific expression gene. Therefore the resistance of hypernodulating mutant soybean is related to JA defense pathway and may be induced by Rhizobacteria. After pathogen infection, JA induces the defence genes and suppresses SA-dependent defence gene.
3. Search for Molecular Markers for Bacterial Leaf Pustule Resistance through the Analysis of Disease resistance and Phathogenesis-Related Genes
Recent infestation of bacterial leaf pustule in Korea has recalled need for serious research efforts for the development ofo resistant variety. Molecular markers can aids conventional breeding programs for better returns from their efforts. However, lack of basic information on the mechanism of resistance to bacteial leaf pustule and any markers confers research priority on the development of efficient molecular markers. To develop molecular markers linked to pustule resistance, we took an approach to take advantage of molecular information on general and specific disease reistance in plants.
We cloned and examined expression patterns of disease resistance gene analogues sharing structural features in common with disease resistance genes and some well known pathogenesis-related genes in soybean varieties showing susceptibility or resistance to pustule.
Six resistance gene (R gene) analogues, pSRGA 2, 3, 4, 5, 6, 7 and 8, were cloned from lksannamul-kong. Their sequences shared 82 to 96% similarity with those reported from soybean and pea. Expression of R gene analogues was examined in the susceptible (Suwon 157) and resistant (Danbaek-kong) varieties. R gene expression was nill or very low, and was not induced by Xanthomonas campestris pv. glycines (8ra) in both varieties. R gene expression was not induced by biotic (yeast extract), abiotic (paraquat, H2O2, wounding, UV)stresses or phytohormone (ABA, SA, ethylene) treatments in the three sets of resistant (Danbaek-kong, SS2-2, PI96188) and susceptible (Suwon 157, Jangyeop-kong, Jinju 1) varients tested, indicating no involvement of R gene analogues in pustule resistance in soybean.
Expression of pathogenesis-related genes (PR-a, peroxidase, SAM; PR genes) and genes involved in phytoalexin production (phenylalanine ammonia-lyase (PAL), chalcone synthase (CS), isoflavone synthase (IFS); PP genes) were compared in the three sets of resistant (Danbaek-kong, SS-2, PI96188) and susceptible (Suwon 157, Jangyeop-kong, Jinju 1) varieties under biotic (yeast extract), abiotic (paraquat, H202, wounding, UV) stresses or phytohormone (ABA, SA, ethylene) treatment conditions. PR and PP gene expression was induced by Xanthomonas campestris pv. glycines (8ra) in the resistant and susceptible varieties, but with little difference in their expression patterns. Differential induction of these genes by the treatments was observe, but the patterns were little different in the three sets of resistant and susceptible varieties tested, indicating little relationship between these gene expression and resistance to pustule. The results indicate the existence of specific mechanism for pustule resistance and genes related to general disease resistance may play a minor role in pustule resistance in soybean.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 14
• CONTENTS ... 18
• 목차 ... 20
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 22
• 제1절 연구개발의 목적 ... 22
• 제2절 연구개발의 필요성 ... 22
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 24
• 제1절 국내·외 관련기술의 현황 ... 24
• 제2절 앞으로 전망 ... 26
• 제3절 기술도입의 타당성 ... 27
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 28
• 제1절 연구개발 방법 및 설계 ... 28
• 제2절 연구개발 추진체계 ... 29
• 제3절 연구내용 ... 30
• 제4절 연구결과 ... 34
• 1. 제1세부과제 : 콩 불마름병 저항성 유전분석 및 내병성 콩 계통 육성 ... 34
• 가. 콩 불마름병 유전자 탐색을 위한 분자유전자지도 제작 ... 34
• 나. 콩 불마름병 저항성 유전 분석 ... 40
• 다. 주요 콩 유전자원의 불마름병원 균계별 저항성 조사 ... 48
• 2. 제2세부과제 : 콩 불마름병 특이적 저항성 콩 유전자 분리 및 마커 개발 ... 57
• 가. 서론 ... 57
• 나. 재료 및 방법 ... 57
• 다. 결과 ... 57
• 1) subtraction library 제작 및 differential screening ... 57
• 2) 발현 차이를 보이는 유전자의 염기서열 결정 및 분석 ... 60
• 3) Northern Blot 결과 ... 64
• 4) Discussion ... 68
• 3. 제3세부과제 : 콩 불마름병 저항성관련 후보식물유전자 분석에 의한 마커 개발 ... 70
• 가. 병 저항성 관련 유사 유전자를 이용한 분자표지 개발 ... 70
• 나. 세균 및 진균병 저항성관련 유전자의 발현 양상 비교를 통한 분자표지 개발 ... 76
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 86
• 1. 제1세부과제 : 콩 불마름병 저항성 유전분석 및 내병성 콩 계통 육성 ... 86
• 2. 제2세부과제 : 콩 불마름병 특이적 저항성 콩 유전자 분리 및 마커 개발 ... 86
• 3. 제3세부과제 : 콩 불마름병 저항성관련 후보식물유전자 분석에 의한 마커 개발 ... 86
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 88
• 제1절 활용방안 ... 88
• 제2절 추가적 연구 ... 89
• 제6장 참고문헌 ... 90
• 끝페이지 ... 96