초록 ▼

5. 최종 연구결과 요약

세부과제명: 야생동물 및 농가 사육 개와 고양이에서의 결핵병 감염 분포율 조사 및 진단기법 확립
- 결핵감염을 확인하기 위해 조직 시료는 폐 572건, 림프절은 521건, 편도 268건이고 혈청은 575건, 전혈은 417건으로 총 2,355건을 사용하였음. 축종별로는 고라니 384두, 너구리 223두, 멧돼지 646두를 포함해 총 1,333두였음.
- 야생동물 시료 1,363건을 배양하여 MGIT에서는 71개 (5.21%), 배양에서는 58개 (4.26%)의 Mycobacterium

5. 최종 연구결과 요약

세부과제명: 야생동물 및 농가 사육 개와 고양이에서의 결핵병 감염 분포율 조사 및 진단기법 확립
- 결핵감염을 확인하기 위해 조직 시료는 폐 572건, 림프절은 521건, 편도 268건이고 혈청은 575건, 전혈은 417건으로 총 2,355건을 사용하였음. 축종별로는 고라니 384두, 너구리 223두, 멧돼지 646두를 포함해 총 1,333두였음.
- 야생동물 시료 1,363건을 배양하여 MGIT에서는 71개 (5.21%), 배양에서는 58개 (4.26%)의 Mycobacterium 균주를 확인하였으며, MGIT 검체는 4개가 M. bovis, 6개가 M. avium, 30개가 M. intracellularae, 31개는 기타 NTM으로 확인되었고, 배양검체는 3개가 M. bovis, 4개가 M. avium, 17개가 M. intracellularae, 34개는 기타 NTM으로 확인되었음.
- 결핵발생농가 주변의 개, 고양이 시료 25건에 대해 dip-stick과 PCR 검사한 결과, dip-stick 검사에서는 모두 음성이었고, 1차 PCR 결과 개에서 1개 NTM 양성을 보였으나 이를 3차 PCR 하였을 때는 모두 음성이어서 M. avium이나 M. intracellulare가 아닌 기타 NTM인 것으로 확인되었음.
- 2012년부터 2014년 11월까지 991두의 야생동물로부터 얻은 전혈 417건, 혈청 643건, 총 1,060건의 시료에 대하여 dip-stick (rapid kit)을 이용한 결핵병 간이 항체검사를 실시함. 본 시험에 대한 양성율은 5.14%였으며, 항체양성인 야생동물은 멧돼지와 너구리, 고라니로 각각 1.55%와 22.63%, 6.29%의 양성율을 나타내었음. 항체양성개체는 일부 지역정보가 알려지지 않은 개체를 제외하고는 경기도와 강원도, 경상남도 지역에서 채취한 것이었고 지역별 항체 양성율은 각각 11.30%, 11.93%, 그리고 4.96%였음.
- 간이항체 검사와 조직시료 균분리 검사를 동시에 시행한 시료 244두 중 16개가 간이항체 검사에서 양성을 보였고 이 중 1두에 속하는 조직시료에서 M. bovis 균이 분리되었음. 간이항체 검사와 조직시료 균분리검사 결과의 불일치의 원인은, 기왕력이 있었던 개체에서 항체양성을 보일 수 있음을 감안하면 이미 결핵에 이환된 후 저절로 나은 개체여서 배양시 균이 분리되지 않은 것일 수도 있고, 초기 감염 단계에 있어 균이 분리되지 않았을 수도 있음. 이에 대해 계속적인 추적이 필요함.

제2세부과제명: Mycobacterium spp. 분리균주의 분자생물학적 역학 특성 분석
- 경기도 A지역 4개 농가의 소와 사슴에서 분리한 M. bovis와 같은 지역에서 2013년 포획된 야생 멧돼지에서 분리된 M. bovis를 12개의 primer로 VNTR typing 및 spoligotyping 하였을 때, 가축과 멧돼지에서 분리한 균주가 동일한 VNTR pattern (42533755434343)과 같은 spoligo pattern (SB0140)을 보였음. 포획지역의 결핵발생상황과 동일한 유전형임을 고려할 때 상호 전파가능성이 의심됨. 2014년 경기도 A지역에서 포획된 야생 멧돼지 분리주는 SB1040으로 2013년 포획된 SB0140분리주와는 달랐고, 인근 발생 농장의 분리주와도 달랐으나, 국내 다른 지역 농장에서 확인된 것과 동일한 VNTR타입이었음. 경기도 지역의 너구리유래 분리주는 국내에서 가장 많이 확인된 LL형 VNTR type(SB0140)이었음.
- 국내에서 분리한 M. bovis를 VNTR typing을 한 결과 유전자형이 LL (4237534343)인 분리주가 전체의 42.35%를 차지하여 가장 높은 빈도율을 보였고, 그 뒤로 NN (423275544443, 12.10%), XX (4233755431052,9.25%)형 순으로 확인되었음. VNTR-MIRU loci 중 QUB 3336이 가장 높은 다양도 (h=0.57)을 보였으며 모든 VNTR-MIRU loci의 조합은 0.79 이었음.
- 국내 분리주에 대한 분자생물학적인 특성분석 결과, Spoligotyping은 두 가지 type만 확인되어, 역학분석에 적용하기에 한계가 있었으며, MIRU-VNTR typing은 43가지 type이 확인되었으나, 일부 주요type에 치중되어 있고, 최다 유형인 LL형 같은 경우, 국내 여러지역에서 확인되므로, 역학분석상황에 따라 제한적으로 사용하는 것이 고려됨

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 농림축산검역검사기술개발 연구과제 최종결과보고서 ... 2
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 4
• 1. 연구배경 ... 4
• 2. 연구최종목표 ... 5
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 6
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 7
• 1. 재 료 ... 7
• 2. 연구전략 및 방법 ... 7
• Ⅲ. 연구결과 ... 10
• 1. 제1세부과제명: 야생동물 및 농가 사육 개와 고양이에서의 결핵병 감염 분포율 조사및 진단기법 확립 ... 10
• 2. 제2세부과제명 : Mycobacterium spp. 분리균주의 분자생물학적 역학특성분석 ... 27
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 38
• V. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 40
• Ⅵ. 주요연구과제 변경사항 ... 41
• 끝페이지 ... 41