보고서 정보
주관연구기관 |
한국농수산대학 |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2011-12 |
과제시작연도 |
2010 |
주관부처 |
농림축산식품부 Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA) |
등록번호 |
TRKO201400026334 |
과제고유번호 |
1545002165 |
사업명 |
농림기술개발 |
DB 구축일자 |
2014-11-10
|
DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201400026334 |
초록
▼
Ⅳ. 연구개발결과
<제1세부과제 : 유전자원 확보 및 안정적 재배기술 개발>
느티만가닥버섯 유전자원은 국내외에서 111 균주를 확보하였다. 이들 균주의 수집 지역별 분포는 한국 자생균주 2균주, 중국 도입균주 35균주, 대만도입균주 13균주이고 나머지는 명확하지 않으나 일본에서 수집된 것으로 추정된다.
본 연구에서 수집한 유전자원은 91균주가 자실체를 형성하였다. 이중 HYM-031, -047,-109균주는 갓의 크기가 크고 갓 표면의 무늬가 없이 옅은 회갈색의 자실체를 형성하였다. 이들 균주는 쟂빛만가닥버섯(L.
Ⅳ. 연구개발결과
<제1세부과제 : 유전자원 확보 및 안정적 재배기술 개발>
느티만가닥버섯 유전자원은 국내외에서 111 균주를 확보하였다. 이들 균주의 수집 지역별 분포는 한국 자생균주 2균주, 중국 도입균주 35균주, 대만도입균주 13균주이고 나머지는 명확하지 않으나 일본에서 수집된 것으로 추정된다.
본 연구에서 수집한 유전자원은 91균주가 자실체를 형성하였다. 이중 HYM-031, -047,-109균주는 갓의 크기가 크고 갓 표면의 무늬가 없이 옅은 회갈색의 자실체를 형성하였다. 이들 균주는 쟂빛만가닥버섯(L. decastes)으로 판단된다. 느티만가닥버섯으로 판단되는 나머지 88균주 중10균주는 흰색 자실체를 형성하였고 나머지 78균주는 전형적인 느티만가닥버섯의 형태를 하고 있었다. URP prime로 RAPD-PCR을 수행하여 UPGMA 분석과 Neighbor-Joining 분석으로 유연관계를 분석한 결과 수집지역, 자실체의 형태 등 특징과는 관계가 없이 4그룹으로 나뉘었다.
많은 균주들이 유사도 100%를 보여 같은 균주가 다른 재배 농가 혹은 지역에서 널리 재배되고 있는 것으로 추정된다. 자실체 형태가 느티만가닥버섯과 달라 쟂빛만가닥버섯으로 추정되는 HYM-031, HYM-047, HYM-069, HYM-109균주도 outgroup로 분류되지 않고 cluster 안으로 포함되어 이들 종 역시 유전적으로 매우 밀접한 종으로 추정된다.
재배 생리학적 특성을 분석하기 위하여 한천배지에 배양한 결과 수집된 느티만가닥버섯 균의 균사생장은 RBA, MCM, MEA, PDA 순으로 좋았다.
느티만가닥버섯의 인공재배 조건을 검토한 결과 배양 일수는 전배양이 균사생장이 빠른 균사가 35일에서 균사생장이 늦은 균주는 55일 소요되었으며 후숙 배양까지 포함하여 총 80일이상 소요되었다.
균긁기를 하여 자실체 발생을 유도한 결과 발이소요일수는 7일에서 19일까지 균주별로 매우 다양하였으며 생육일수는 6일에서 14일까지 다양하였다. 종균을 접종하여 배양기간과 자실체생육일수까지 총 재배소요 기간은 96일에서 107일까지 소요되었다.
느티만가닥버섯 110균주를 인공재배 실험을 실시하여 자실체를 발생한 균주 중 HYM-008,HYM-064, HYM-089, HYM-092 등 4균주가 병당 150g 이상 생산하여 생산성이 매우 우수하였으며 특히 HYM-089 균주는 백색 자실체를 형성하는 균주임에도 150g 이상 생산하여 매우 우수한 것으로 판단된다. 또 HYM-009 등 17 균주도 130g 이상 생산되어 재배용 품종으로 아주 적합한 것으로 판단된다. 그러나 대부분의 균주가 병당 100g 이상을 생산하여 재배용 품종으로 문제가 없을 것으로 판단되었으나 HYM-022 등 23균주는 생산성이 매우 저조하여 100g에도 미치지 못하였다. 국내 야산에서 채집하여 분리한 HYM-069, HYM-109, HYM-110 균주는 100g 미만을 생산하였다.
LED 광원을 이용한 에너지 절감형 재배기술을 개발하기 위하여 파장이 다른 NUV(Wave length 405㎚), Blue(Wave length 460㎚), Green(Wave length 530㎚), Yellow(Wave length 590㎚), Red(Wave length 630㎚), White(Wave length 6500K) LED 광원을 조사하면서 균사생장 및 자실체 발생, 생육에 미치는 영향을 조사하였다.
적색광 처리구에서 느티만가닥버섯 균주는 암조건과 비슷한 균사생장을 보여 적색광은 광억제 효과는 없는 것으로 판명되었다. 그러나 청색광, 녹색광, 황색광 처리구에서는 약 10에서 20%의 광억제 효과를 보였다. 느티만가닥버섯의 자실체 생육에 미치는 영향을 조사한 결과 단파장인 Blue광과 Green광 그리고 White LED 광을 조사한 처리구에서 자실체 품질과 수량이 우수하였으며 장파장인 Red 광과 Yellow 광 처리구에서는 갓의 분화가 불량하고 대가 길어지는 경향을 보여 품질이 저조하였다. LED 광을 사용할 경우 가장 이상적인 조합은 Blue와 White 조합이 가장 좋은 것으로 밝혀졌다.
저비용 속성재배용 배지 개발을 위하여 액체 종균용 배지와 재배용 배지를 선발하였으며 액체종균용 배지는 미강배지가, 재배용배지는 미송톱밥, 콘코브, 대두피, 밀기울을 40:30:15:15(v/v)비율로 혼합한 배지에서 균사생장이 가장 빠르고 수량도 가장 좋았다.
<제 1 협동과제: 느티만가닥버섯의 신품종 육성>
방사선 처리선량 (감마선)에 따른 균사체 및 원형질체로부터 0.25KGy 방사선량에서 80%이상의 치사율을 보여 변이체 선발 유효조건으로 설정하여 감마방사선 조사 변이체 2,000균주를 분리하였다. 분리한 방사선조사 균사체의 변이는 생장이 느리고 균총 모양에 차이가 있는 것이 약 10% 분리되었다. 변이체균주중 plate상에서 균사의 생장이 빠른 500균주를 선발하여 1차로 M1세대 자실체를 형성하였다. 대조구로 사용한 느티만가닥 Brown균주와 비교하여 생장이 우수한 150균주를 2차로 선발하여 M2세대 자실체를 형성하였다. M2세대 자실체에서 대조균주보다 생장이 빠르고 생산량이 높은 50균주를 선발하였다. 최종으로 10균주의 생산과 품질이 우수한 균주를 선발하고, URP-PCR primer를 이용하여 느티만가닥버섯 방사선 변이체의 PCR 다형성 분석을 실시한 결과, 특이적인 PCR 다형성 밴드는 검출되지 않았지만 대조구로 사용한 느티만가닥 Brown균주보다 생산량이 증가하고, 품질이 우수한 10균주를 최종 선발하였다.
<제2협동과제: 느티만가닥버섯의 기능성 효능분석>
느티만가닥 버섯의 메탄올 추출물은 농도 의존적으로 콜라겐에 유도된 혈소판 응집반응을 억제하였으나 ADP나 트롬빈에 유도된 혈소판 응집반응에는 효과를 보이지 않았다. 추출물은 콜라겐에 유도된 혈소판의 세포내 칼슘농도의 증가와 ATP 분비를 감소시켰다. 또한 추출물은 콜라겐에 유도된 fibrinogen의 integrin 결합을 억제시켰음. 하지만 ERK의 인산화에는 아무런 효과도 보이지 않았다.
Abstract
▼
Ⅳ. Results of Research
st particulars project> Procurement of the genetic source of Hypsizygus marmoreus and development of stable cultivation technique.
111 strains of Hypsizigus marmoreus were collected from the domestic and international. The geographic distribution of stra
Ⅳ. Results of Research
st particulars project> Procurement of the genetic source of Hypsizygus marmoreus and development of stable cultivation technique.
111 strains of Hypsizigus marmoreus were collected from the domestic and international. The geographic distribution of strains collected wild strains of the two strains of Korea, 35 strains from China, 13 strains isolates in Taiwan and the rest of the introduction is unclear, but is estimated to be collected in Japan.
Genetic resources collected in this study, 91 strains formed fruiting bodies. Isolates HYM-031, -047 and -109 strains was form to large pileus and pale with fresh brown pattern on the surface of the pileus. These strains is determined by L. decastes. Out of 88 strains of Hypsizigus marmoreus, 10 of the remaining 88 isolates were strains of white remaining 78 strains formed fruiting bodies typical Hypsizigus marmoreus types of mushrooms had been stranded.
UPGMA analysis and Neighbor-Joining analysis based on RAPD-PCR with URP primer, a flexible relationship collecting area, the shape of fruiting bodies, without regard to such features were divided into four groups. Many strains showing 100% similarity with the same strain, or other farmers in the region is estimated to be widely grown. Isolates HYM-031, HYM-047, HYM-069 and HYM-109 is not classified as outgroup strains included in cluster also genetically very closely kinds of those species is estimated..
In order to analyze the cultivation-physiological characteristics were cultured on agar medium, mycelial growth of Hypsizigus marmoreus were RBA, MCM, MEA, PDA good order. Hypsizigus marmoreus of artificial cultivation of mushroom cultivation conditions, review the results of the ex-amount of days the fast spawn mycelial growth by 35 days late strains of mycelial growth was 55 working days up to and including maturing culture took a total of 80 days or more. The days required for initiation was vary by strain 7 to 19 days the growth was varied from 6 to 14 days. Inoculated with spawn and fruiting growth of the incubation period of days it takes a total cultivation period of 96-107 days have been spent. Artificial mushroom cultivation experiments carried out on 110 strains that caused the fruiting bodies of strain HYM-008, HYM-064, HYM-089, HYM-092, and four strains produced by more than 150g per a bottle productivity were very good, especially HYM-089 strains of white strains to form fruiting bodies being produced by more than 150g is considered very good. The HYM-009, and 17 strains have been produced more than 130g by growing varieties are considered very appropriate. However, most strains can produce more than 100g per a bottle growing varieties is not considered an issue, but the 23 strains including HYM-022, with very low productivity did not even 100g. Collected from wild and domestic disconnect HYM-069, HYM-109, HYM-110 strain was producing less than 100g.
LED lights for energy-saving cultivation techniques to develop a different wavelength NUV (Wave length 405 ㎚), Blue (Wave length 460 ㎚), Green (Wave length 530 ㎚), Yellow (Wave length 590 ㎚), Red (Wave length 630 ㎚), White (Wave length 6500K) LED light source, while investigating the mycelial growth and fruiting occurs, the impact on growth were investigated. In treatments red ligh, the mycelial growth of strains show similar dark condition, effect of red light was found to be without. However, Cool white, green, yellow light approximately 10-20% of treatment effects were light inhibited. Fruiting body survey of the impact on growth wave president and white LED light, blue light and green light treatments examined were excellent quality and quantity in the fruiting body president, Red light and yellow light-wave treatment and a poor differentiation pileus, price increases tend to show the quality was poor. If use the LED light is the ideal combination of blue and white combination was found to be the best.
To develop low-cost medium, rice bran eatract medium selected to best medium for liquid media. For cultivation, media with Douglas fir sawdust, corn cob, soybeen seedcake and whwat bran[40:30:15:15 (v/v)] mixture as a percentage mycelial growth in the medium of the fastest, most good quantity.
st cooperated project : Development of new variety of H. marmoreus >
This study was performed to develop new Hypsizygus marmoreus cultivars that have enhanced functional materials and improved physiological characteristics with mutagenesis by gamma ray irradiation. Protoplasts of H. marmoreus brown strain HYM-056 were irradiated by gamma ray for mutagenesis, and then 2,000 clones of mutants were randomly selected and the fruiting bodies were induced by bottle culture. Among them, 157 isolates with fast-growing, heavy and many fruiting body-producing were selected. The isolates were cultured in plastic bottle containing rice bran, barley hulls and fir sawdust to form the fruiting bodies. About 100 days after inoculation, characteristic of fruiting bodies were investigated. The isolates were divided into 6 groups based on color, shape and size of pileus, and length, diameter, number and weight of stipe. In addition, the genetic variation of the isolates was analyzed by URP-PCR fingerprinting.
nd cooperated project : Analysis of functional efficacy of H. marmoreus>
We found that H. marmoreus methanol extract dose-dependently inhibited platelet aggregation that was induced by collagen, but not by thrombin or ADP. Collagen-induced intracellular calcium concentration [Ca2+]i was also dose-dependently suppressed in H. marmoreus extract treated platelets. In addition, collagen-activated ATP secretion was lowered by the H. marmoreus extract treatment. Moreover, H. marmoreus extract was revealed to attenuate fibrinogen binding initiated by collagen. However, ERK phosphorylation was not affected.
In conclusion, H. marmoreus extract inhibit platelet aggregation induced by collagen, intracellular calcium mobilization, and dense granule secretion while suppressing integrin α IIbβ3 activation. Finally, this suggests that H. marmoreus could be developed as a functional food or phytomedicine against platelet related cardiovascular disease, including thrombosis, stroke, and atherosclerosis.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.