보고서 정보
주관연구기관 |
농림축산검역본부 Animal and Plant Quarantine Agency |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2014-12 |
과제시작연도 |
2014 |
주관부처 |
농림축산식품부 Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA) |
등록번호 |
TRKO201600000697 |
과제고유번호 |
1545008953 |
사업명 |
농림축산검역검사기술개발 |
DB 구축일자 |
2016-04-30
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키워드 |
화훼구근류.바이러스.검역.진단.중합효소연쇄반응법.Flower-bulbs.Quarantine virus.RT-PCR.Multiplex PCR.
|
DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201600000697 |
초록
▼
4. 당해년도 연구결과 요약
과제명: 화훼구근류 잠복바이러스 유입방지 기술개발
∙ 화훼구근류 잠복바이러스 검사법 개발을 위한 바이러스 선정 및 목록작성
∙ 화훼구근류 잠복바이러스 Monoplex-PCR 검사법 개발
; PCR 검사법 미개발바이러스 9종에 대한 Monoplex-PCR 검사법 개발
; 개발대상 바이러스 - TNV, TBV, NMV, NYSV, NeLV, INSV, DMV, SLV, AILV
∙ 화훼구근류 잠복바이러스 Multiplex-PCR 검사법 개발
; 수입품목 12
4. 당해년도 연구결과 요약
과제명: 화훼구근류 잠복바이러스 유입방지 기술개발
∙ 화훼구근류 잠복바이러스 검사법 개발을 위한 바이러스 선정 및 목록작성
∙ 화훼구근류 잠복바이러스 Monoplex-PCR 검사법 개발
; PCR 검사법 미개발바이러스 9종에 대한 Monoplex-PCR 검사법 개발
; 개발대상 바이러스 - TNV, TBV, NMV, NYSV, NeLV, INSV, DMV, SLV, AILV
∙ 화훼구근류 잠복바이러스 Multiplex-PCR 검사법 개발
; 수입품목 12품목에 대한 6세트의 Multiplex-PCR 검사법 개발
; 개발대상 품목 - 수입품목 상위 12품목
∙ 화훼구근류 RNA 추출 효율성 검정
; 리아트리스 구근 등 6종 이상의 화훼구근류에 대한 RNA 추출 후 내재유전자를 활용한 PCR 검정을 통한 효율성 검정
; 감염바이러스를 활용한 구근 부위별 검출 실험
Abstract
▼
Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) is the rapid tool with highly specific and sensitive for detection of individual virus. We are developing RT-PCR detection system for major quarantine plant viruses and have reported RT-PCR detection methods for quarantine plant viruses. In th
Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) is the rapid tool with highly specific and sensitive for detection of individual virus. We are developing RT-PCR detection system for major quarantine plant viruses and have reported RT-PCR detection methods for quarantine plant viruses. In this study, we developed RT-PCR primer sets for nine plant viruses that are not currently reported in Korea. However, it could be potential harmful plant viral pathogens in economical crops. To design RT-PCR primers, we used reported gene sequences corresponding to the coat protein (TNV; Tobacco necrosis virus, TBV; Tulip breaking virus, NeLV; Nerine latent virus, NYSV; Narcissus yellow stripe virus, AILV; Artichoke italian latent virus, NMV; Narcissus mosaic virus, and SLV; Shallot latent virus), movement protein (DMV; Dahlia mosaic virus), and nucleocapsid protein (INSV; Impatiens necrotic spot virus) regions. Primer sets were successfully applied in detection of individual quarantine virus with high specificity and efficiency. As a result, this study demonstrates a useful protocol for detection of six quarantine viruses. In order to detect quarantine plant viruses, we established detection methods for flower-bulb viruses using multiplex RT-PCR assays. We developed six multiplex RT-PCR assays for fifteen major viruses (ArMV; Arabis mosaic virus, TRV; Tobacco rattle virus, TRSV; Tobacco ringspot virus, TNV; Tobacco necrosis virus, TBV; Tulip breaking virus, SLRSV; Strawberry latent ringspot virus, AILV; Artichoke Italian latent virus, INSV; Impatiens necrotic spot virus, IYSV; Iris yellow spot virus, DMV; Dahlia mosaic virus, SLV; Shallot latent virus, NeLV; Nerine latent virus, RpRSV; Raspberry ringspot virus, TBRV; Tomato blackring virus, and ToRSV; Tomato ringspot virus). The primer sets of assays were designed to produce different sizes of amplicons for the target viruses and the specificity of each primer pair was confirmed by sequencing the PCR products. The multiplex RT-PCR assays developed in this study will provide a simple, rapid, and convenient method for the detection of multiple viruses in flower-bulbs. Moreover, our results maybe useful for preventing the spread of contaminated bulbs through trade and for the purposes of screening viruses for quarantine.
목차 Contents
- 표지 ... 1
- 농림축산검역검사기술개발 연구과제 최종결과보고서 ... 2
- Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
- 1. 연구배경 ... 3
- 2. 연구최종목표 ... 4
- 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 5
- Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 5
- 1. 재 료 ... 5
- 2. 연구전략 및 방법 ... 6
- Ⅲ. 연구결과 ... 7
- 1. 화훼구근류 잠복바이러스 유입방지 기술개발 ... 7
- Ⅳ. 연구결과요약 ... 11
- V. 고찰 ... 12
- VI. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 13
- VII. 참고자료 ... 13
- VIII. 영문초록 ... 14
- 끝페이지 ... 14
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