초록 ▼

인체 암 유전체 데이터베이스 분석을 통하여 CTHRC1이 다수의 암 종에서 발현변화를 보이고 있음을 근간으로 하여 이 분자의 암 특이적 과발현 및 암 관련 기능성, 종양미세환경에서의 역할, 치료제 활용성 검증 등을 연구함.
1. 환자 유래 췌장암 조직과 정상 조직에서 CTHRC1의 발현 변화를 확인하였고，췌장암세포주에서의 CTHRC1 과발현을 관찰.
2. 췌장암세포주에 재조합 CTHRC1 단백질을 처리하면 농도 및 시간 의존적으로 세포 이동능과 부착능이 증강하는데, 이는 Src, MEK, Rac1 활성화에 기인함을 규명.

인체 암 유전체 데이터베이스 분석을 통하여 CTHRC1이 다수의 암 종에서 발현변화를 보이고 있음을 근간으로 하여 이 분자의 암 특이적 과발현 및 암 관련 기능성, 종양미세환경에서의 역할, 치료제 활용성 검증 등을 연구함.
1. 환자 유래 췌장암 조직과 정상 조직에서 CTHRC1의 발현 변화를 확인하였고，췌장암세포주에서의 CTHRC1 과발현을 관찰.
2. 췌장암세포주에 재조합 CTHRC1 단백질을 처리하면 농도 및 시간 의존적으로 세포 이동능과 부착능이 증강하는데, 이는 Src, MEK, Rac1 활성화에 기인함을 규명. Pull down assay를 통해 췌장암세포주에서 CTHRC1이 Wnt-receptor complex와 결합함을 관찰. CTHRC1 과발현세포주와 발현억제세포주에서도 마찬가지로 CTHRC1 발현에 따라 암세포의 이동능과 부착능이 조절됨을 검증.
3. 동물모델을 이용한 CTHRC1의 임상적 활용성 검증에서, CTHRC1 과발현에 의해 종양발달 및 전이가 증가되고 CTHRC1 발현억제에 의해 종양발달 및 전이가 감소되는 결과를 얻어 암 치료 타켓으로서의 가능성을 검증.
4. 치료용 항체 개발을 위해 CTHRC1을 타켓으로 하는 마우스 단일클론항체를 제조하였고, 특성분석 과정을 거쳐 효능이 우수한 항체를 선택함. CTHRC1을 표적으로 하는 단일클론항체는 세포수준에서 췌장암세포주를 포함한 다양한 고형암세포주의 이동능을 저해하는 능력을 보였고, 현재는 개체수준에서의 검증작업을 진행중.치료용 항체로의 가능성을 확인한 마우스 단일클론항체의 Fv 부위를 분석하고 이를 인간항체의 Fc에 연결하여 키메라 단일클론항체를 생산하는 동물세포주를 구축.

( 출처 : 요약서 4p )

Abstract ▼

Collagen triple helix repeat containing-l (CTHRC1) is a secreted protein involved in vascular remodeling, bone formation, and developmental morphogenesis. CTHRC1 has recently been shown to be expressed in human cancers such as breast cancer and melanoma. In this study, we show that CTHRC1 is highly

Collagen triple helix repeat containing-l (CTHRC1) is a secreted protein involved in vascular remodeling, bone formation, and developmental morphogenesis. CTHRC1 has recently been shown to be expressed in human cancers such as breast cancer and melanoma. In this study, we show that CTHRC1 is highly expressed in human pancreatic cancer tissues and plays a role in the progression and metastasis of the disease. CTHRC1 promoted primary tumor growth and metastatic spread of cancer cells to distant organs in orthotopic xenograft tumor mouse models. Overexpression of CTHRC1 in cancer cells resulted in increased motility and adhesiveness, whereas these cellular activities were diminished by down-regulation of the protein. CTHRC1 activated several key signaling molecules, induding Src, FAK, paxillin, MEK, ERK, and Racl. Treatment with chemical inhibitors of Src, MEK or Racl, and expression of dominant-negative Racl attenuated CTHRC1-induced cell migration and adhesion. Stabilization of Wnt5a complex by overexpressed CTHRC1 may induce activation of Src and FAK and turnover of paxillin. We generated several mouse monoclonal antibodies against CTHRC1 and slected 4H5 as an effective antibody for further studies. 4H5 showed an inhibitory activity to migration of many different types of human cancer cell lines including pancreatic cancer. Currently we are evaluating the effect in vivo using orthotopically-xenografted mice. We also established a CHO cell line for production of chimeric 4H5 antibody.
Collectively, our results suggest that CTHRC1 has a role in pancreatic cancer progression and metastasis by regulating migration and adhesion activities of cancer cells.

( 출처 : SUMMARY 8p )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 보고서 요약서 ... 4
• 요약문 ... 5
• SUMMARY ... 8
• CONTENTS ... 9
• 목차 ... 10
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 11
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 16
• 제 1 절 CTHRC1 개요 ... 16
• 제 2 절 항암 항체치료제 ... 18
• 제 3 절 췌장암 치료제 ... 20
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 23
• 제 1 절 신규 암 특성 증강 유도인자 CTHRC1의 발굴 ... 23
• 제 2 절 CTHRC1에 의한 암 특성 증강 ... 26
• 제 3 절 종양미세환경 내 CTHRC1 역할 ... 37
• 제 4 절 CTHRC1 제어 항체 활용성 검증 ... 39
• 제 5 절 CTHRC1 수용체 발굴 ... 47
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 50
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 55
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 56
• 제 7 장 연구시설·장비 현황 ... 59
• 제 8 장 참고문헌 ... 60
• 끝페이지 ... 64