초록 ▼

▪ 중간엽줄기세포가 분비하는 간조직 재생 후보물질 동정 및 발굴 중간엽줄기세포를 간세포-유사세포로 분화 유도하여 세크레톰을 수획한 후, 프로테오믹스 기법을 통해 세크레톰 내에서 32개의 조직재생 촉진 후보인자 단백질들을 동정하고, 추가적인 in vitro 세포분석을 통해 3가지 후보 단백질 (Decorin, PEDF, MFGE8)로 축약하였음. 더불어, 세크레톰에서 200 ㎍이상의 엑소좀을 분리하여 100만개 이상의 염기서열을 확보한 후 추가 분석을 통해 최종 3개의 간조직 재생 촉진 후보 마이크로 RNA를 선정하였음.

▪ 중간엽줄기세포가 분비하는 간조직 재생 후보물질 동정 및 발굴 중간엽줄기세포를 간세포-유사세포로 분화 유도하여 세크레톰을 수획한 후, 프로테오믹스 기법을 통해 세크레톰 내에서 32개의 조직재생 촉진 후보인자 단백질들을 동정하고, 추가적인 in vitro 세포분석을 통해 3가지 후보 단백질 (Decorin, PEDF, MFGE8)로 축약하였음. 더불어, 세크레톰에서 200 ㎍이상의 엑소좀을 분리하여 100만개 이상의 염기서열을 확보한 후 추가 분석을 통해 최종 3개의 간조직 재생 촉진 후보 마이크로 RNA를 선정하였음.

▪ 발굴된 후보물질의 조직재생 치료효과를 만성 간질환 모델에서 검증 만성 간질환 동물모델에 세크레톰 혹은 엑소좀을 주입한 뒤, 간조직을 PCR array를 통해 분석함으로서, 발굴된 후보인자들이 TGF-beta 신호전달체계에 대한 길항작용을 통해 항섬유화 효과를 나타냄을 발견하였음. 선정된 3종의 후보인자 중 MFGE8이 TGF-beta 신호전달을 저해함으로서 간섬유화를 유도하는 간성상세포의 활성을 감소시키고, 궁극적으로 섬유화된 간조직의 조직재생을 촉진함을 세계 최초로 확인하였음. 후보 단백질 및 miRNA에 대한 특허 출원을 완료하였으며, MFGE8의 만성 간질환 치료 효용성에 대한 연구결과는 소화기계 최고 학술지인 Gastroenterology (IF, 16.715)에 투고한 뒤 revision을 완료하고 최종 결과를 기다리고 있음.

(출처 : 보고서 요약서)

Abstract ▼

Results
· In mice with fibrosis, accumulation of extracellular matrix (ECM) proteins was significantly reduced 3 days after injecting secretomes from MSCs, and to a greater extent from hpMSCs (cells differentiated from MSC through hepatic differentiation protocols) ; numbers of activated HSCs tha

Results
· In mice with fibrosis, accumulation of extracellular matrix (ECM) proteins was significantly reduced 3 days after injecting secretomes from MSCs, and to a greater extent from hpMSCs (cells differentiated from MSC through hepatic differentiation protocols) ; numbers of activated HSCs that expressed the myogenic marker a-smooth muscle actin (a-SMA, encoded by ACTA2: actin, alpha 2, smooth muscle) were also reduced.
· Secretomes from UCMSCs, and to a greater extent from hpUCMSCs, reduced liver expression of multiple fibrotic factors, collagens, metalloproteinases, TGFB, and Smad proteins in the TGFB signaling pathways. In HSC cell lines and primary HSCs, TGFB1-stimulated upregulation of a-SMA was significantly inhibited (and SMAD2 phosphorylation reduced) by secretomes from UCMSCs, and to a greater extent from hpUCMSCs.
· We identified 32 proteins in secretomes of UCMSCs that were more highly concentrated in secretomes from hpUCMSCs and inhibited TGFB-mediated activation of HSCs. One of these, milk fat globule-EGF factor 8 (MFGE8), was a strong inhibitor of activation of human primary HSCs. We found MFGE8 to downregulate expression of TGFB type I receptor by binding to avb3 integrin on HSCs and to be secreted by MSCs from umbilical cord, teeth, and bone marrow.
· In mice, injection of recombinant human MFGE8 had anti-fibrotic effects comparable to those of the hpUCMSC secretome, reducing ECM deposition and HSC activation. Co-injection of an antibody against MFGE8 reduced the anti-fibrotic effects of the hpUCMSC secretome in mice. Levels of MFGE8 were reduced in cirrhotic liver tissue from patients compared to controls.

(출처 : SUMMARY)

목차 Contents

• 표지 ... 1제 출 문 ... 2보고서 요약서 ... 3요약 ... 4SUMMARY ... 5Contents ... 6목차 ... 71장. 연구개발과제의 개요 ... 8 1절. 연구개발 목적 ... 8 2절. 연구개발의 필요성 ... 8 3절. 연구개발 범위 ... 92장. 국내외 기술개발 현황 ... 10 1절. 경제적․산업적 현황 ... 10 2절. 기술적 현황 및 문제점 ... 103장. 연구수행 내용 및 결과 ... 14 1절. 제 1 세부과제 ... 14 2절. 제 2 세부과제 ... 284장. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 42 1절. 목표달성도 ... 42 2절. 관련분야 기여도 ... 475장. 연구결과의 활용계획 ... 486장. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 50 1절. 간세포분화유도 기술 연구 ... 50 2절. 만성 간섬유화 조절 microRNA 연구 ... 50 3절. MSC 유래 엑소좀 연구 ... 517장. 연구개발성과의 보안등급 ... 528장. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 529장. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 5310장. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 5411장. 기타사항 ... 5512장. 참고문헌 ... 56별첨 ... 59끝페이지 ... 63