초록 ▼

1. 국제 규격의 세포주 확보
○ 새로운 인간 배아줄기세포주 18종 수립 및 14종 줄기세포주 등록제 등록 완료
○ 질환별 역분화줄기세포주 8종 수립
○ 기 수립된 연구용 인간 배아줄기세포주 6종 단계별 뱅킹화로 다량의 분양 가능한 동결 바이알 확보
○ 인간 체세포복제배아줄기세포주 3종 수립 및 줄기세포주 등록제 등록 완료
○ 중간엽 줄기세포 10종 분리
○ 분리된 10종 중간엽줄기세포에서 4종 pre-Master Cell Bank(preMCB)로 구축
○ 중간엽줄기세포 4종에 대해 각각 80

1. 국제 규격의 세포주 확보
○ 새로운 인간 배아줄기세포주 18종 수립 및 14종 줄기세포주 등록제 등록 완료
○ 질환별 역분화줄기세포주 8종 수립
○ 기 수립된 연구용 인간 배아줄기세포주 6종 단계별 뱅킹화로 다량의 분양 가능한 동결 바이알 확보
○ 인간 체세포복제배아줄기세포주 3종 수립 및 줄기세포주 등록제 등록 완료
○ 중간엽 줄기세포 10종 분리
○ 분리된 10종 중간엽줄기세포에서 4종 pre-Master Cell Bank(preMCB)로 구축
○ 중간엽줄기세포 4종에 대해 각각 80 바이알 이상의 Research Cell Bank(RCB) 구축
2. 세포주 유지관리 시스템 개발
○ RNA-seq. 분석으로 인간 배아줄기세포주 2종과 역분화줄기세포주 1종, 동일한 체세포에서 수립된 체세포복제 배아줄기세포주 2종과 역분화줄기세포주 2종의 RNA 발현양상을 비교분석
○ 줄기세포의 유전적 안정성 검증을 위해 karyotype, MLPA, SNP-array, arrayCGH를 수행
○ 인간유래 지지세포주 개발
○ 효율적인 인간 배아줄기세포주 배양 및 동결 방법 개발
○ 인간 배아줄기세포주 배양 전반에 대한 표준운영지침 작성
○ 역분화줄기세포주 교육훈련지침 작성
○ 중간엽줄기세포의 배지, 성장인자, 계대배양시기, 특성분석에 대한 표준운영지침 작성
○ 줄기세포 분양·교육 시스템 홈페이지(http://www.stemcellkorea.org) 구축 및 활용
3. 세포주 분양
○ 인간 배아줄기세포주 114건 분양(체세포복제배아줄기세포주 포함)
○ 역분화줄기세포주 73건 분양
○ 중간엽줄기세포 6건 분양
4. 배양기술 전수를 위한 워크숍 운영
○ 총 62회 워크숍 운영, 총 313명 연구자 참여
5. 연구결과발표
○ 논문 19편(국외 SCI 7편, 국내 비SCI 12편), 학술대회 25회(국외 14회, 국내 11회)
○ 국내특허출원 1회, 국내특허등록 1회

Abstract ▼

Ⅲ. Result
1. Acquiring human stem cell lines which meets the international standards
• Establishment of 18 human embryonic stem cell lines (SNUhES39, SNUhES40, SNUhES41, SNUhES42, SNUhES43, CHA-hES 43~55), and registration of 14 hESC lines on Stem Cell Registry
• Establishment of safe dise

Ⅲ. Result
1. Acquiring human stem cell lines which meets the international standards
• Establishment of 18 human embryonic stem cell lines (SNUhES39, SNUhES40, SNUhES41, SNUhES42, SNUhES43, CHA-hES 43~55), and registration of 14 hESC lines on Stem Cell Registry
• Establishment of safe disease-specific 8 iPSC lines without the use of viral delivery
• Secured the high quality of a number of cryo vials used the 6 SNUhES cell lines (SNUhES1, SNUhES4, SNUhES7, SNUhES11, SNUhES16, SNUhES31) that passed the quality assurance phase
• Establishment and registration on Stem Cell Registry of 3 human SCNT-ESCs by the research collaboration with CHA Stem Cell Institute in USA (CHA-hES NT2, NT4, NT5)
• Isolation of bone marrows from 10 different male donors in hospital after blood test for infectious disease markers and MSCs were isolated from all the ten donors and fully characterized in GMP facility
• From the 10 kinds of MSCs, 4 kinds of cells were selected and cryopreserved as high quality MSCs (preMCB) that can grow up to 10 passage without change of proliferation rate and differentiation potential
• A research cell bank (RCB) was generated from each preRCB wherein cells were crypreserved at passage 4 about 20 days in culture that approximately >80 vials were made per RCB
2. Development of characterization and quality evaluation system of hESCs research
• Preparation of more than 30 samples of hESC lines for RNA-seq and comparative analysis of gene expression among 2 hESCs, 3 iPSCs, 2 SCNT-hESCs and 2 somatic cells using RNA-seq
• Application of karyotype, MLPA, SNP-array and array CGH on genetic stability test during hESC cultivation
• Establishment and cryopreservation of 15 human fibroblast cells derived from donated umbilical cord, testis and dermal skin tissue as human feeder cells
• Development of efficient cryopreservation protocols for hESCs
• Draw up a SNU IRMP hESC Lab. standard operating procedures for culture, archive, quality control and management of hESCs
• By developing a standardization for systematic training of iPSC technologies, standard training system have been established for researchers and research institutions
• Optimum culture protocols including media, growth factor, cell seeding density and harvesting time for BM-MSCs were established
• Build a homepage, Stem Cells Distribution Training Systems (http://www.stemcellkorea.org), and provided stem cell lines information, supplying stem cells and hands-on workshop program registration
3. Distribution of human embryonic stem cells to research groups
• The total of distribution was 76 times and provided to 15 kinds of SNUhES cell lines in 20 stem cell research groups
• 38 distribution cases of hESCs and SCNT-hESCs, and 14 distribution cases of hiPSC, 25 offer cases of hESCs related to register stem cells
• Acquired 25 iPSC lines which meets the international standards and have supplied 24 iPSC lines for 25 researcher or research institutions 59 times
• Research grade MSCs were supplied to 6 research groups
4. Development of training programs and hands-on workshop operating for hPSCs
• 62 times (attendance of 313 researchers) operating hands-on workshop about basic and new method (conventional culture, xeno-free culture, characterization, cryopreservation and thawing)
5. Publication the results
• Publication of 19 research papers (international journals (SCI): 7, domestic journal (non-SCI): 12), 25 posters (international: 14, domestic: 11), Korean patent application: 1, Korean patent register 1

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 3
• 보고서 요약서 ... 4
• 요 약 문 ... 5
• SUMMARY ... 7
• CONTENTS ... 9
• 목차 ... 10
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 11
• 1절. 연구개발의 목적 ... 11
• 2절. 연구개발의 필요성 및 범위 ... 11
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 14
• 1절. 세계적 수준 ... 14
• 2절. 국내 수준 ... 16
• 3절. 국내외 연구현황 ... 18
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 21
• 1절. 국제 규격의 세포주 확보 ... 21
• 2절. 세포주 유지 관리 시스템 개발 ... 31
• 3절. 세포주 분양 ... 60
• 4절. 배양기술 전수를 위한 워크숍 운영 ... 67
• 5절. 줄기세포주의 품질 표준화 기술 개발을 위한 줄기세포 연구 관련 최신 동향 조사 활동 ... 74
• 6절. 과제수행 연구결과 발표 ... 75
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 76
• 1절. 연차별 연구목표와 달성도 ... 76
• 2절. 세부별 연구목표와 관련분야에의 기여도 ... 78
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 83
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 87
• 제7장 연구시설ㆍ장비 현황 ... 95
• 제8장 참고문헌 ... 96
• 끝페이지 ... 98