초록 ▼

○ 연구목표: 멜라닌 세포와 새로운 탐색계인 in vivo zebrafish 모델 시스템을 이용함으로써 기존 미백물질과 차별화된 신규 미백기능이 있는 활성소재를 개발하여 피부기능성원료의 수입대체효과와 기능성화장품을 포함한 전반적인 국내 화장품산업의 국제 경쟁력을 확보하고자 함.
○ 연구내용 및 연구결과
○ 1단계(1년차): 국외 논문 SCI 1편 게재 및 국제학술발표 3건 발표
• 새로운 탐색계인 in vivo zebrafish model 시스템을 이용한 미백효능 및 안정성 검색시스템 확립함.
• in vitr

○ 연구목표: 멜라닌 세포와 새로운 탐색계인 in vivo zebrafish 모델 시스템을 이용함으로써 기존 미백물질과 차별화된 신규 미백기능이 있는 활성소재를 개발하여 피부기능성원료의 수입대체효과와 기능성화장품을 포함한 전반적인 국내 화장품산업의 국제 경쟁력을 확보하고자 함.
○ 연구내용 및 연구결과
○ 1단계(1년차): 국외 논문 SCI 1편 게재 및 국제학술발표 3건 발표
• 새로운 탐색계인 in vivo zebrafish model 시스템을 이용한 미백효능 및 안정성 검색시스템 확립함.
• in vitro assay, S. bikiniensis, mouse melanocyte를 이용한 멜라닌생합성 저해활성 탐색
• 노박덩쿨 추출물의 Hexane, CHCl₃, EtOAc, BuOH의 다양한 유기용매에 의한 물질분배 후 멜라닌 저해활성 확인한 결과, Hexane & EtOAc fr.에서 독성없이 zebrafish의 body pigmentationd 감소됨.
• 노박덩쿨 Hexane fr.에서 순수화합물을 분리한후, 동정한 결과, 활성성분을 추출 분리하기 위하여 s 각종 기기분석을 통하여 추출 정제하여, 우선 순수 화합물A를 추출 정제하고, 물리 화학적 특성(appearance, molecular weight, molecular formula, ESI-MS 등)을 규명하며, 300Mz와 500Mz등의 NMR을 이용하여 분석을 하여, 화합물A의 분자량은 458로 확인 되었으며, 구조는 1β, 6α-diouetoxy-9α-benzoyloxydihydro- β-agarofuran으로 동정하였음.
○ 2단계(2년차): 국내논문 1 및 국외 SCI 1편 게재, 초청강연 2건, 학술대회 국내 4, 국제 2건, 입상수상
• 노박덩쿨 유래 EtOAc층으로부터 종 기기분석 (ESI-MS, 1H-NMR, 13C-NMR 등)을 통하여 구조를 확인해본결과, Kaemferitrin과 Kaemferol 4'-glucoside 7-rhamnoside 화합물로 동정되었으며, Hexane층으로부터 순수 화합물을 분리하여, 각종 기기분석을 통하여 구조를 확인해본결과, Celafolin C1, 1,2,8,9-Tetrahydroxydihydro-beta-agarofuran, 11,2,9-Trihydroxydihydro-beta-agarofuran, 1β, 6α-diouetoxy-9α-benzoyloxydihydro- β-agarofuran 화합물로 모두 6종의 화합물을 분리, 동정하였음.
• 노박덩쿨 유래 6개의 화합물을 분리 정제한 후, 그에 대한 멜라닌 생합성 저해활성을 측정해본 결과, 화합물중 celafolin C1의 Melan-a 세포에 대한 melanin contents와 tyrosinase activity가 가장 우수한 활성을 나타내었음.
• 노박덩쿨 유래 대사체인 멜라닌 생합성 저해제의 활성 검증 및 기전 연구; 6종의 화합물을 대상으로 in vivo zebrafish에 대한 phenotype observation을 확인한 결과, 그중 가장 활성이 celafolin C1이 멜라닌 저해활성이 가장 우수하였으며, 독성을 보이지 않으면서 zebrafish의 body pigmentation이 감소되는 결과를 보였음.
○ 3단계(3년차): 국내논문 5편, 국외 SCI 3편 게재, 학술대회 국내 2건, 국제 5건 발표
• 노박덩쿨 유래 우수한 멜라닌 생합성 저해제의 신호전달계 연구; celafolin C1에 대한 멜라닌형성 세포에서의 유전자 발현조절과 관련된 Tyrosinase, TRP-1, TRP-2 단백질의 발현 유무를 확인하기 위하여, Western blotting을 수행한 결과, 멜라닌 생합성에 중요한 역할을 하는 tyrosinase, TRP-1, TRP-2 단백질을 농도 의존적으로 감소되는 것을 확인하였음. 또한 MITF 단백질도 같은 양상으로 감소되는 것을 알수있었으며, 또한 p-Akt activation에 의해 멜라닌생합성이 저해되는 경로로 확인됨.
• 최근, 동물실험 대체법과 관련하여 특히 화장품에 관란 불필요한 동물실험 금지에 따라, 애초 계획중이던 mouse동물실험을 대체할만한, 3D culture관련 실험을 진행하였으나, 3D culture 실험은 샘플의 양이 세포배양때보다 5~10배 정도의 양이 들어가는 관계로, 화합물의 양이 많이 들어있던 Fraction을 기준으로 샘플을 처리후 확인해본 결과, control에 비해서는 melanin contents나 Lvalue lighteness은 약간의 활성을 보임.