초록 ▼

○ 연구의 목적 및 필요성 : 2003년 대유행 이후 야생동물에 의한 사스-유사 코로나바이러스의 변종이 계속 발견됨에 따라, 사람으로의 전파를 통한 대유행발생의 가능성이 항시 존재한다고 할 수 있다. 사스 재유행을 대비한 최선의 대비책은 백신을 통한 예방이며, 평시에 사스 예방에 가장 효과적인 백신 후보물질을 확보하고 그 효능을 평가하여 사용가능성을 미리 확보하는 것이 필요하다.

○ 연구목표 : 본 연구의 최종목표는 SARS-CoV 특성 분석 tool로서 SARS-CoV 유전자 분석방법 및 BSL-2에서 이용가능한 ps

○ 연구의 목적 및 필요성 : 2003년 대유행 이후 야생동물에 의한 사스-유사 코로나바이러스의 변종이 계속 발견됨에 따라, 사람으로의 전파를 통한 대유행발생의 가능성이 항시 존재한다고 할 수 있다. 사스 재유행을 대비한 최선의 대비책은 백신을 통한 예방이며, 평시에 사스 예방에 가장 효과적인 백신 후보물질을 확보하고 그 효능을 평가하여 사용가능성을 미리 확보하는 것이 필요하다.

○ 연구목표 : 본 연구의 최종목표는 SARS-CoV 특성 분석 tool로서 SARS-CoV 유전자 분석방법 및 BSL-2에서 이용가능한 pseudovirus의 항원성을 확인하고 SARS-CoV와 가장 연관관계가 가까운 HCoV-HKU1의 국내 유행양상 파악과 유전자 변이를 분석하고자 하였다. 또한 SARS-CoV의 RBD를 안정적으로 발현하는 CVB3 hybrid progeny virus의 항원성 확인 및 이의 면역원성을 분석함으로서 SARS-CoV의 백신으로서의 이용가능성을 제시하고자 하였다.

○ 연구 내용 및 범위 : SARS-CoV 특성분석 tool로서 SARS-CoV 및 SARS-CoV와 유전적 연관관계가 가장 가까운 HCoV-HKU1의 실시간 유전자 분석법을 확립하고 국내 발생 현황 분석을 수행하였다. 또한 고위험병원체로 분류된 SARS-CoV의 위해도를 제거한 SARS-pseudovirus를 제작하였으며 기존의 SARS-RBD/CVB3의 불안한 유전자 안정성을 극복하기 위하여 새로운 hybrid virus를 제작하고 이의 면역원성을 분석하고자 하였다.

○ 연구과제 결과 : SARS-CoV 및 HCoV-HKU1을 효과적으로 검출할 수 있는 실시간 유전자 분석법을 확립 하였으며 이에 사용되는 각각의 standard RNA material을 확보 하였다. 또한 SARS spike 단백질을 함유한 SARS-pseudovirus의 항체 인식능력을 확인함으로써 SARS 항원성을 보유한 안전한 대체 system을 확립 하였고 새로이 제작된 SARS-RBD/CVB3 hybrid 바이러스의 실험동물 감염을 통하여 anti-SARS 항체 유발효능을 분석하고 있다.

○ 연구과제결과의 활용계획 : SARS-CoV 및 HCoV-HKU1 실시간유전자 분석법은 SARS의 재발생시를 대비할 수 있고, HCoV의 유전자 변이 분석에 활용될 수 있을 것이다. 본 연구에서 확보한 HCoV-HKU1 유전자는 전세계의 관련 연구자들과 정보공유를 위하여 GenBank에 등록되었다. SARS-pseudovirus는 SARS 항원성 응용연구에의 안전한 활용이 가능하며, 현재 진행중인 SARS-RBD/CVB3의 면역원성이 확인된다면 SARS 재유행에 대비한 백신 후보물질의 license-out이 가능하리라 생각된다. 이상의 결과는 국외 관련전문학술지 2편에 투고할 예정이다.

( 출처 : 요약서 )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 내부연구과제 연구최종보고서 ... 2
• 요 약 서 ... 3
• 제1장 연구의 목적 및 필요성 ... 4
• 제2장 연구의 연구목표 및 달성도, 대외기여도 ... 7
• 제3장 국내·외 기술개발 현황 ... 8
• 제4장 연구의 내용 및 결과 ... 10
• 가. SARS-CoV 실시간 유전자 분석법 확보 ... 10
• 나. HCoV 유전자 확보 및 HCoV-HKU1 염기서열 분석 ... 11
• 다. SARS-CoV 유전자 미보유 pseudovirus 바이러스 적합성 및 항원성 평가 ... 18
• 라. SARS-CoV RBD-CVB3 hybrid 바이러스의 최적 배양조건 확립 ... 21
• 마. SARS-CoV RBD-CVB3 hybrid 바이러스의 세포병변 효과 확인 ... 23
• 바. SARS-CoV RBD-CVB3 hybrid 바이러스의 유전자 안정성 확인 ... 24
• 사. VP 영역을 RBD 삽입부위로 이용한 CVB3 cloning 및 hybrid virus 제작 ... 29
• 아. SARS-CoV RBD-CVB3 바이러스접종 및 항체 형성능 확인 ... 32
• 자. SARS-CoV RBD-CVB3 바이러스에 의해 형성된 항체의 방어능력 확인 ... 33
• 제5장 연구결과의 활용계획 ... 34
• 가. SARS-CoV realtime RT-PCR system ... 34
• 나. HCoV-HKU1 분자역학 결과 및 realtime RT-PCR system ... 34
• 다. Lentivirus를 이용한 SARS-CoV spike 함유 pseudovirus ... 34
• 라. SARS-RBD/CVB3 hybrid virus의 활용방안 ... 35
• 제6장 연구의 주요 연구 성과 및 계획 ... 36
• 제7장 주요 연구 변경사항 ... 36
• 제8장 연구비 집행 실적 내역 ... 37
• 제9장 참여연구원 ... 38
• 제10장 참고문헌 및 첨부문서 ... 39
• 가. 참고문헌 ... 39
• 나. 첨부문서 ... 43
• 끝페이지 ... 45